Purifikace proteinů je klíčovým krokem v biofarmaceutickém výzkumu, proteomice a průmyslové biotechnologii. Spočívá v izolaci konkrétního proteinu ze složitých biologických směsí při zachování jeho nativní struktury a aktivity. Tradičním metodám, jako je srážení nebo dialýza, chybí přesnost potřebná pro izolaci proteinů s vysokou čistotou, zejména pokud se jedná o terapeutické cíle nebo složité proteinové komplexy.Purifikace proteinů pomocí vysoce výkonné kapalinové chromatografie (HPLC) tuto oblast zásadně proměnila, protože nabízí vysoké rozlišení, reprodukovatelnost a rychlost, díky čemuž je nepostradatelná jak pro analytické, tak pro preparativní pracovní postupy.<h3>Co je purifikace proteinů pomocí HPLC?</h3>Purifikace pomocí HPLC využívá selektivních interakcí mezi proteiny a stacionární fází při průchodu mobilní fáze kolonou pod vysokým tlakem. Separace je založena na rozdílech ve velikosti, náboji, hydrofobnosti nebo afinitě proteinů ke stacionární fázi.Na rozdíl od konvenčních nízkotlakých metod, jako je gelová filtrace nebo afinitní purifikace, probíhá purifikace pomocí HPLC pod vysokým tlakem (až 6000 psi), což umožňuje rychlejší separaci s vyšším rozlišením a kvantitativní výtěžností. HPLC navíc umožňuje přesnou kontrolu parametrů, jako je složení gradientu, pH a teplota, čímž minimalizuje variabilitu mezi jednotlivými běhy.Na rozdíl od tradiční kolonové chromatografie používá HPLC menší částice stacionární fáze (3–10 µm), což vede ke zvětšení povrchové plochy a ostřejším <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.phenomenex.com/resources/knowledge-center/hplc-knowledge-center/how-to-reduce-peak-tailing-in-hplc">tvarům píků</a>, které jsou zásadní pro hodnocení čistoty proteinů a škálování procesu purifikace.<h3>Typy HPLC používané pro purifikaci proteinů</h3>V závislosti na fyzikálně-chemických vlastnostech cílového proteinu lze použít různé režimy HPLC. Každá metoda nabízí jedinečné výhody z hlediska selektivity a výtěžnosti.<h4>HPLC s reverzní fází (RP-HPLC)</h4><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.phenomenex.com/techniques/hplc-reversed-phase">HPLC s reverzní fází</a> separuje proteiny na základě hydrofobních interakcí mezi analytem a stacionární fází, typicky na kolonách se stacionární fází C4, C8 nebo C18 na bázi silikagelu. Proteiny se eluují pomocí gradientů organických rozpouštědel (obvykle acetonitrilu nebo methanolu) v přítomnosti těkavých kyselin, jako je kyselina mravenčí nebo trifluoroctová (TFA).Tato metoda poskytuje výjimečné rozlišení a běžně se používá k purifikaci proteinových fragmentů a analýze rekombinantních proteinů. Například HPLC s reverzní fází se rutinně využívá při přípravě peptidových léčiv, například při procesu <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/an59280424_w_fc6c3ac6f0.pdf">přípravy a purifikace tirzepatidu</a>, kde jsou čistota a výtěžnost rozhodující pro účinnost léčiva. Vzhledem k použití organických rozpouštědel však může RP-HPLC způsobit částečnou denaturaci, což omezuje její využití při purifikaci nativních proteinů.<h4>Iontově výměnná HPLC (IEX-HPLC)</h4><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.phenomenex.com/techniques/hplc-sec">IEX-HPLC</a> separuje proteiny na základě jejich čistého povrchového náboje. Kationtová výměna (s negativně nabitou stacionární fází) váže kladně nabité proteiny, zatímco aniontová výměna funguje opačně.Postupným zvyšováním koncentrace soli nebo změnou pH mobilní fáze se proteiny eluují podle svých izoelektrických bodů (pI).Tento přístup je velmi vhodný pro purifikaci nativních proteinů, analýzu proteinových izoforem a charakterizaci nábojových variant, což jsou zásadní kroky při výrobě terapeutických proteinů.<h4>Velikostně-vylučovací chromatografie (SEC-HPLC)</h4>SEC separuje molekuly na základě jejich hydrodynamického poloměru. Větší proteiny se eluují jako první, protože jsou vyloučeny z pórů stacionární fáze, zatímco menší molekuly do nich pronikají a eluují se později.<a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.phenomenex.com/techniques/hplc-sec">SEC-HPLC</a> je nedenaturační metoda, která je ideální pro stanovení molekulové hmotnosti proteinů, jejich oligomerního stavu a obsahu agregátů. Často se používá jako závěrečný purifikační krok po iontoměničové nebo afinitní chromatografii.<h4>Afinitní HPLC</h4>Afinitní HPLC využívá specifické biologické interakce mezi cílovým proteinem a ligandem imobilizovaným na stacionární fázi (např. protilátkami, kovovými ionty nebo tagy, jako jsou His-tag nebo GST).Při použití v systému HPLC poskytuje afinitní chromatografie vysokou selektivitu a čistotu (&gt;95 %) v jediném kroku. Často se využívá při purifikaci rekombinantních proteinů a v aplikacích zaměřených na zachycení biomarkerů.<h3>Výhody použití HPLC pro purifikaci proteinů</h3>Purifikace proteinů pomocí HPLC kombinuje analytickou přesnost chromatografie s preparativními možnostmi potřebnými pro výzkum i biovýrobu. Mezi hlavní benefity patří:<h5>Výhoda &nbsp;/ &nbsp;Popis</h5>Vysoké rozlišení a selektivita<ul><li>Menší částice stacionární fáze a optimalizované průtokové podmínky umožňují HPLC rozlišit proteiny lišící se pouze nepatrnými fyzikálně-chemickými vlastnostmi. Tato přesnost je zásadní pro rozlišení izoforem, mutantů a posttranslačně modifikovaných variant.</li></ul>Přesnost a reprodukovatelnost<ul><li>Automatizované systémy udržují stabilní průtok, přesnou kontrolu gradientu a citlivost detekce, čímž zajišťují reprodukovatelné výsledky nezbytné pro regulované biofarmaceutické pracovní postupy.</li></ul>Rychlost a účinnost<ul><li>Moderní systémy UHPLC vybavené plně porézními částicemi nebo částicemi typu core–shell dosahují rychlejší separace bez ztráty rozlišení a zkracují dobu analýzy až o 50 % ve srovnání s klasickými metodami.</li></ul>Kompatibilita a škálovatelnost<ul><li>Systémy HPLC jsou vysoce přizpůsobivé a podporují jak charakterizaci v analytickém měřítku, tak purifikaci v preparativním měřítku. Metody vyvinuté pro mikrogramová množství lze plynule převést na miligramová nebo gramová množství využívaná při vývoji výrobních procesů.</li></ul><h3>Faktory ovlivňující účinnost purifikace proteinů pomocí HPLC</h3>Optimalizace HPLC pro purifikaci proteinů vyžaduje nalezení rovnováhy mezi čistotou, výtěžností a produktivitou. Výsledky významně ovlivňují následující parametry:<ul><li>Cíl purifikace: Určete, zda je prioritou výtěžnost, čistota nebo produktivita. Analytické separace upřednostňují rozlišení, zatímco preparativní separace kladou důraz na výtěžnost a rychlost procesu.</li><li>Rozpustnost a stabilita proteinů: Nestabilní proteiny nebo proteiny náchylné k agregaci mohou vyžadovat nízké teploty nebo přídavek látek, jako je glycerol či šetrné detergenty.</li><li>Typ stacionární fáze a velikost částic: Zvolte vhodnou stacionární fázi (na bázi siliky, polymerní nebo typu mixed-mode) a velikost částic s ohledem na molekulovou hmotnost a hydrofobitu cílového proteinu.</li><li>pH mobilní fáze a iontová síla: pH by mělo být optimalizováno v blízkosti izoelektrického bodu (pI) proteinu, nikoli však přímo na jeho hodnotě. Solné gradienty ovlivňují jak rozlišení, tak eluční sílu.</li><li>Průtok a profil gradientu: Strmější gradienty zkracují dobu analýzy, mohou však snížit kvalitu separace.</li><li>Konečná forma purifikovaného proteinu: Při přípravě vzorku pro skladování nebo následné analýzy zvažte složení a koncentraci pufru, aby byla zachována biologická aktivita proteinu.</li></ul><h3>Osvědčené postupy pro purifikaci proteinů pomocí HPLC</h3>Dodržování správné chromatografické praxe pomáhá zajistit konzistentní a kvalitní výsledky.<ul><li>Kondicionování a skladování kolony: Nové <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products?category=48&amp;manufacturerItems=50">HPLC kolony</a> vždy ekvilibrujte alespoň 10 objemy mobilní fáze (10 CV) a skladujte je ve vhodném rozpouštědle obsahujícím konzervační přísady.</li><li>Zabraňte srážení proteinů: Udržujte vhodnou iontovou sílu a při purifikaci nativních proteinů se vyhněte denaturačním rozpouštědlům nebo vysokému podílu organických rozpouštědel.</li><li>Minimalizujte ztráty vzorku: Používejte hadičky a vialky s nízkou adsorpcí proteinů a minimalizujte mrtvý objem systému.</li><li>Řešení problémů:<ul><li>Frontování píku: může naznačovat přetížení kolony</li><li>Rozšiřování píků: může být způsobeno nerovnoměrným průtokem mobilní fáze kolonou</li><li>Carry-over (přenos z předchozího nástřiku): lze omezit prodloužením promývacích cyklů nebo použitím účinnějších regeneračních rozpouštědel</li><li>Ucpávání kolony: vzorky před analýzou filtrujte (0,22 µm) a systém pravidelně proplachujte</li></ul></li></ul>

Purifikace proteinů pomocí HPLC: metody, výhody a osvědčené postupy

<div><div>Pátrání po zmizelém profesorovi, luštění tajných zpráv i hledání převratného léčiva. Outdoorová hra Mise Retrovirus se odehrává v pražských Dejvicích a přibližuje český výzkum, který stál u zrodu světově významných antivirotik. Inspirací k jejímu vzniku bylo blížící se 90. výročí narození chemika Antonína Holého a vznikla díky spolupráci Ústavu organické chemie a biochemie AV ČR (ÚOCHB) a herního zážitkového studia Get Out Fun.</div></div><div>„Profesor Viktor Krystal zmizel a spolu s ním i klíčový výzkum nového antivirotika. Čas běží a vy jste jediní, kdo dokáže rozluštit stopy ukryté mezi šiframi, molekulami a tajnými zprávami.“ Tak začíná příběh nové hry, která je určena všem, kdo mají rádi únikové hry, dobrodružství nebo šifry. Fiktivní příběh hry přitom stojí na skutečných vědeckých poznatcích.Hra je určena hráčům od 13 let a je dostupná ve dvou variantách – jako dvouhodinová <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.getoutfun.com/hra/mise-retrovirus">venkovní hra</a> v pražských Dejvicích, která začíná na Flemingově náměstí před ÚOCHB, a <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.getoutfun.com/hra/mise-retrovirus-kdekoliv">online verze</a>, kterou si lze zahrát odkudkoliv. Cílem projektu je představit veřejnosti zábavnou formou výzkum antivirotik a přiblížit práci vědců, jejichž výzkum vedl ke vzniku moderních antivirotik.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/UOCHB_Nova_outdoorova_hra_predstavuje_cesky_vyzkum_antivirotik_2_38fdaea4b8.jpg" alt="ÚOCHB: Nová outdoorová hra představuje český výzkum antivirotik" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_UOCHB_Nova_outdoorova_hra_predstavuje_cesky_vyzkum_antivirotik_2_38fdaea4b8.jpg 208w," sizes="100vw" width="1500" height="1125">„Chemie, biochemie ani virologie nemusí zůstávat zavřené v učebnicích nebo laboratořích. Díky hře se z nich stává dobrodružství v ulicích, při kterém se hráči navíc vzdělávají. Hravost je klíčová, díky ní se i složitá témata mohou stát přístupná, zapamatovatelná a překvapivě zábavná,“ říká odborný garant hry, popularizátor vědy Oldřich Hudeček z ÚOCHB.Některé motivy ve hře odkazují na vědecký odkaz Antonína Holého, jehož objevy položily základy moderních antivirotik, která dnes pomáhají milionům pacientů po celém světě. Hra zároveň připomíná blížící se 90. výročí jeho narození.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/UOCHB_Nova_outdoorova_hra_predstavuje_cesky_vyzkum_antivirotik_3_60b7dbed48.jpg" alt="ÚOCHB: Nová outdoorová hra představuje český výzkum antivirotik" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_UOCHB_Nova_outdoorova_hra_predstavuje_cesky_vyzkum_antivirotik_3_60b7dbed48.jpg 234w," sizes="100vw" width="1500" height="1001">Propojení vědeckého tématu a hry představuje neobvyklý formát popularizace vědy. „Převést skutečné vědecké poznatky do podoby napínavé outdoorové hry pro nás byla zajímavá výzva. Podařilo se nám propojit moderní herní principy s reálnou vědou a vytvořit příběh, který hráče provede nejen zákoutími Prahy 6, ale i světem virologie a vývoje antivirotik,“ popisuje vznik hry Ivan Lukáš, obchodní ředitel Get Out Fun.<blockquote><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.getoutfun.com/hra/mise-retrovirus">Outdoorová</a> i <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.getoutfun.com/hra/mise-retrovirus-kdekoliv">online</a> verze hry jsou pro všechny dostupné zdarma. Ke hraní stačí mobilní telefon s aplikací Get Out Fun, která hráče provede příběhem i jednotlivými úkoly. Na podzim bude hra dostupná také v angličtině.</blockquote></div>

Nová outdoorová hra představuje český výzkum antivirotik

Vědci z CEITEC Vysokého učení technického v Brně uspěli v silné mezinárodní konkurenci a získali prestižní grant Human Frontier Science Program (HFSP), který podporuje průlomový základní výzkum. Brněnský tým vedený Ericem Danielem Glowackým přinese do mezinárodního projektu unikátní technologii, která umožňuje přesně řídit množství kyslíku v tkáních. Právě změny okysličení totiž mohou zásadně ovlivňovat, jak se buňky v raném embryonálním vývoji specializují.Projekt s názvem „Nejen teorie: regulace vzorování embryí savců pomocí elektrochemických gradientů”&nbsp;řeší CEITEC VUT v konsorciu s biology z Max Planckova institutu molekulární buněčné biologie a genetiky a Yaleovy univerzity. Role brněnského týmu je v projektu klíčová:&nbsp;dodává technologii, která umožňuje v tkáních cíleně vytvářet oblasti s různou hladinou kyslíku a sledovat, jak na tyto změny buňky reagují.„Specialitou naší výzkumné skupiny je elektrochemie, věnujeme se zejména působení elektrického proudu na okysličení tkání a sledování následných chemických změn v nich. Abychom mohli provádět určité typy experimentů, vyvinuli jsme si vlastní komplexní systém jehlových sond, elektrod a softwaru, díky nimž dokážeme ovlivňovat a kontrolovat, kolik kyslíku se vyskytuje v tkáních, kterými proud probíhá,” vysvětluje vedoucí týmu Eric Daniel Glowacki. Pomocí těchto nástrojů vědci dokážou ve vzorcích vytvářet i oblasti, v nichž je kyslíku nedostatek či dokonce zcela chybí. Právě změny hladiny kyslíku jsou pro biologii zásadní – ovlivňují metabolismus buněk a tím i jejich chování. V některých typech výzkumu je taková kontrola prostředí klíčová. „Náš systém není univerzální, pro každou aplikaci jej upravujeme na míru. Do budoucna ale chceme rozšířit jeho varianty tak, aby byl využitelný v co nejširším spektru výzkumů,“ doplňuje Glowacki.Technologii z CEITEC už v minulosti využili vědci z Max Planckova institutu při studiu raného embryonálního vývoje. Zaměřovali se na to, jak metabolická aktivita kmenových buněk (nespecializovaných buněk, které jsou schopny sebeobnovy a přeměny na specializované buňky, např. svalové, nervové nebo krevní) ovlivňuje jejich další vývoj i vývoj buněk v jejich okolí.Na tuto práci navazuje nově podpořený projekt Human Frontier Science Program (HFSP). Jeho cílem je přezkum zhruba sto let staré teorie&nbsp;amerického zoologa Charlese Manninga Childa, která vysvětluje, jak se u mnohobuněčných organismů kmenové buňky postupem času mění na zralé buňky s konkrétní funkcí a strukturou. Tříletý projekt s dotací 7,5 milionu korun pro každého z partnerů bude na myších embryích přímo v děloze ověřovat novou hypotézu, že pro konkrétní přeměnu buněk je klíčové také místo v tkáni a čas, během nějž k úbytku kyslíku dochází.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/CEITEC_Technologie_vedcu_z_CEITEC_pomuze_odhalit_jak_kyslik_ridi_vyvoj_embryi_2_1ea86be296.jpeg" alt="CEITEC/ Lukáš Havlák: Technologie vědců z CEITEC pomůže odhalit, jak kyslík řídí vývoj embryí: Technologie k projektu HFSP na CEITEC VUT." srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_CEITEC_Technologie_vedcu_z_CEITEC_pomuze_odhalit_jak_kyslik_ridi_vyvoj_embryi_2_1ea86be296.jpeg 235w," sizes="100vw" width="1600" height="1067">Lepší pochopení mechanismů, které řídí raný embryonální vývoj, může v budoucnu přispět například k rozvoji regenerativní medicíny, výzkumu vývojových poruch nebo efektivnějšímu využití kmenových buněk v biomedicíně.„To, že náš projekt uspěl, je pro nás velká čest, ale i závazek. HFSP je unikátní program věnovaný primárnímu výzkumu, v němž se řešitelé snaží najít odpovědi na základní a dosud nezodpovězené otázky biologie,“,&nbsp;říká Glowacki. Úspěšnost v programu je přitom velmi nízká – uspějí pouze dvě až tři procenta z tisíců přihlášených projektů. Podmínkou je mimo jiné i mezinárodní spolupráce napříč kontinenty a zcela novátorský přístup.„Díky tomu jsme se stali součástí komunity špičkových vědců z celého světa. I když výsledky takového výzkumu nejsou okamžitě aplikovatelné, jejich dlouhodobý přínos pro společnost je zásadní,“ uzavírá Glowacki.<blockquote><h4>O HFSP</h4>Mezinárodní organizace Human Frontier Science Program Organization (HFSPO) vznikla v roce 1989 ve Francii. Myšlenka na vytvoření této mezinárodní komunity, která by se věnovala základnímu výzkumu, však vzešla ještě o několik let dříve v Japonsku.Program&nbsp;financuje špičkový výzkum v oblasti základních věd o živé přírodě, zejména biologie, fyziky, chemie, matematiky a informatiky, a podporuje inovativní, mezioborové projekty, které by se jinak financovaly jen obtížně. Finanční podporu HFSPO získává například od francouzské, japonské, švýcarské či jihokorejské vlády, dále z USA, EU, Singapuru, Nového Zélandu nebo Velké Británie. Od vzniku programu v roce 1989 získalo 31 vědců podpořených HFSP Nobelovu cenu. Zatím posledními oceněnými byli v roce 2024 David Baker za chemii (počítačový návrh proteinů) a Gary Ruvkun za fyziologii a medicínu (objev mikroRNA).</blockquote>

Technologie vědců z CEITEC pomůže odhalit, jak kyslík řídí vývoj embryí

Akademie

Popularizace

Věda a výzkum

Článek

Produkt

Je výzkumné centrum zaměřené na oblast živých věd, pokročilých materiálů a technologií.  Vznikl v roce 2011 na základech šesti významných brněnských univerzit a výzkumných institucí. Od doby jeho nedávného vzniku se daří budovat významné vědecké centrum, a již nyní se řadí mezi špičkové evropské instituce.

CEITEC

ÚOCHB AV ČR je přední mezinárodně uznávaná vědecká instituce, jejímž hlavním posláním je základní výzkum v oblasti chemické biologie a medicinální chemie, organické a materiálové chemie, chemie přírodních látek, biochemie a molekulární biologie, fyzikální chemie, teoretické chemie a analytické chemie.

Ústav organické chemie a biochemie AV ČR

Společnost Phenomenex je celosvětovým technologickým lídrem, který se zabývá vývojem nových řešení v oblasti analytické chemie, jež řeší požadavky analytiků na separace a purifikace v průmyslových, vládních a akademických laboratořích.

Phenomenex

DataApex

Tosoh Bioscience

Agilent Technologies

US HUPO

Thermo Fisher Scientific

SelectScience

SCIEX

<h4>LC-MS/MS fundamentals webinar series 2.0</h4>
Advanced techniques for data acquisition and processing
Elevate your analytical expertise with advanced techniques and workflows
Sharpen your data acquisition and processing skills with our LC-MS/MS 2.0 webinar series. Based on our LC-MS/MS 1.0 webinar series, these sessions will go beyond the fundamentals of LC-MS/MS and introduce ways to advance your analytical methods and data processing workflows.
Every other week, we will explore how to optimize SCIEX OS software with short, 30-minute expert-led presentations.
<h4>This webinar:</h4>
June 18, 2024 11:00 a.m. - 11:30 a.m. CET - It&#39;s a TRAP! Getting the most out of your QTRAP system
Learn when to utilize QTRAP functionality to create more selective and sensitive methods.
<h4>Other webinars from the series:</h4>
May 7, 2024 11:00 a.m. - 11:30 a.m. CET - <a href="https://lcms.cz/webinar/3820">Beyond the fundamentals</a>
May 21, 2024 11:00 a.m. - 11:30 a.m. CET - <a href="https://lcms.labrulez.com/webinar/3852">Advanced MS/MS method building</a>
Gain insight into advanced features for maximizing sensitivity in your mass spectrometry analyses.
June 4, 2024 11:00 a.m. - 11:30 a.m. CET - <a href="https://lcms.labrulez.com/webinar/3853">Mastering chromatography</a>
Discover how to optimize your chromatography for even the most challenging compounds while creating and building LC methods.
July 2, 2024 11:00 a.m. - 11:30 a.m. CET - <a href="https://lcms.labrulez.com/webinar/3855">Troubleshooting at the source</a>
Acquire the knowledge needed to optimize source parameters and identify and resolve ionization-related problems.
July 16, 2024 11:00 a.m. - 11:30 a.m. CET <a href="https://lcms.labrulez.com/webinar/3856">Automating data processing</a>
Learn how to automate your data processing with custom flagging and rules for efficient data review in SCIEX OS software.
July 30, 2024 11:00 a.m. - 11:30 a.m. CET - <a href="https://lcms.labrulez.com/webinar/3857">Excel strategies for mass spectrometry data analysis</a>
Take an in-depth look at when and how to use Excel to increase your productivity.

SCIEX: LC-MS/MS fundamentals webinar series 2.0

It's a TRAP! Getting the most out of your QTRAP system

Sharpen your data acquisition and processing skills with our LC-MS/MS 2.0 webinar series.

Sample-to-sample and run-to-run reproducibility in chromatography is of utmost importance.
What do you do when your chromatography suddenly changes?
In this webinar, we’ll discuss some of the most common chromatography issues that we see as technical support specialists. Whether you have retention time changes, pressure changes, new peaks, ghost peaks, or peak shape changes, troubleshooting these issues can be a challenge. We’ll provide explanations for why these changes may be happening and make recommendations for how to avoid them in the future.
<blockquote>
Presenter: Jean Lane (Application Engineer, Agilent Technologies, Inc.)
</blockquote>
<blockquote>
Jean has been employed with Agilent since Nov 2010 in technical and applications support and has a primary role supporting Agilent’s full line of LC columns and consumables, which also includes support for Agilent’s GPC/SEC product line. She came to Agilent thru acquisition of Varian and the former Polymer Laboratories. Jean has 20 plus years of technical and applications support for both HPLC and GPC consumable products. In addition to practical chromatography experience in the laboratory, she has had many, many years in her technical role involving customer support providing assistance and troubleshooting for customer chromatography issues.
</blockquote>

Agilent Technologies: My Chromatography Has Changed: Steps for Effective Troubleshooting

My Chromatography Has Changed: Steps for Effective Troubleshooting

We’ll discuss some of the most common chromatography issues that we see as technical support specialists.

Steps for Effective HPLC Troubleshooting

Hear from experts in capillary electrophoresis (CE) at SCIEX.
In this series, you will learn the fundamentals of the classical applications of CE.
You will understand how to develop methods for protein characterization, RNA/DNA analysis and small molecule detection.
You will discover how these techniques are being used mainly in the biopharmaceutical industry but also in food testing and academia. 
<h3>Agenda</h3>
<h5>10:00 Welcome and introduction to SCIEX</h5>
<ul>
<li>Steve Lock, PhD (Senior Market Development Manager, Biopharma, SCIEX)</li>
</ul>
<h5>10:15 Learn how CE-SDS works and how to get the best out of your size mapping of proteins</h5>
<ul>
<li>Marcus Heinl (Senior Field Applications Specialist, SCIEX)</li>
</ul>
<h5>10:45 Understand the differences between cIEF and CZE, and how they both enable charge profiling of proteins</h5>
<ul>
<li>Marcin Moczulski (Senior Specialist Field Applications, SCIEX)</li>
</ul>
<h5>11:15 Find out the latest ways to couple CE with MS detection</h5>
<ul>
<li>Whitney Smith (Senior Support Specialist CE, SCIEX)</li>
</ul>
<h5>11:45 Break / Q&amp;A</h5>
<h5>12:00 Discover how CE can be used for N Glycan analysis</h5>
<ul>
<li>Steve Lock, PhD (Senior Market Development Manager, Biopharma, SCIEX)</li>
</ul>
<h5>12:30 Learn how CE is being used for RNA and DNA analysis and is enabling the development of the latest cell and gene therapy drugs and vaccines</h5>
<ul>
<li>Suki Klair (Field Application Specialist, SCIEX)</li>
</ul>
<h5>13:00 Close / Q&amp;A</h5>
<h5>13:15 End of sessions</h5>

SCIEX: Understanding capillary electrophoresis

Understanding capillary electrophoresis

In this series, you will learn the fundamentals of the classical applications of CE.

Per- and poly-fluoroalkyl substances (PFAS) are persistent chemicals commonly found in surface protectants and fire-fighting foams. Research has revealed that exposure to environmentally relevant concentrations of some PFAS can reduce reproductive success and have other adverse effects on animals. In this webinar, Professor Todd Anderson, from the Department of Environmental Toxicology, Texas Tech University, presents new findings from field studies determining PFAS concentrations in plant and animal tissues. His team have been involved in laboratory and field studies where it was necessary to determine PFAS concentrations in plant and animal tissues to (1) better understand the pathways of PFAS trophic transport from soil to higher organisms, and (2) to determine PFAS burdens in exposed organisms and the potential for maternal transfer of PFAS from adults to offspring.
LC-MS analytical methods for PFAS determination in water and soil matrices provide a solid foundation upon which to make slight changes to improve method performance for extracts of plant and animal tissues. In controlled laboratory studies with an avian model, we’ve used these modified methods with varying degrees of success, to measure PFAS in adult livers, eggs, hatchling livers, and brain tissue (adults and hatchings). These PFAS measurements in tissues allowed for determination of avian Toxicity Reference Values based on survival, growth, and reproduction endpoints, as well as maternal transfer from exposed adults to unexposed hatchlings. In field studies on historical fire training areas, we’ve used these modified methods on a limited set of PFAS analytes, to measure PFAS in vegetation, invertebrates, and small mammal livers. These PFAS measurements have allowed us to better understand the trophic transport pathway(s) from soil to higher organisms based on diet (herbivores, insectivores, omnivores) or activity (grooming, nest building).
Who Should Attend:
Lab Managers and researchers involved in PFAS analysis in Food, Clinical, Environmental, and Industrial field. Researchers interested in expanding their PFAS analysis into the toxicological effects associated with PFAS exposure
Key Learning Points:
<ul>
<li>Understand the pathways of PFAS trophic transport from soil to higher organisms</li>
<li>Determine PFAS burdens in exposed organisms.</li>
<li>Estimate the potential for maternal transfer of PFAS from adults to offspring</li>
</ul>
<blockquote>
Presenter: Todd Anderson (Presidential Research Excellence Professor Department of Environmental Toxicology, Texas Tech University)
</blockquote>
<blockquote>
Presenter: Richard Jack (Global Market Development Manager, Food and Environmental - Phenomenex)
</blockquote>

Phenomenex: PFAS Determination in Matrices Beyond Water and Soil

PFAS Determination in Matrices Beyond Water and Soil

New findings from field studies determining PFAS concentrations in plant and animal tissues. 

Next-generation RNA sequencing unlocks the discovery of novel candidate biomarkers for diagnostic and therapeutic applications, but reproducibility is a key challenge in biomarker discovery programs. Integrating multifaceted quality control (QC) steps can improve design decisions and enhance the confidence and reliability of results.
This webinar will demonstrate how a comprehensive QC framework using the Agilent TapeStation system supports a disease-agnostic biomarker discovery program to identify biologically relevant candidate biomarkers of complex disease. It will also highlight how this framework can be adapted for total RNA sequencing of whole blood, plasma, and serum samples.
Key learning objectives
<ul>
<li>Learn how RNA sequencing enables the discovery of novel candidate biomarkers</li>
<li>Discover how a comprehensive QC framework allows the confident identification of biologically relevant candidate biomarkers</li>
<li>Understand how Agilent TapeStation systems enable reliable QC in RNA sequencing workflows</li>
</ul>
Certificate of attendance
All webinar participants can request a certificate of attendance, including a learning outcomes summary, for continuing education purposes.
<blockquote>
Presenter: Cheryl Sesler, MS (Associate Director of Research, Decode Health, Inc., United States)
</blockquote>
<blockquote>
Presenter: Dr. Annika Dorn (Product Manager, Agilent Technologies, Germany)
</blockquote>

Agilent: The Importance of End-to-End Quality Control Processes for RNA Biomarker Discovery

The Importance of End-to-End Quality Control Processes for RNA Biomarker Discovery

QC framework using the Agilent TapeStation system supports a disease-agnostic biomarker discovery program.

End-to-End QC Processes for RNA Biomarker Discovery

They summed up their research in 60 seconds during the Lightning Talk competition at US HUPO and were determined “the winners”. Now you can hear an extended version of their scientific insights at US HUPO’s webinar featuring the winners and honorable mentions from US HUPO 2024.

US HUPO: The Best of US HUPO 2024: Lightning Talks

The Best of US HUPO 2024: Lightning Talks

Scientific insights at US HUPO’s webinar featuring the winners and honorable mentions from US HUPO 2024.

Extracting DNA and RNA from complex microbial communities poses a challenge. Efficient cell lysis and high-quality recovered nucleic acids are crucial for molecular techniques&#39; success. MP Biomedicals provides comprehensive sample preparation solutions, covering sample grinding, cell lysis, and nucleic acid extraction and optimized purification kits for various complex samples in microbiome research, including stool, gut, skin tissues, saliva, and environmental or agricultural samples. Its latest development enables high-throughput, automated purification of sequencing-grade nucleic acids from dedicated microbiome research samples
Dr. Véronique Karsten, product manager of the Molecular Biology product portfolio at MP Biomedicals, will explain how to thoroughly homogenize and lyse microorganisms in samples for microbiome research. She will also discuss new DNA and RNA extraction kits from MP Biomedicals for high yields from diverse samples, including environmental, water, plant, fecal, and tissue specimens.
Key learning objectives
<ul>
<li>Learn how to obtain a thorough homogenization and lysis of any microorganism from samples used in microbiome research</li>
<li>Explore the new DNA and RNA extraction as well as coextractions kits developed by MP Biomedicals to generate high yields and achieve rapid isolation of genomic DNA and total RNA from environmental and water samples, plant specimens, feces, human and animal tissues</li>
<li>Discover MPure-32™ and MPure-96™ Automatic Nucleic Acid Purification Platforms designed for high-throughput applications and combined kits specially developed for DNA and RNA purification from various samples including feces and environmental samples</li>
</ul>
Who should attend?
<ul>
<li>Scientists involved in metagenomic and metatranscriptomic analysis of human and animal samples</li>
<li>Researchers working in the environmental and agricultural research field (with soil, sediment, water, sludge, compost, rhizosphere, wood, and any other plant specimens as well as food samples)</li>
</ul>
Certificate of attendance
All webinar participants can request a certificate of attendance, including a learning outcomes summary, for continuing education purposes.
<blockquote>
Presenter: Dr. Véronique Karsten (Product Manager of the Molecular Biology product portfolio, MP Biomedicals)
</blockquote>
<blockquote>
Moderator: Charlie Carter (Associate Editor, SelectScience)
</blockquote>

MP Biomedicals: Enhance Microbial World Exploration with Standardized Sample Prep

Enhance Microbial World Exploration with Standardized Sample Prep

How to thoroughly homogenize and lyse microorganisms in samples for microbiome research.

Microbial World Exploration with Standardized Sample Prep

Join our free Webinar. A member of our technical support team will show you the basic operation of Clarity Chromatography Software and answer your questions! We will provide space for your questions.
Two sessions:
<ul>
<li>18.06. 2024 starts at 09:00 CEST
</li>
<li>18.06. 2024 starts at 16:00 CEST
</li>
</ul>

DataApex: Clarity Chromatography Software live demo

Clarity Chromatography Software live demo

A member of our technical support team will show you the basic operation of Clarity Chromatography Software and answer your questions!

Christian Rohrer, Director of Sales &amp; Support – EMEA at Tosoh Bioscience GmbH, will present the next edition of Tosoh Tuesday, a webinar series held by Chromatography Experts. On Tuesday, June 18, Subin Damodaran, Product Manager GPC at Tosoh Bioscience, will introduce you to high-temperature GPC for polyolefin analysis.
Polyolefins are one of the most important classes of polymers in the plastics industry. You will learn how a high temperature gel permeation chromatography (GPC) system coupled with a viscometer enables the detailed analysis of their molecular weight distribution and intrinsic viscosity, thus providing a comprehensive understanding of their molecular structure.
After the webinar, ask your questions during the live Q&amp;A session.

Tosoh Bioscience: Tosoh Tuesday - Seamless Polyolefin Analysis: High-Temperature GPC Made Easy

Seamless Polyolefin Analysis: High-Temperature GPC Made Easy

High temperature gel permeation chromatography (GPC) system coupled with a viscometer enables the detailed analysis of polyolefins.

The PFAS global research and testing community are now being asked to fully characterize PFAS in samples. Targeted analysis relies on a limited number of available reference standards, however it is well known that thousands of PFAS compounds and transformation products exist in the environment. To support laboratories, Thermo Fisher Scientific has worked with collaborators to develop a novel workflow to provide a better understanding of the diversity of PFAS contamination in samples, and at the same time provide meaningful targeted quantitative results in a variety of matrices.
In this webinar, our experts will show a simultaneous targeted quantitative and non-targeted analysis method, with quantitative results down to part-per-trillion levels, for a 250 mL water sample prepared by EPA 1633 protocols. Additionally, non-targeted data is presented for food contact materials and diluted AFFF sample matrices to demonstrate the applicability of the method to solid samples.
Attendees will learn:
<ul>
<li>Why high resolution and accurate mass (HRAM) with LC-Orbitrap instrumentation is a key advantage when trying to precisely describe PFAS components in a sample.</li>
<li>How Thermo Scientific™ Compound Discoverer™ software with a built-in pre-configured PFAS workflow makes it easy to filter for PFAS candidates, and then make identifications based upon extensive compound libraries, fragment databases, and other tools providing a multifaceted approach to exploring unknown PFAS.</li>
<li>How the same HRAM platform provides a solution to both quantify known PFAS and explore unknown PFAS with confidence and convenience, greatly expanding our understanding of this global health and safety concern.</li>
</ul>
<blockquote>
Presenter: Cynthia Grim, M.S. (Product Applications Specialist III, Thermo Fisher Scientific)
</blockquote>
<blockquote>
Cynthia Grim, M.S. is a Product Applications Specialist III in the Environmental and Food Safety Vertical Marketing team. Her previous experience includes secondary metabolite structure elucidation, pharmaceutical drug safety, and environmental testing. Now, her work revolves around developing novel sample preparation and instrument methods for PFAS analysis to prepare for new frontiers in environmental testing across matrix types.
</blockquote>
<blockquote>
Presenter: Richard Cochran, PhD (Senior Application Scientist for LSMS, Thermo Fisher Scientific)
</blockquote>
<blockquote>
Richard Cochran is a Senior Application Scientist for LSMS at Thermo Fisher Scientific, with over 15 years of experience in mass spectrometry, with strong expertise in high resolution mass spectrometry and untargeted analysis. Richard received is PhD in Analytical Chemistry from the University of North Dakota. Prior to joining Thermo Fisher Scientific, Richard was a senior principal investigator within the Center for Aerosol Impacts on Chemistry of the Environment (CAICE, a National Science Foundation Center of Innovation) and served as the director of the Environmental and Complex Analysis Laboratory at the University of California San Diego. Throughout his career he has published more than 20 scientific publications in the area of mass spectrometry, altogether having more than 1,000 citations.
</blockquote>
<blockquote>
Presenter: Ed George (Vertical Marketing Manager, Thermo Fisher Scientific)
</blockquote>
<blockquote>
Ed George has a BS in Chemistry from the University of Notre Dame with concentration in Environmental Science. He worked for 15 years in the environmental laboratory industry, holding positions of Lab Technician, Lab Manager, and R&amp;D Manager, responsible for developing novel sample preparation and analytical methods in soil and water on GC/MS/MS and LC/MS/MS platforms. He participated in several collaborative method development projects with the USEPA. In 2014, he joined Thermo Fisher Scientific and is currently a Senior Applications Scientist. He has worked closely with key collaborators on food safety and environmental projects in universities and industry and has recently developed workflow applications for pesticide and veterinary drug residues in food on both LC/MS/MS and high-resolution MS platforms.
</blockquote>

Thermo Fisher Scientific: LC-Orbitrap MS Workflow for Targeted and Non-Targeted Analysis of over 40,000 PFAS Compounds in Environmental and Food Contact Material Samples

LC-Orbitrap MS Workflow for Targeted and Non-Targeted Analysis of over 40,000 PFAS Compounds in Environmental and Food Contact Material Samples

Simultaneous targeted quantitative and non-targeted PFAS analysis, in 250 mL water sample prepared by EPA 1633 protocols.