<h3>Kapalinová chromatografie (HPLC/UHPLC)</h3>
<h3>Ústav chemie potravin a biotechnologií, FCH, VUT v Brně</h3>
<ul>
<li><a href="https://lcms.cz/products/155">Agilent 1260 Infinity HPLC</a></li>
</ul>
Laboratoř Ústavu chemie potravin a biotechnologií (UCHPBT) na Fakultě chemické VUT v Brně byla vybavena kapalinovým chromatografem <a href="https://lcms.cz/library?search=1260&amp;mainauthorItems=10">Agilent 1260 Infinity</a> v rámci projektu „Modernizace areálu VUT v Brně Purkyňova 118“, který byl financován z prostředků EU a státního rozpočtu ČR prostřednictvím Operačního programu Výzkum a vývoj pro inovace (prioritní osa 4). V Laboratoři separačních metod na UCHPBT je komplexně řešena problematika analýzy potravin.
V posledních letech ve spolupráci s Výzkumným a šlechtitelským ústavem ovocnářským Holovousy byla charakterizována řada nových odrůd angreštů, rybízů, černého bezu a jiných netradičních druhů ovoce z hlediska obsahu biologicky aktivních látek. Velký důraz je kladen na analýzu polyfenolických látek a organických kyselin ve vínech a v pivě za účelem sledování autenticity těchto potravin, sledovány jsou metabolity vznikající mikrobiálním zpracováním různých druhů odpadů nebo interakce léčiv s hydrogely. Kapalinový chromatograf Agilent 1260 Infinity díky svým parametrům a také díky dvěma detektorům (DAD a ELSD) rozšířil aplikační možnosti laboratoře a celkově zlepšil výkonnostní ukazatele již zavedených metod v laboratoři.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_doc_Ing_Pavel_Divis_Ph_D_Ustav_chemie_potravin_a_biotechnologii_FCH_VUT_v_Brne_bd5f666129/HPST-doc.-Ing.-Pavel-Divis-Ph.D.-Ustav-chemie-potravin-a-biotechnologii-FCH-VUT-v-Brne.jpg" alt="HPST: doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (Ústav chemie potravin a biotechnologií, FCH, VUT v Brně)"/>
<h3>Ústav mléka, tuků a kosmetiky, FPBT, VŠCHT v Praze</h3>
<ul>
<li>Agilent 1260 Infinity Bio-inert HPLC</li>
</ul>
Laboratoř fyzikálně chemické analýzy Ústavu mléka, tuků a kosmetiky, Fakulta potravinářské a biochemické technologie, Vysoká škola chemicko-technologická v Praze, je určena pro analýzu a separace širokého spektra přírodních látek jako tuků, cukrů a bílkovin v rámci studentské vědecko-výzkumné činnosti při řešení diplomových a disertačních prací.
Laboratoř lze rozdělit na tři části.
<ul>
<li>První se zabývá pouze analýzou lipidů pomocí systémů plynové chromatografie (GC) s MS a FID detektory. </li>
<li>Druhá část je určena pro analýzu biomolekul s pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC). </li>
<li>Třetí část se využívá pro preparativní separace bílkovin.</li>
</ul>
V rámce projektu KvaLab bylo v roce 2015 do laboratoře nainstalováno několik nových systémů, jeden z nich je <a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=bio&amp;instrumentationItems=27">biokompatibilní HPLC Agilent Infinity 1260</a>. Tento systém umožňuje využití klasických HPLC metod jako RP-HPLC a také separace s pomocí bio SEC kolon a mobilních fází se zvýšenou koncentrací solí. Kromě toho dává kvaternární pumpa a <a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=Buffer%20Advisor%20Software&amp;instrumentationItems=27">Buffer Advisor Software</a> možnost automatického míchání pufrů pro provedení rychlého screeningu na anion výměnných kolonách. 
Automatický sběrač frakcí a přepínač kolon při takovém screeningu dovoluje udělat následnou rychlou analýzu odebraných frakcí pouze přesunutím držáku se vzorky do autosampleru a jednoduchým přepnutím kolony. 
Pokud je třeba analyzovat vzorky sacharidů nebo triglyceridy, efektivním doplňkem k takovému systému je detektor <a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=ELSD%201290&amp;instrumentationItems=27">1290 Infinity II ELSD</a>. Díky této multifunkční sestavě je laboratoř schopna pokrýt širokou škálu potřeb laboratoře.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Ing_Jan_Kovar_HPST_Mgr_Volodymyr_Skalka_M_Sc_Ustav_mleka_tuku_a_kosmetiky_FPBT_VSCHT_v_Praze_63ff9dad44/HPST-Ing.-Jan-Kovar-(HPST)-Mgr.-Volodymyr-Skalka-MSc.-Ustav-mleka-tuku-a-kosmetiky-FPBT-VSCHT-v-Praze.jpg" alt="HPST: Ing. Jan Kovář (HPST), Mgr. Volodymyr Skalka, MSc. (Ústav mléka, tuků a kosmetiky, FPBT, VŠCHT v Praze)"/>
<h3>Ústav chemie a biochemie, AF, Mendelova Univerzita v Brně</h3>
<ul>
<li><a href="https://lcms.cz/products/157">Agilent 1260 Infinity Analytical SFC</a></li>
</ul>
Laboratoř Metabolomiky sekundárních metabolitů, Ústav chemie a biochemie, CEITEC Mendelova univerzita v Brně, je zaměřena na studium sekundárních metabolitů.
Hlavní část výzkumu je věnována především vývoji nových separačních metod. Laboratoř disponuje moderními extrakčními technikami jako jsou SFE, PLE, MAE. Část výzkumu je věnována kombinovaným technikám SFE/SPE a PLE/SPE. 
Hlavní část výzkumu je směřována do identifikace a kvantifikace sekundárních metabolitů napříč rostlinnou říší. Pro tuto část výzkumu disponuje laboratoř hmotnostní spektrometrií (HRMS, QQQ) doplněnou o ambientní techniky (DART, DESI, AP MALDI). Chromatografická část disponuje systémy rychlé (RRLC), ultra (UHPLC) a 2D chromatografie.
V loňské roce byla laboratoř doplněna o superkritickou fluidní chromatografii <a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;instrumentationItems=38">Agilent 1260 Infinity SFC</a>. V současné době je SFC využívána pro monitoring karotenoidních barviv v řasách. V následujícím období se laboratoř zaměří na separaci vybraných stereoizomerů ve vyšších rostlinách. Superkritická fluidní chromatografie byla instalována začátkem roku 2015 a je využívána pro monitoring vybraných sekundárních metabolitů v rostlinné říši.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Ing_Aneta_Strejckova_prof_RN_Dr_Borivoj_Klejdus_Ph_D_Ing_Jan_Kovar_HPST_Ing_Romana_Bacova_Ustav_chemie_a_biochemie_AF_Mendelova_Univerzita_v_Brne_30a5fbe9a7/HPST-Ing.-Aneta-Strejckova-prof.-RNDr.-Borivoj-Klejdus-Ph.D.-Ing.-Jan-Kovar-(HPST)-Ing.-Romana-Bacova-Ustav-chemie-a-biochemie-AF-Mendelova-Univerzita-v-Brne.jpg" alt="HPST: Ing. Aneta Strejčková; prof. RNDr. Bořivoj Klejdus, Ph.D.; Ing. Jan Kovář (HPST); Ing. Romana Bačová (Ústav chemie a biochemie, AF, Mendelova Univerzita v Brně)"/>
<h3>Ústav konzervace potravin, FPBT, VŠCHT v Praze</h3>
<ul>
<li><a href="https://lcms.cz/products/155">Agilent 1260 Infinity HPLC</a></li>
</ul>
Ústav konzervace potravin, Fakulta potravinářské a biochemické technologie, Vysoká škola chemicko-technologická v Praze, se zabývá hlavně problematikou potravin, a to vybranými potravinářskými technologiemi (ovoce, zelenina, maso, vejce, lahůdky aj.), balením potravin, kvalitou a autenticitou potravin, určením doby trvanlivosti výrobků, systémy jakosti v oblasti potravinářství apod. V rámci ústavu působí i nezávislá obalová laboratoř, která zkoumá vlastnosti obalových materiálů, hodnotí jejich zdravotní nezávadnost, provádí celkové i speciální migrační testy aj. 
Významnou aktivitou je pedagogická činnost včetně vedení bakalářských, diplomových a disertačních prací. Ústav konzervace potravin tak vychovává specialisty pro potravinářské závody, kontrolní laboratoře, státní správu, kontrolní orgány apod. Vědecká činnost ústavu je zaměřena zejména na aplikovaný výzkum v oblasti potravinářství. 
Ústav konzervace potravin poskytuje servisní služby v oblasti poradenství, technologických zkoušek, vývoji nových výrobků, zjišťování příčin defektů apod. V neposlední řadě jsou jako servis, zejména pro výrobce potravin, zajišťovány i akreditované analytické a mikrobiologické rozbory.
Kapalinová chromatografie je v laboratořích Ústavu konzervace potravin používána pro akreditované i neakreditované rozbory vybraných složek potravin a kontaminantů. Na přístrojích jsou řešeny vědecké úkoly ústavu včetně bakalářských diplomových a disertačních prací. Mezi vybrané rozbory lze zmínit: konzervanty, organické kyseliny, sacharidy, 5-HMF, floridzin, kofein, theobromin, morfin atd.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_doc_Ing_Ales_Rajchl_Ph_D_Ustav_konzervace_potravin_FPBT_VSCHT_v_Praze_8090fbe91f/HPST-doc.-Ing.-Ales-Rajchl-Ph.D.-Ustav-konzervace-potravin-FPBT-VSCHT-v-Praze.jpg" alt="HPST: prof. Ing. Aleš Rajchl, Ph.D. (Ústav konzervace potravin, FPBT, VŠCHT v Praze)"/>

Zpátky do minulosti: HPLC systémy Agilent Technologies u našich zákazníků

Vitamin D hraje důležitou roli v metabolických cestách, včetně homeostázy vápníku a fosforu, a je prekurzorem steroidních hormonů. Bohatým zdrojem vitaminu D jsou játra, ryby, vejce nebo mléčné výrobky. V některých rozvojových zemích jsou mléko a oleje na vaření, jako nákladově efektivní řešení prevence podvýživy, o vitamin D obohacovány. V rostlinách se nachází jako ergokalciferol (vitamin D₂) a u zvířat jako cholekalciferol (vitamin D₃).
Kvantitativní analýza založená na LC/MS/MS je pro kvantifikaci populárnější než tradiční analytické metody a to kvůli lepší specificitě a vyšší citlivosti. Analýza D₂ a D₃ v krmných směsích pro zvířata, potravinách rostlinného původu nebo potravinách o vitamin D obohacovaných uměle však čelí výzvám, jako je rychlá degradace a špatná reprodukovatelnost. Složitost analýzy se dále zvýšuje v důsledku rozmanitosti mléka a významným matricovžm efektům. Vyvinutá LC/QQQ metodika prokázala citlivost na úrovni 0,4 ng/g, má vysokou reprodukovatelnost a je vhodná nejen pro rutinní laboratoře, které tyto testy provádějí.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Struktura_vitaminu_D_a_D_7c72f09e74/Struktura-vitaminu-D-a-D.png" alt="Struktura vitaminu D₂ a D₃"/>
<h3>Úvod</h3>
Pro analýzu vitaminů D₂ a D₃ existuje řada publikovaných metod. Vzorky potravin s významnými matričními efekty se v LC/MS/MS analyzují pomocí APCI iontového zdroje. Přes veškeré úsilí ale představuje rozmanitost vzorků mléka s různým obsahem tuku pro analytická data potenciální hrozbu. Zmýdelnění ethanolickým hydroxidem draselným je důležité při manipulaci s proměnlivým poměrem tuků, zatímco přidání pyrogallolu je zásadní, aby se zabránilo oxidaci analytů během opakovaných kroků promývání. Derivatizace pomocí 4-fenyl-1,2,4-triazolin-3,5-dionu (PTAD) je užitečná ke zvýšení citlivosti obou analytů, zatímco pro analýzu výtěžnosti je zásadní použití deuterovaných vnitřních standardů (IS).
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Redici_protokol_pro_pripravu_standardu_1d18d1d115/Redici-protokol-pro-pripravu-standardu.png" alt="Ředicí protokol pro přípravu standardů"/>
<h3>Instrumentace</h3>
<ul>
<li><a href="https://lcms.cz/products/154">Agilent 1290 Infinity II</a> High Speed Pump</li>
<li>Agilent 1290 Infinity II vial sampler</li>
<li>Agilent 1290 Infinity II MCT</li>
<li><a href="https://lcms.cz/products/163">Agilent 6470 LC/TQ</a> with AJS ion source</li>
</ul>
<h5>Parametry HPLC metody</h5>
<ul>
<li>Kolona: <a href="https://lcms.cz/products/153">Agilent InfinityLab Poroshell 120</a> EC-C18 (p/n 699975-302)</li>
<li>Teplota kolony: 10 °C</li>
<li>Objem nástřiku: 10 μL</li>
<li>Teplota autosampleru: 10 °C</li>
<li>Proplachovací roztok: Metanol/Voda (80/20)</li>
<li>Mobilní fáze: A) 0,1% kyseliny mravenčí ve vodě; B) 100% methanol</li>
<li>Průtok: 300 μL/min</li>
</ul>
<h5>Parametry LC/TQ systému</h5>
<ul>
<li>Ionizační mód: AJS (+ ve)</li>
<li>Nebulizační plyn: 45 psi</li>
<li>Sušící plyn: 5 l/min při 300 °C</li>
<li>Vyhřívací plyn: 11 l/min při 250 °C</li>
<li>Napětí na kapiláře: 3500 V</li>
<li>Napětí trysky: 500 V</li>
<li>CAV: 5 V</li>
<li>Dwell time: 50 ms</li>
<li>Rozlišení: Unit/Unit</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Parametry_MRM_pro_analyzu_vitaminu_D_a_D_b1018cbbbb/Parametry-MRM-pro-analyzu-vitaminu-D-a-D.png" alt="Parametry MRM pro analýzu vitaminu D₂ a D₃"/>
<h3>Výsledky a diskuse</h3>
Vyvinutá metoda je vhodná pro kvantifikaci dvou forem vitaminu D: ergokalciferolu a cholekalciferolu. Bylo zjištěno, že metoda ESI-LC/MS/MS založená na MRM je specifická pro dva analyty v mléčné matrici. Kromě použití interních standardů se při sledování nízkých mezí detekce, vysoké citlivosti a vysoké výtěžnosti ukázala být užitečná příprava vzorků založená na zmýdelnění mléčné matrice s následnou derivatizací.
Příprava vzorků napříč různými typy mléka z trhu ukázala slušnou výtěžnost obou analytů. Tuto metodu mohou tedy použít výzkumné, kontrolní nebo komerční zkušební laboratoře pro kvantitativní odhad obsahu vitaminů D2 a D3 při obohacování potravit. 
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Citlivost_analyzy_vitaminu_D2_a_D3_0_4_ppb_v_matrici_oproti_blanku_8941a94b71/Citlivost-analyzy-vitaminu-D2-a-D3-(04-ppb-v-matrici-oproti-blanku).png" alt="Citlivost analýzy vitamínů D₂ a D₃ (0,4 ppb v matrici oproti blanku)"/>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Prekryti_ruznych_koncentraci_vitaminu_D2_a_D3_2d2f8f47da/Prekryti-ruznych-koncentraci-vitaminu-D2-a-D3.png" alt="Překrytí různých koncentrací vitamínů D₂ a D₃"/>

Simultánní stanovení vitaminu D₂ a D₃ v mléce

**Vzorky zelí byly extrahovány konvenčním přístupem SPE podle současné čínské GB metody 20769-2008. Získaný extrakt byl filtrován přes 0,22 um membránu. Následovala separace pomocí UHPLC <a href="https://lcms.cz/products/154">Agilent 1290 Infinity II</a> ve spojení s detektorem <a href="https://lcms.cz/products/164">Agilent 6545 LC/Q-TOF MS/MS</a> v režimu skenování Agilent All Ions MS/MS. **
Celkem 415 pesticidů v červeném zelí bylo hodnoceno s matricovými standardy v rozmezí koncentrací 1 až 200 μg/kg. Mez detekce pro screening (SDL) a mez kvantifikace (LOQ) pro většinu pesticidů byly nižší než 5 μg/kg, respektive 10 μg/kg. Lineární korelační koeficienty (R²) v koncentračním rozmezí byly u všech pesticidů vyšší než 0,99. Při naspikovaných úrovních 1 × LOQ, 2 × LOQ a 10 × LOQ se výtěžnost 413 ze 415 pesticidů pohybovala od 70 do 118,8%. Jen dva pesticidy dosáhly výtěžnosti v rozmezí 65 až 70% na úrovni 1 × LOQ. Relativní standardní odchylky byly u všech pesticidů nižší než 20%.
Tato metoda byla použita k provedení screeningu neznámých reziduí pesticidů a kvantitativního měření při účasti v programu zkoušek odborné způsobilosti EU pro screening pesticidů v roce 2019. Všechny oficiálně přítomné pesticidy byly správně identifikovány a přesně kvantifikovány. Výsledky ukazují, že metoda je velmi spolehlivá, schopná hledat neznáme pesticidy a je také schopná pesticidy kvantifikovat se současným získáváním údajů o přesné hmotě a to i na úrovni MS/MS fragmentů. 
Tím se při splnění screeningových kritérií výrazně zlepšuje propustnost vzorků pro analýzu reziduí pesticidů v červeném zelí. Tuto metodu lze rozšířit na další zeleninové a ovocné matrice.
<h3>Experimentální část</h3>
<h5>Podmínky HPLC separace:</h5>
<ul>
<li>UHPLC: [Agilent 1290 Infinity II](Agilent 1290 Infinity II)</li>
<li>Kolona: <a href="https://lcms.cz/products/293">Agilent ZORBAX</a> SB-C18 (100 mm × 2,1 mm, 3,5 μm</li>
<li>Mobilní fáze: A: 0,1% kyselina mravenčí/5 mM octan amonný; B: acetonitril</li>
<li>Teplota kolony: 40 ° C</li>
<li>Objem nástřiku: 5 μL</li>
<li>Průtok: 0,4 ml/min</li>
</ul>
<h5>Podmínky MS/MS detekce:</h5>
<ul>
<li>MS detektor: [Agilent 6545 LC/Q-TOF](Agilent 6545 LC/Q-TOF MS/MS) s Agilent Dual Jet Stream ESI</li>
<li>Polarita: Pozitivní ionizace</li>
<li>Rozsah MS skenování: m/z 50 až 1 000</li>
<li>Režim skenování: Agilent All Ions MS/MS screeningový pracovní postup</li>
<li>Referenční ionty: m/z 121,0509/922,0098</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Identifikovane_slouceniny_pesticidu_v_neznamem_vzorku_cerveneho_zeli_z_nichz_kazda_je_uvedena_s_jednim_prekurzorovym_iontem_a_jednim_hlavnim_fragmentovym_iontem_vyssi_intenzita_pro_kvalifikaci_dd586f0993/Identifikovane-slouceniny-pesticidu-v-neznamem-vzorku-cerveneho-zeli-z-nichz-kazda-je-uvedena-s-jednim-prekurzorovym-iontem-a-jednim-hlavnim-fragmentovym-iontem-(vyssi-intenzita)-pro-kvalifikaci.png" alt="HPST/Agilent Technologies: Identifikované sloučeniny pesticidů v neznámém vzorku červeného zelí, z nichž každá je uvedena s jedním prekurzorovým iontem a jedním hlavním fragmentovým iontem pro kvalifikaci"/>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Extrahovane_iontove_chromatogramy_pro_kvantitativni_i_kvalitativni_ionty_kazde_identifikovane_pesticidni_slouceniny_ve_neznamem_vzorku_cerveneho_zeli_poskytnute_testem_odborne_zpusobilosti_EU_v_programu_rezidui_pestic_df0129d157/Extrahovane-iontove-chromatogramy-pro-kvantitativni-i-kvalitativni-ionty-kazde-identifikovane-pesticidni-slouceniny-ve-neznamem-vzorku-cerveneho-zeli-poskytnute-testem-odborne-zpusobilosti-EU-v-programu-rezidui-pestic.png" alt="HPST/Agilent Technologies: Extrahované iontové chromatogramy pro kvantitativní i kvalitativní ionty každé identifikované pesticidní sloučeniny v neznámém vzorku červeného zelí"/>
Identifikační číslo každého pesticidu je uvedeno v tabulce výše. U každého ID pesticidu je v levém grafu zobrazen iontový chromatogram pro kvantifikaci a v pravém grafu jsou přeloženy jak extrahované kvantitativní, tak kvalitativní iontové chromatogramy. 
<h3>Závěr</h3>
Tato aplikační poznámka popisuje metodu simultánního screeningu a kvantifikace 415 reziduí pesticidů v červeném zelí pomocí Agilent 6545 LC-Q/TOF. Screeningová metoda vyvinutá pro matici červeného zelí je citlivá a spolehlivá, přičemž většina SDL je na úrovni 5 ug/kg nebo méně.
Metoda je také přesná a robustní pro účely kvantifikace s většinou LOQs na nebo pod 10 μg/kg a RSD pod 20%. Tuto metodu lze také rozšířit o mnoho dalších matric potravin rostlinného původu pro kvalitativní a kvantitativní screening residuí pesticidů. 
<h3>Přehled <a href="https://lcms.cz/library?categoryItems=2&amp;mainauthorItems=10&amp;instrumentationItems=31&amp;date=2021-2021">nejnovějších LC/MS aplikací</a> Agilent Technologies pro oblast analýzy potravin</h3>
<ul>
<li>Quantitation of Amino Acids in Soy Flour, Dried Cow&#39;s Milk Powder, and Corn Silage by Triple Quadrupole LC/MS/MS | 2021 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
</li>
<li>Simultaneous Detection and Quantitation of 14 Water-Soluble Vitamins in a Supplement by LC/MS/MS Triple-Quadrupole | 2021 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
</li>
<li>Quantitation of Pesticide Residues in Milk Using the Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS | 2021 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
</li>
<li>Simultaneous Screening and Quantification of Pesticide Residues in Red Cabbage | 2021 | LC/TOF, LC/HRMS, LC/MS, LC/MS/MS
</li>
<li>Quantitative Screening of Multiresidue Veterinary Drugs in Milk and Egg Using the Agilent 6495C Triple Quadrupole LC/MS | 2021 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
</li>
<li>Pesticide Analysis in Unique Commodities using the Agilent 6470 Triple Quadruopole LC/MS System | 2021 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
</li>
<li>Simultaneous Determination of Vitamin D2 and D3 in Milk | 2021 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
</li>
<li>Quantitation of Paraquat Residue in Milk Using the Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS | 2021 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
</li>
<li>Analysis of 510 Pesticide Residues in Honey and Onion on an Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS System | 2021 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
</li>
<li>Quantitative Analysis of 210 Veterinary Drugs in Organ Meat Using the Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS | 2021 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
</li>
</ul>
<h3>Přehled <a href="https://lcms.cz/webinars?companyId=37">nejnovějších LC/MS webinářů</a> Agilent Technologies pro oblast analýzy potravin</h3>
<ul>
<li>Pesticides screening methodology in different food matrices using the LC/Q-TOF and MassHunter Screener Tool (Pá, 23.7.2021)
</li>
<li>Raise your Cannabis Knowledge with addition of an LC/MS IQ for Hemp Testing (St, 28.7.2021)
</li>
<li>Accurate Quantitation of Carotenoids and Fat-Soluble Vitamins in Food and Supplements by LC-MS/MS (Proběhlo St, 14.7.2021)
</li>
<li>LC-MS/MS: The key to analyzing PFAS in milk, infant formula, and related food ingredients (Proběhlo Po, 12.7.2021)
</li>
</ul>

Simultánní screening a kvantifikace reziduí pesticidů v červeném zelí

Metoda poskytuje alternativní řešení k iontově výměné (IEX) nebo iontové chromatografie (IC) pro separaci polárních a iontových sloučenin. Metoda využívá chytrý a snadno použitelný systém, který těží z hlavních výhod systému <a href="https://lcms.cz/products/162">InfinityLab LC/MSD iQ</a> a softwaru <a href="https://lcms.cz/products/24">OpenLab CDS</a>.
<h3>Úvod</h3>
Analýza anorganických aniontů byla vždy v chromatografii s reverzní fází výzvou kvůli povaze polárních aniontů v relativně nepolárním prostředí. IEX a IC se obvykle používají pro analýzu malých aniontů, vyžadují delší časy ekvilibrace a analýzy, specifikcé chemikálie a konfigurace systémů a jsou náročnější na kompatibilitu s MS detektory.
<a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=hilic">HILIC</a> je robustní a spolehlivá metoda, kterou lze snadno implementovat v laboratoři, kde se již běžně používá chromatografie na reverzní fázi. HILIC je tak alternativní analytická metoda pro polární sloučeniny. Při použití HILIC jsou hlavními výhodami oproti IEX a IC jednoduché složení mobilní fáze (obvykle voda-acetonitril) bez silných kyselých nebo zásaditých přísad; jednoduché nastavení metody, kde není potřeba žádná dodatečná úprava, jako je regenerace nebo čištění systému; a možnost simultánní analýzy různých analytů (kationty, anionty a neutrální specie v jedné analytické analýze).
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Analyza_anorganickych_aniontu_pomoci_HILIC_chromatografie_a_Agilent_LCMSD_i_Q_detektoru_94c23e6710/HPST-Analyza-anorganickych-aniontu-pomoci-HILIC-chromatografie-a-Agilent-LCMSD-iQ-detektoru.jpg" alt="HPST: Hmotnostní detektor Agilent LC/MSD iQ"/>
Tato práce vychází z <a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=Analysis+of+Metals%2C+Halides%2C+and+Inorganic+Ions+Using+Hydrophilic+Interaction+Chromatography">dříve publikované aplikace</a>, kde byly anorganické anionty a kationty simultánně analyzovány pomocí systému <a href="https://lcms.cz/products/155">Agilent 1260 Infinity LC</a> s ELSD detekcí, poskytující vynikající tvar píku a minimální sekundární interakce pro anorganické anionty.
Hmotnostní detektor InfinityLab LC/MSD iQ byl použit kvůli zvýšené selektivitě a citlivosti oproti ELSD. Protože mobilní fáze a její přísady silně ovlivňují odezvu detektoru, bylo složení mobilní fáze podrobně prozkoumáno. V HILIC separacích, zvyšující se koncentrace pufru snižuje retenční čas a poskytuje lepší tvar píku. Jelikož je ale odezva hmotnostního spektrometru a tím i citlivost analýzy také ovlivněna koncentrací pufru, vyžaduje analýza nalezení celkové rovnováhy podmínek separace.
<blockquote>
Kompletní aplikaci <a href="https://lcms.cz/library?search=Analysis+of+Inorganic+Anions+Using+HILIC+Chromatography+and+the+Agilent+InfinityLab+LC%2FMSD+iQ+Mass+Selective+Detector">Analysis of Inorganic Anions Using HILIC Chromatography and the Agilent InfinityLab LC/MSD iQ Mass Selective Detector</a> naleznete ke stažení v knihovně LabRulezLCMS.
</blockquote>
<h3>Instrumentace</h3>
<ul>
<li><a href="https://lcms.cz/products/154">Agilent 1290 Infinity II</a> (G7120A)</li>
<li>Agilent 1290 Infinity II vialsampler (G7129B) s integrovaným kolonovým termostatem a 3 μL výměníkem a, 40 μL analytickou hlavou a 20 μL smyčkou (výchozí nastavení) a volitelným termostatem vzorku</li>
<li><a href="https://lcms.cz/products/162">Agilent InfinityLab LC/MSD iQ</a> (G6160A)</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Agilent_Informace_o_analyzovanych_anorganickych_iontech_699f2555a4/HPST-Agilent-Informace-o-analyzovanych-anorganickych-iontech.jpg" alt="HPST/Agilent: Informace o analyzovaných anorganických iontech"/>
<h5>Parametry metody Agilent 1290 Infinity II LC</h5>
<ul>
<li>Kolona: Agilent InfinityLab <a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=Poroshell+120+HILIC-Z">Poroshell 120 HILIC-Z</a>, 2,1 × 100 mm, 2,7 μm při 30 ° C (p/n 685775-924)</li>
<li>Mobilní fáze A: 5 mM mravenčan amonný ve vodě</li>
<li>Mobilní fáze B: acetonitril</li>
<li>Průtok: 0,4 ml/min</li>
<li>Objem nástřiku: 1 μL</li>
</ul>
<h5>Parametry Agilent InfinityLab LC/MSD iQ</h5>
<ul>
<li>Iontový zdroj: ESI</li>
<li>Polarita a typ skenování: Negativní ionizace a sken + SIM (doba prodlevy: 43 ms)</li>
<li>Režim akvizice: Advanced Acquire Mode</li>
<li>Rozsah skenování: m/z 10 až 150</li>
</ul>
<h3>Výsledky</h3>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Agilent_Prekryte_SIM_EIC_chromatogramy_cilenych_aniontu_pri_5_mg_g_47e3b09e7c/HPST-Agilent-Prekryte-SIM-EIC-chromatogramy-cilenych-aniontu-pri-5-mg-g.jpg" alt="HPST/Agilent: Překryté SIM EIC chromatogramy cílených aniontů při 5 μg/g: chlorid (m/z 35), bromid (m/z 79), dusitan (m/z 46), dusičnan (m/z 62), jodid (m/z) 127) a hexafluorfosfát (m/z 145)"/>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Agilent_Porovnani_ruznych_mobilnich_fazi_pouzivanych_pro_detekci_anorganickych_aniontu_Zde_jsou_ukazany_vysledky_pro_chloridovy_ion_SIM_pri_mz_35_36c2e6c845/HPST-Agilent-Porovnani-ruznych-mobilnich-fazi-pouzivanych-pro-detekci-anorganickych-aniontu.-Zde-jsou-ukazany-vysledky-pro-chloridovy-ion-(SIM-pri-mz-35)..jpg" alt="HPST/Agilent: Porovnání různých mobilních fází používaných při analýze anorganických aniontů. Zde jsou ukázány výsledky pro chloridový ion (SIM při m/z 35)"/>

Analýza anorganických aniontů pomocí HILIC chromatografie a Agilent LC/MSD iQ detektoru

Stále více se rozvíjející biofarmaceutický průmysl vyžaduje nové specializované nástroje pro analýzu velkých biomolekul v biologických vzorcích, analýzu monoklonálních protilátek (mAb) nebo také proteinů. Standardní <a href="https://lcms.cz/article/874">kapalinový chromatograf</a> je pro tento typ analýz zcela nevhodný. Pro zajištění integrity Vašich biomolekul potřebujete kapalinový chromatograf s nekovovými komponenty v dráze toku vzorku, čímž se minimalizujete nežádoucí povrchové interakce.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Agilent_Bio_LC_portfolio_1260_Infinity_II_Bio_1290_Infinity_II_Bio_e5f102edac/HPST-Agilent-Bio-LC-portfolio-1260-Infinity-II-Bio-1290-Infinity-II-Bio.jpg" alt="HPST: Agilent Bio-LC portfolio 1260 Infinity II Bio - 1290 Infinity II Bio"/>
Firma Agilent za posledních 12 měsíců výrazně rozšířila své stávající portfolio a nově nabízí 3 verze Bio kapalinových chromatografů (Bio-HPLC), které pokrývají tlakový rozsah od 600 až do 1300barů. Společně s novou generací chromatografických kolon Vám firma Agilent nabídne kompletní řešení Vašich bioseparací. V této prezentaci se dozvíte o všech Bio-LC systémech, které má Agilent v portfoliu.
<blockquote>
Přednášející: Ing. Jan Kovář (Produktová specialistka HPST, s.r.o. pro oblast HPLC)
</blockquote>
<h3><a href="https://lcms.cz/products?category=39&amp;manufacturerItems=10&amp;search=bio">Agilent 1260 Infinity II Bio-inertní HPLC System</a></h3>
Spolehlivost a robustnost. Pojmy, které jsou již více jak 40 let úzce spojeny s kapalinovými chromatografy firmy Agilent Technologies. Bio-inertní provedení systému má především tyto vlastnosti:
<ul>
<li>Žádné kovy v dráze toku mobilní fáze</li>
<li>pH rozsah 1 - 13 (krátce 14)</li>
<li>2 M soli, 8 M močovina</li>
<li>Speciál bio-inertní kapiláry</li>
<li>Tlaková odolnost od 600 Bar a ve variantě 1290 Infinity II Bio LC až do 1 300 Bar</li>
<li>Odolný vůči korozi</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Agilent_1260_Infinity_II_Bio_inertni_HPLC_System_cc2e054ac1/HPST-Agilent-1260-Infinity-II-Bio-inertni-HPLC-System.jpg" alt="HPST: Agilent 1260 Infinity II Bio-inertní HPLC System"/>
<h4><a href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=27&amp;mainauthorItems=10&amp;search=bio&amp;publicationTypeItems=1-2-7-4">Knihovna Bio-HPLC řešení Agilent</a></h4>
<ul>
<li>Seamless Method Transfer from an Agilent 1260 Infinity Bio-inert LC to an Agilent 1260 Infinity II Bio-inert LC (Aplikace | 2016)
</li>
<li>Performance Comparison to Determine LC Method Compatibility (Aplikace | 2021)
</li>
<li>Performance Characteristics of the Agilent 1260 Infinity II Bio-Inert LC (Technické články | 2017)
</li>
<li>mAb Titer Determination in 60 Seconds Using the Agilent Bio‑Monolith rProtein A Column (Aplikace | 2021)
</li>
<li>Convenient and Reliable Analysis of Antibody Drug Conjugates (Aplikace | 2021)
</li>
<li>Robust, Reliable, Recombinant Protein A Monolith Column for Antibody Titer Determination (Aplikace | 2021)
</li>
<li>Rapid Analysis of Adenovirus Type 5 Particles with Bio-Monolith Anion‑Exchange HPLC Columns to Support the Development of a High‑Titre Manufacturing Platform (Aplikace | 2021)
</li>
<li>Agilent Instrument Control Framework and Agilent 1260 Infinity Bio-inert Quaternary LC with Thermo Fisher Chromeleon (Technické články | 2014)
</li>
<li>Determination of Low-Metal Release Using the Agilent 1260 Infinity II Bio‑inert LC with ICP-MS (Technické články | 2017)
</li>
<li>Detailed Aggregation Characterization of Monoclonal Antibodies Using the Agilent 1260 Infinity Multi-Detector Bio-SEC Solution with Advanced Light Scattering Detection (Aplikace | 2016)
</li>
</ul>
<h3>Webináře</h3>
<h5><a href="https://lcms.cz/webinar/1124">1. Protein A Affinity Capture followed By AdvanceBio SEC Aggregation Analysis using the Agilent InfinityLab Series 2D-LC System</a> (ZÁZNAM | Proběhlo St, 29.9.2021)</h5>
Proteinová biofarmaceutika, jako jsou rekombinantní monoklonální protilátky, jsou v současné době široce používána k léčbě různých život ohrožujících chorob, včetně rakoviny a autoimunitních onemocnění. 
<h5><a href="https://lcms.cz/webinar/832">2. Bio-Separation Workflow Solutions</a> (ZÁZNAM | Proběhlo Út, 23.3.2021)</h5>
Tento webinář se zaměří: Řešení pro Bio &amp; non-Bio aplikace; Chromatografické kolony pro urychlení charakterizace; Biofarmakologické aplikace využívající Agilent UHPLC a LC Q-TOF.
<h5><a href="https://lcms.cz/webinar/694">3. Resolve More Isoforms with the New Agilent 1290 Infinity II Bio LC System</a> (ZÁZNAM | Proběhlo St, 28.4.2021)</h5>
Připojte se k LC aplikačnímu specialistovi a projděte si s ním nové systémy Agilent Technologies 1290 Infinity II Bio LC a zvolte optimální chromatografický systém pro vaše potřeby.
<h5><a href="https://lcms.cz/webinar/627">4. Next Generation Bio LC Solutions: Workflow solutions with the new 1290 Infinity II Bio LC System with High-Speed Pump</a> (ZÁZNAM | Proběhlo Čt, 10.12.2020)</h5>
Zveme vás, abyste se připojili k našemu webináři, kde se podíváme na nový systém Agilent Technologies 1290 Infinity II Bio používaný při analýzách biofarmak.
<h5><a href="https://lcms.cz/webinar/1562">5. Bio Compatible 2D-LC with OpenLab CDS</a> (St, 30.3.2022, 19:00 (CET - Prague))</h5>
Tato prezentace ukáže 2D-LC software pro OpenLab CDS, který podporuje všechny klíčové pracovní postupy 2D-LC; kvalitativní a kvantitativní měření, detekce UV a MSD, heart-cutting a mnoho dalšího. 
<h5><a href="https://lcms.cz/webinar/742">6. Biocompatible 1290 Infinity II Bio LC for your most complex Biopharma needs</a> (ZÁZNAM | Proběhlo St, 17.2.2021)</h5>
Na tomto webináři budou řečníci diskutovat o současných výzvách, kterým analytické laboratoře čelí při analýze biologických látek a jak lze překonat překážky integrity vzorku a povrchové interakce.

Agilent Bio-LC portfolio (záznám přednášky)

Ústav analýzy potravin a výživy se věnuje zejména výzkumu chemické bezpečnosti potravin a kvalitě a autenticitě potravin (odhalování falšování potravin).
<h3>Vědecké skupiny</h3>
<ul>
<li><a href="https://uapv.vscht.cz/veda-a-vyzkum/vedecke-skupiny/organicke-kontaminanty-v-potravinach-zivotnim-prostredi-a-biomonitoring">Organické kontaminanty v potravinách, životním prostředí a biomonitoring</a></li>
<li><a href="https://uapv.vscht.cz/veda-a-vyzkum/vedecke-skupiny/skupina-chemie-potravin-a-prvkove-analyzy">Skupina chemie potravin a prvkové analýzy</a></li>
<li><a href="https://uapv.vscht.cz/veda-a-vyzkum/vedecke-skupiny/skupina-vyzivy-a-senzoricke-analyzy">Výživa a senzorická analýza</a></li>
<li><a href="https://uapv.vscht.cz/veda-a-vyzkum/vedecke-skupiny/bioaktivni-sekundarni-metabolity">Bioaktivní sekundární metabolity rostlin a mikroorganismů</a></li>
<li><a href="https://uapv.vscht.cz/veda-a-vyzkum/vedecke-skupiny/biologicky-aktivni-a-pridatne-latky">Biologicky aktivní a přídatné látky</a></li>
<li><a href="https://uapv.vscht.cz/veda-a-vyzkum/vedecke-skupiny/metabolomika-biologickych-systemu">Metabolomika biologických systémů</a></li>
</ul>
<h3><a href="https://uapv.vscht.cz/veda-a-vyzkum/22026/22130">Přístrojové vybavení LC-MS</a></h3>
<ul>
<li>Kapalinové chromatografy s hmotnostními detektory typu LC/QQQ, LC/QTRAP, LC/QDa</li>
</ul>
<h4>U-HPLC‒MS/MS (<a href="https://lcms.cz/products?search=acquity+&amp;category=37">Acquity UPLC</a> – <a href="https://lcms.cz/library?search=5500&amp;mainauthorItems=55">QTRAP 5500</a>)</h4>
Spojení ultra-účinného kapalinového chromatografu Acquity UPLC (Waters) s tandemovým hmotnostním spektrometrem QTRAP 5500 (Sciex) s analyzátory kvadrupólem a lineární iontovou pastí a elektrosprejovou ionizací (ESI) představuje standardní instrumentaci pro kvantitativní analýzu známých sloučenin na nízkých koncentračních hladinách, poskytuje vysokou míru selektivity (MS2) a nabízí možnost dodatečné konfirmace pro vybrané sloučeniny v MS3. Přístroj bývá nejčastěji využíván pro stanovení mykotoxinů a reziduí polárních pesticidů a pesticidů ve vodách a bývá též využíván při laboratorní výuce.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/VSCHT_UAPV_U_HPLC_MS_MS_Acquity_UPLC_QTRAP_5500_1741401f77/VSCHT-UAPV-U-HPLCMS-MS-(Acquity-UPLC-QTRAP-5500).jpg" alt="VŠCHT/ÚAPV: U-HPLC‒MS-MS (Acquity UPLC – QTRAP 5500)"/>
<h4>U-HPLC‒MS/MS (<a href="https://lcms.cz/products/154">Agilent 1290 Infinity II</a> – <a href="https://lcms.cz/library?search=6500&amp;mainauthorItems=55">QTRAP 6500+</a>)</h4>
Ultra-účinný kapalinový chromatograf Agilent 1290 Infinity II (Agilent Technologies) a tandemový hmotnostní spektrometr QTRAP 6500+ (Sciex) s analyzátory kvadrupólem a lineární iontovou pastí a elektrosprejovou ionizací (ESI) je novým přístrojem vhodným pro kvantitativní analýzu známých sloučenin poskytující vysokou míru selektivity při běžné analýze (MS2) i s možností dodatečné konfirmace (MS3). Přístroj bývá využíván pro stanovení sloučenin na hranici stopové a ultra-stopové analýzy – toxické rostlinné alkaloidy, metabolity environmentálních kontaminantů i reziduí polárních pesticidů. Je též vybaven konvenčními detektory UV a fluorescenčním, jež nachází využití např. pro stanovení polycyklických aromatických uhlovodíků.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/VSCHT_UAPV_U_HPLC_MS_MS_Agilent_1290_Infinity_II_QTRAP_6500_3df64b7d3b/VSCHT-UAPV-U-HPLCMS-MS-(Agilent-1290-Infinity-II-QTRAP-6500+).jpg" alt="VŠCHT/ÚAPV: U-HPLC‒MS-MS (Agilent 1290 Infinity II – QTRAP 6500+)"/>
<h4><a href="https://lcms.cz/library?search=6495&amp;mainauthorItems=10&amp;instrumentationItems=35">Agilent 6495 Triple Quadrupole LC/MS</a> (Agilent Technologies)</h4>
Kapalinový chromatograf <a href="https://lcms.cz/products/154">Agilent 1290 Infinity II</a> ve spojení s tandemovým hmotnostním spektrometrem Agilent Triple Quadrupole 6495
Tento přístroj se díky své citlivosti a selektivitě využívá pro rutinní analýzu pestrého spektra biologicky aktivních látek. Jsou na něm realizovány akreditované analýzy environmentálních kontaminantů (např. per- a polyfluoroalkylovaných sloučenin a bromovaných retardérů hoření v rámci tzv. humánního biomonitoringu), kanabinoidních látek či reziduí pesticidů. Na přístroji jsou měřeny i další významné látky (např. bisfenoly, organofosfátové retardéry hoření) v široké škále vzorků životního prostředí. Hmotnostní analyzátor typu trojitý kvadrupól pracuje na principu sledování specifického přechodu mezi prekursorovým a produktovým iontem dané látky. Pro ionizaci analytů je k dispozici technika elektrospreje.
<h5>Příklady aplikací</h5>
<ul>
<li>Analýza perfluoralkylovaných sloučenin, bromovaných a organofosfátových retardérů hoření ve vodě, potravinách, v biologických vzorcích a ve vzorcích životního prostředí</li>
<li>Analýza bisfenol A a jeho derivátů v biologických vzorcích</li>
<li>Analýza reziduí pesticidů ve vodě, ovoci, zelenině, čaji a obilovinách</li>
<li>Analýza fytokanabinoidů a jejich metabolitů v biologických vzorcích</li>
<li>Analýza rostlinných alkaloidů v koření, čajích, cereáliích a pseudocereáliích</li>
<li>Analýza migrantů z obalů potravin</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/VSCHT_UAPV_Kapalinovy_chromatograf_Agilent_1290_Infinity_II_ve_spojeni_s_tandemovym_hmotnostnim_spektrometrem_Agilent_Triple_Quadrupole_6495_dcb318f2b2/VSCHT-UAPV-Kapalinovy-chromatograf-Agilent-1290-Infinity-II-ve-spojeni-s-tandemovym-hmotnostnim-spektrometrem-Agilent-Triple-Quadrupole-6495.jpg" alt="VŠCHT/ÚAPV: Kapalinový chromatograf Agilent 1290 Infinity II ve spojení s tandemovým hmotnostním spektrometrem Agilent Triple Quadrupole 6495"/>
<h4><a href="https://lcms.cz/products/135">Agilent 6495C Triple Quadrupole LC/MS</a> (Agilent Technologies)</h4>
Kapalinový chromatograf <a href="https://lcms.cz/products/154">Agilent 1290 Infinity II</a> ve spojení s tandemovým hmotnostním spektrometrem Agilent Triple Quadrupole 6495C
Tato instrumentace kombinuje výhody ultra-účinné kapalinové chromatografie a tandemové hmotnostní spektrometrie sestávající z MS systému nové generace typu A6495C (analyzátor typu trojitý kvadrupól). Instrumentace nalézá své uplatnění především při stopových analýzách, například kontaminantů potravin, kdy je nutno dosahovat velmi nízkých detekčních limitů (až 0,001 mg/kg). Díky 3. generaci tohoto typu detektoru je možné dosáhnout dostatečného rozlišení v rámci až 3000 m/z. Při multireziduální analýze je využíván dMRM akviziční mód, umožňující v daném časovém úseku analyzovat specifické přechody mezi prekursorovým a produktovým iontem pro velký počet látek při zachování dostatečné citlivosti a selektivity. Tato instrumentace je na našem pracovišti využívána především při analýze reziduí pesticidů v řadě potravinových komodit, jelikož během velmi krátkého času je možné detekovat a konfirmovat až 400 různých látek. Mezi aplikace patří jak rychlý screening přítomnosti daných látek ve vzorku, tak i jejich konfirmace a velmi rychlá kvantifikace pomocí softwaru Agilent MassHunter. Pro ionizaci analytů je k dispozici technika elektrospreje, Vent-free iontový zdroj s VacSchield systémem navíc umožňuje udržet vakuum v MS systému během jeho údržby.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/VSCHT_UAPV_Kapalinovy_chromatograf_Agilent_1290_Infinity_II_ve_spojeni_s_tandemovym_hmotnostnim_spektrometrem_Agilent_Triple_Quadrupole_6495_C_73b37bd54e/VSCHT-UAPV-Kapalinovy-chromatograf-Agilent-1290-Infinity-II-ve-spojeni-s-tandemovym-hmotnostnim-spektrometrem-Agilent-Triple-Quadrupole-6495C.jpg" alt="VŠCHT/ÚAPV: Kapalinový chromatograf Agilent 1290 Infinity II ve spojení s tandemovým hmotnostním spektrometrem Agilent Triple Quadrupole 6495C"/>
<h4>Kapalinový chromatograf <a href="https://lcms.cz/products?search=acquity+&amp;category=37">Acquity UPLC</a> ve spojení s hmotnostním spektrometrem <a href="https://lcms.cz/products/195">Xevo TQ-S</a> (LC-MS/MS)</h4>
Jedná se o vysoce citlivý tandemový hmotnostní spektrometr, který je využíván pro stanovení látek i na velmi nízkých koncentračních hladinách. Tento citlivý univerzální detektor ve spojení s vysoko účinnou kapalinovou chromatografií představuje vhodný nástroj pro analýzu širokého spektra analytů v různých typech vzorků nejen v potravinách, ale i vzorků životního prostředí a biomonitoringu. Součástí hmotnostního spektrometru je elektrosprejový iontový zdroj a analýza iontů probíhá pomocí trojitého kvadrupólu měřením charakteristických mateřských a dceřiných iontů sledovaných analytů.
<h5>Příklady aplikací</h5>
<ul>
<li>Analýza širokého portfolia reziduí pesticidů (více jak 400 látek v jedné metodě) v potravinách, především v ovoci a zelenině, ale i dětské výživě, cereáliích a dalších potravinových surovinách.</li>
<li>Analýza environmentálních kontaminantů, jako jsou perfluoralkylované sloučeniny, nebo metabolity polycyklických aromatických uhlovodíky a ftalátů, v potravinách, v biologických matricích a vzorcích životního prostředí.</li>
<li>Analýza akrylamidu – procesní kontaminant vznikající při tepelné úpravě potravin, stanovuje se například ve vzorcích sušenek, brambůrek, chlebu či například v kávě.</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/VSCHT_UAPV_Kapalinovy_chromatograf_Acquity_UPLC_ve_spojeni_s_hmotnostnim_spektrometrem_Xevo_TQ_S_LC_MS_MS_6da8c2d0d7/VSCHT-UAPV-Kapalinovy-chromatograf-Acquity-UPLC-ve-spojeni-s-hmotnostnim-spektrometrem-Xevo-TQ-S-(LC-MS-MS).jpg" alt="VŠCHT/ÚAPV: Kapalinový chromatograf [Acquity UPLC](https://lcms.cz/products?search=acquity+&amp;category=37) ve spojení s hmotnostním spektrometrem Xevo TQ-S (LC-MS/MS)"/>
<h4>Kapalinový chromatograf <a href="https://lcms.cz/products?search=acquity+&amp;category=37">Acquity UPLC</a> ve spojení s hmotnostním spektrometrem <a href="https://lcms.cz/library?search=quattro+premier+xe&amp;mainauthorItems=5&amp;instrumentationItems=35">Quattro Premier XE</a> (LC-MS/MS)</h4>
Jedná se o jeden z prvních typů tandemových hmotnostních spektrometrů používaných v naší laboratoři, který je v současné době využíván pro stanovení látek, které se ve vzorcích přirozeně nachází ve vyšších koncentracích. Součástí hmotnostního spektrometru je elektrosprejový iontový zdroj a analýza iontů probíhá pomocí trojitého kvadrupólu měřením charakteristických mateřských a dceřiných iontů sledovaných analytů.
<h5>Příklady aplikací</h5>
<ul>
<li>Analýza ve vodě rozpustných vitamínů, zejména vitamíny skupiny B.</li>
<li>Stanovení kyseliny hyaluronové, glukosaminu, chondroitinu.</li>
<li>Analýza akrylamidu – procesní kontaminant vznikající při tepelné úpravě potravin, stanovuje se například ve vzorcích sušenek, brambůrek, chlebu či například v kávě.</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/VSCHT_UAPV_Kapalinovy_chromatograf_Acquity_UPLC_ve_spojeni_s_hmotnostnim_spektrometrem_Quattro_Premier_XE_LC_MS_MS_5edd4bb837/VSCHT-UAPV-Kapalinovy-chromatograf-Acquity-UPLC-ve-spojeni-s-hmotnostnim-spektrometrem-Quattro-Premier-XE-(LC-MS-MS).jpg" alt="VŠCHT/ÚAPV: Kapalinový chromatograf Acquity UPLC ve spojení s hmotnostním spektrometrem Quattro Premier XE (LC-MS/MS)"/>
<h4>Kapalinový chromatograf <a href="https://lcms.cz/products?search=acquity+&amp;category=37">Acquity UPLC</a> ve spojení s <a href="https://lcms.cz/products/206">hmotnostním spektrometrem QDa</a> (LC-MS)</h4>
Jedná se hmotnostní spektrometr využívající analyzátor typu jednoduchý kvadrupól. Tento poměrně jednoduchý přístroj představuje kombinaci relativně nízké pořizovací ceny a benefitů hmotnostní spektrometrie. Ve spojení s vysoko účinnou kapalinovou chromatografií představuje velice efektivní a uživatelsky přívětivý nástroj pro rutinní analýzy, ve kterých často dokáže nahradit konvenční detektory, jež předčí svou univerzálností. Tento přístroj je rovněž využíván k výukovým účelům jako „první kontakt“ studentů bakalářských studijních programů s hmotnostní spektrometrií.
<h5>Příklady aplikací</h5>
<ul>
<li>Stanovení přídatných látek v potravinách a nápojích – především barviva, sladidla a konzervační látky syntetického původu.</li>
<li>Stanovení kofeinu – v potravinách i nápojích.</li>
<li>Analýza aminokyselin – sledování zastoupení a složení aminokyselin v potravinách.</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/VSCHT_UAPV_Kapalinovy_chromatograf_Aquity_UPLC_ve_spojeni_s_hmotnostnim_spektrometrem_Q_Da_LC_MS_b3ebb17c56/VSCHT-UAPV-Kapalinovy-chromatograf-Aquity-UPLC-ve-spojeni-s-hmotnostnim-spektrometrem-QDa-(LC-MS).jpg" alt="VŠCHT/ÚAPV: Kapalinový chromatograf Aquity UPLC ve spojení s hmotnostním spektrometrem QDa (LC-MS)"/>

VŠCHT ÚAPV: Kapalinové chromatografy s hmotnostními detektory (QQQ, QTRAP, SQ)

Pro separaci se využívá distribuce látek mezi dvě fáze, mobilní/pohyblivou a stacionární/nepohyblivou.
<h5>Z hlediska fyzikálně-chemického principu dělení můžeme kapalinovu chromatografii rozdělit na:</h5>
<ul>
<li>adsorpční chromatografii - k separaci dochází v důsledku specifických interakcí látek se stacionární fází tvořenou pevnými, nemodifikovanými částicemi</li>
<li>rozdělovací chromatografii - látky jsou zachytávány v kapalné stacionární fázi, která je nanesená na pevném nosiči</li>
<li><a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=ion+exchange">iontově-výměnnou chromatografii</a> - slouží k separaci iontů na stacionární fázi, kterým je nosič s navázanými nabitými funkčními skupinami</li>
<li><a href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=42&amp;mainauthorItems=10&amp;search=GPC">gelovou (permeační) chromatografii</a> - kdy dochází k dělení látek na základě velikosti částic, které se zachytávájí ve stacionární fázi tvořené gelem s jasně definovanou velikostí pórů</li>
<li><a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=affinity+chromatography">afinitní chromatografii</a> – která umožňuje oddělení příbuzných proteinů z komplexní směsi, na základě interakce s nosičem s imobilizovanými ligandy</li>
<li>speciální chromatografie – <a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=chiral">chirální</a> aj.</li>
</ul>
<blockquote>
<h4>+ 20 zdarma dostupných webinářů Agilent Technologies na téma <a href="https://lcms.cz/webinars?search=agilent&amp;tags=36-24">akademie a principy HPLC</a> v databázi</h4>
</blockquote>
<blockquote>
<h5>School Series of LC Basic Chapter</h5>
</blockquote>
<blockquote>
<ul>
<li>Pochopení nuancí HPLC kolon</li>
<li><a href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=34&amp;mainauthorItems=10&amp;search=selection">Výběr správné chemie kolony</a></li>
<li>Pochopení dopadu stacionární fáze kolony na selektivitu</li>
<li>Jak zvýšit produktivitu vaší laboratoře</li>
<li>Základní <a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=fundamentals">teorie a principy HPLC chromatografů</a></li>
<li>Typy hardwaru (čerpadla, autosamplery, termostaty kolon a detektory)</li>
<li><a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=troubleshooting">Tipy a triky pro odstraňování problémů</a> souvisejících s hardwarem</li>
</ul>
</blockquote>
<blockquote>
<h5>School Series of LC Advanced Chapter</h5>
</blockquote>
<blockquote>
<ul>
<li>Současné <a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=method+developement">trendy ve vývoji HPLC metod</a></li>
<li>Systematické přístupy</li>
<li>Jak začít s vývojem HPLC metody</li>
<li>Služby pro celou laboratoř</li>
<li>Pokročilé tipy a triky pro odstraňování problémů</li>
<li>Vliv parametrů pokročilých metod v HPLC</li>
<li>Klíčové unikátní vlastnosti UHPLC systémů</li>
</ul>
</blockquote>
<h5>Obecně se kapalinový chromatograf skládá z:</h5>
<ul>
<li>vysokotlakého čerpadla (pumpy) – slouží k transportu mobilní fáze</li>
<li>zařízení pro dávkování vzorku – automatické nebo manuální</li>
<li>chromatografické kolony (stacionární fáze) – ta může být v termostatovaném prostoru</li>
<li>detektoru - zaznamenává signál, který je dán rozdílem mezi průchodem čisté mobilní fáze a mobilní fází obsahující eluovanou složku (vzorek)</li>
<li>také může obsahovat řadu obměn – další detektor i pumpu, frakční kolektor, soustavu ventilů apod.</li>
</ul>
Smyslem tohoto článku je pak vysvětlit tok mobilní fáze systémem HPLC na jedné z nejčastěji používaných sestav Agilent Technologies. 
Na Obrázku 1 můžete vidět schéma, kde mobilní fáze prochází kvartérní pumpou, jejíž součástí je degasser pro její odplynění a která umožňuje míchání až čtyř různých rozpouštědel. K tomuto nízkotlakému míchání dochází ve směšovacím ventilu (<a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=10&amp;search=MCGV">MCGV</a> - multi channel gradient valve), následně pak mobilní fáze proudí do vstupního ventilu před prvním pístem pumpy.
Tento ventil může být řízen elektronicky (AIV - active inlet valve) a nebo pohybem pístu (PIV – passive inlet valve). Prvním pístem je pak mobilní fáze tlačena do výstupního ventilu (outlet valve) a na tlumič rázů (damper), jehož součástí je i tlakový senzor. Přes druhý píst proudí mobilní fáze do promývacího ventilu (purge valve), který ji pouští buď do odpadu a promývá se pouze pumpa a nebo dál do zbytku sestavy. 
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/HPST_Obrazek_1_Schema_toku_mobilni_faze_kapalinovym_chromatografem_s_UV_detekci_f7d6bf31a4/HPST-Obrazek-1-Schema-toku-mobilni-faze-kapalinovym-chromatografem-s-UV-detekci.jpg" alt="HPST: Obrázek 1 Schéma toku mobilní fáze kapalinovým chromatografem s UV detekcí"/>
Pokud je promývací ventil zavřený, jde mobilní fáze kapilárou do dávkovacího ventilu autosampleru. Nedochází-li v dané chvíli k nástřiku vzorku, proudí tato fáze skrz dávkovací zařízení, smyčku, jehlu a sedýlko zpět do dávkovacího ventilu. To je hlavní výhoda automatických samplerů firmy Agilent Technologies, že vnitřní části, potřebné pro nadávkování vzorku, jsou neustále promývány mobilní fází a tím se snižuje možnost přenosu analytů z jednoho vzorku do druhého. 
Z autosampleru proudí mobilní fáze na chromatografickou kolonu, kde po nadávkování vzorku dochází k separaci jednotlivých složek vzorku, které jsou dále unášeny do detektoru diodového pole (DAD). 
Detekce těchto složek v DAD je pak dána absorbancí paprsku světla konkrétní vlnové délky při průchodu analytickou celou, kterou také prochází mobilní fáze.
V <a href="https://lcms.cz/products?category=8&amp;distributorItems=37&amp;manufacturerItems=10">chromatografickém softwaru</a> pak můžeme rozdíl mezi absorbancí čisté mobilní fáze a absorbancí mobilní fáze s odseparovanou složkou vzorku pozorovat jako chromatogram. Z cely detektoru odchází mobilní fáze do odpadu, případně do frakčního kolektoru či dalšího detektoru.
Správné pochopení toku mobilní fáze pak může uživatelům usnadnit diagnostiku problému, který se může projevit nestandardněm vysokým nebo naopak nízkým zpětným tlakem v HPLC systému. Tento tlak je kontinuálně monitorován tlakovým senzorem a může být sledován v chromatografickém softwaru.
Příští díl servisního okénka HPLC by měl být věnován jednotlivým typům HPLC/UHPLC pump, které na náš trh dodává společnost Agilent Technologies.
<h3>Přehled literatury k základům a principům v kapalinové chromatografii od Agilent Technologies (<a href="https://lcms.cz/library?search=fundamentals&amp;mainauthorItems=10">ke stažení v knihovně LabRulezLCMS</a>)</h3>
<ul>
<li>HPLC Separation Fundamentals - LC Columns and Consumables (Prezentace | 2007)
</li>
<li>HPLC Troubleshooting Fundamentals (Prezentace | 2021)
</li>
<li>Mass Spectrometry Fundamentals –Theory (Prezentace | 2016)
</li>
<li>SAMPLE PREPARATION FUNDAMENTALS FOR CHROMATOGRAPHY (Příručky | 2013)
</li>
<li>Eliminate your Application and Chromatography Challenges - Optimizing your Application/Method Transfer considerations (Prezentace | 2020)
</li>
<li>Eliminate your Application and Chromatography Challenges - Troubleshooting your Method, Application/Chromatography (Prezentace | 2020)
</li>
<li>Is 2D HPLC the Answer for You (Prezentace | 2021)
</li>
<li>Demystifying the Chromatographic Process (Prezentace | 2014)
</li>
<li>HPLC Method Development Systematic Approach vs Random Walk - Improving the Efficiency of Method Development and Optimization (Prezentace | 2014)
</li>
<li>Can I Really Enjoy the Benefits of the Latest LC Column Technology? (Prezentace | 2016)
</li>
</ul>

TEORIE, PRAXE A ÚDRŽBA: HPLC – Vysokoúčinná kapalinová chromatografie – základy a principy

Webináře

Aplikace

Akademie

Osobnosti

Plasty

Životní prostředí

Potraviny

Vody

Zdraví

Přednáška

Vědecký článek

Rozhovor

Toxikologie

Popularizace

Věda a výzkum

Software

Covid-19

Kariéra

Článek

Laboratoře

Různé

Produkt

Video

Poster

Nejbližší akce

Typ novinky

Zaměření

Je autorizovaným distributorem společnosti Agilent Technologies pro Českou republiku v oblastech chromatografie (GC, HPLC, UHPLC, kapilární elektroforéza) a hmotnostní spektrometrie (GC/MS, LC/MS, CE/MS), disolučních aparátů, molekulární (UV-Vis, UV-Vis-NIR, fluorescence, FTIR analyzátory a mikroskopy) a atomové spektroskopie (ICP-OES, ICP-MS, AAS), a v neposlední řadě také v oblasti molekulární biologie a genomiky (analýza nukleových kyselin a proteinů, microarray skenery a skla, PCR & RT-PCR, qPCR, řešení pro NGS, reagencie pro mutagenezi a klonování, sondy FISH a další).

Altium International

je součástí Fakulty potravinářské a biochemické technologie. Výzkumné projekty jsou zaměřeny především na problematiku kvality, autenticity a bezpečnosti potravin, krmiv, potravinových surovin, doplňků stravy apod. 

VŠCHT ÚAPV: Kapalinové chromatografy s hmotnostními detektory (QQQ, QTRAP, SQ)

Agilent Bio-LC portfolio (záznám přednášky)

Analýza anorganických aniontů pomocí HILIC chromatografie a Agilent LC/MSD iQ detektoru

Simultánní screening a kvantifikace reziduí pesticidů v červeném zelí

Simultánní stanovení vitaminu D₂ a D₃ v mléce

Zpátky do minulosti: HPLC systémy Agilent Technologies u našich zákazníků

TEORIE, PRAXE A ÚDRŽBA: HPLC – Vysokoúčinná kapalinová chromatografie – základy a principy

Nejbližší akce

Pracovní dny klinické hmotnostní spektrometrie 2026

Trendy mikrobiologického testování listerií v potravinářství 2026

Altium softwarová školení - OpenLAB CDS 2.x SW

Webináře

Strategies to Mitigate Sporadic PFAS Contamination in Analytical Workflows

Tracking irrigation-related contaminants in water and soils (QTOF-MS)

Imaging and top-down analysis of intact protein complexes in tissue