LCMS
Další informace
WebinářeO násKontaktujte násPodmínky užití
LabRulez s.r.o. Všechna práva vyhrazena. Obsah dostupný pod licencí CC BY-SA 4.0 Uveďte původ-Zachovejte licenci.
Autor
Altium International
Altium International
Je autorizovaným distributorem společnosti Agilent Technologies pro Českou republiku v oblastech chromatografie (GC, HPLC, UHPLC, kapilární elektroforéza) a hmotnostní spektrometrie (GC/MS, LC/MS, CE/MS), disolučních aparátů, molekulární (UV-Vis, UV-Vis-NIR, fluorescence, FTIR analyzátory a mikroskopy) a atomové spektroskopie (ICP-OES, ICP-MS, AAS), a v neposlední řadě také v oblasti molekulární biologie a genomiky (analýza nukleových kyselin a proteinů, microarray skenery a skla, PCR & RT-PCR, qPCR, řešení pro NGS, reagencie pro mutagenezi a klonování, sondy FISH a další).
Tagy
Článek
Aplikace
Produkt
Video
LinkedIn Logo

Simultánní stanovení vitaminu D₂ a D₃ v mléce

St, 26.5.2021
| Originální článek z: HPST/Agilent 6470
Kvantitativní analýza v reálné matrici pomocí Agilent 1290 Infinity II LC ve spojení s tandemovým hmotnostním spektrometrem Agilent 6470 LC/TQ.
Video placeholder
  • Foto: Pixabay/Imo Flow: Simultánní stanovení vitaminu D₂ a D₃ v mléce
  • Video: Agilent Technologies: Take a Closer Look at the New 6470B Triple Quadrupole LC/MS

Vitamin D hraje důležitou roli v metabolických cestách, včetně homeostázy vápníku a fosforu, a je prekurzorem steroidních hormonů. Bohatým zdrojem vitaminu D jsou játra, ryby, vejce nebo mléčné výrobky. V některých rozvojových zemích jsou mléko a oleje na vaření, jako nákladově efektivní řešení prevence podvýživy, o vitamin D obohacovány. V rostlinách se nachází jako ergokalciferol (vitamin D₂) a u zvířat jako cholekalciferol (vitamin D₃).

Kvantitativní analýza založená na LC/MS/MS je pro kvantifikaci populárnější než tradiční analytické metody a to kvůli lepší specificitě a vyšší citlivosti. Analýza D₂ a D₃ v krmných směsích pro zvířata, potravinách rostlinného původu nebo potravinách o vitamin D obohacovaných uměle však čelí výzvám, jako je rychlá degradace a špatná reprodukovatelnost. Složitost analýzy se dále zvýšuje v důsledku rozmanitosti mléka a významným matricovžm efektům. Vyvinutá LC/QQQ metodika prokázala citlivost na úrovni 0,4 ng/g, má vysokou reprodukovatelnost a je vhodná nejen pro rutinní laboratoře, které tyto testy provádějí.

Struktura vitaminu D₂ a D₃Struktura vitaminu D₂ a D₃

Úvod

Pro analýzu vitaminů D₂ a D₃ existuje řada publikovaných metod. Vzorky potravin s významnými matričními efekty se v LC/MS/MS analyzují pomocí APCI iontového zdroje. Přes veškeré úsilí ale představuje rozmanitost vzorků mléka s různým obsahem tuku pro analytická data potenciální hrozbu. Zmýdelnění ethanolickým hydroxidem draselným je důležité při manipulaci s proměnlivým poměrem tuků, zatímco přidání pyrogallolu je zásadní, aby se zabránilo oxidaci analytů během opakovaných kroků promývání. Derivatizace pomocí 4-fenyl-1,2,4-triazolin-3,5-dionu (PTAD) je užitečná ke zvýšení citlivosti obou analytů, zatímco pro analýzu výtěžnosti je zásadní použití deuterovaných vnitřních standardů (IS).

Ředicí protokol pro přípravu standardůŘedicí protokol pro přípravu standardů

Instrumentace

Parametry HPLC metody
  • Kolona: Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (p/n 699975-302)
  • Teplota kolony: 10 °C
  • Objem nástřiku: 10 μL
  • Teplota autosampleru: 10 °C
  • Proplachovací roztok: Metanol/Voda (80/20)
  • Mobilní fáze: A) 0,1% kyseliny mravenčí ve vodě; B) 100% methanol
  • Průtok: 300 μL/min
Parametry LC/TQ systému
  • Ionizační mód: AJS (+ ve)
  • Nebulizační plyn: 45 psi
  • Sušící plyn: 5 l/min při 300 °C
  • Vyhřívací plyn: 11 l/min při 250 °C
  • Napětí na kapiláře: 3500 V
  • Napětí trysky: 500 V
  • CAV: 5 V
  • Dwell time: 50 ms
  • Rozlišení: Unit/Unit

Parametry MRM pro analýzu vitaminu D₂ a D₃Parametry MRM pro analýzu vitaminu D₂ a D₃

Výsledky a diskuse

Vyvinutá metoda je vhodná pro kvantifikaci dvou forem vitaminu D: ergokalciferolu a cholekalciferolu. Bylo zjištěno, že metoda ESI-LC/MS/MS založená na MRM je specifická pro dva analyty v mléčné matrici. Kromě použití interních standardů se při sledování nízkých mezí detekce, vysoké citlivosti a vysoké výtěžnosti ukázala být užitečná příprava vzorků založená na zmýdelnění mléčné matrice s následnou derivatizací.

Příprava vzorků napříč různými typy mléka z trhu ukázala slušnou výtěžnost obou analytů. Tuto metodu mohou tedy použít výzkumné, kontrolní nebo komerční zkušební laboratoře pro kvantitativní odhad obsahu vitaminů D2 a D3 při obohacování potravit.

Citlivost analýzy vitamínů D₂ a D₃ (0,4 ppb v matrici oproti blanku)Citlivost analýzy vitamínů D₂ a D₃ (0,4 ppb v matrici oproti blanku)

Překrytí různých koncentrací vitamínů D₂ a D₃Překrytí různých koncentrací vitamínů D₂ a D₃

Kompletní aplikaci ke stažení společně s dalšími LC/QQQ aplikacemi pro analýzy vitamánů od Agilent Technologies nalezmete v Knihovně.
Altium International
LinkedIn Logo
 

Mohlo by Vás zajímat

Efficient Profiling of Lipid Nanoparticle Formulations Using Waters GTxResolve 2000 Å SEC Column, MaxPeak Premier 3 μm

Aplikace
| 2025 | Waters
Instrumentace
GPC/SEC, Spotřební materiál, LC kolony
Výrobce
Waters
Zaměření
Lipidomika

A Study of the Spatial Distribution of Gossypol and Other Terpenoids in Cotton Leaves and Ovules

Aplikace
| 2025 | Shimadzu
Instrumentace
Mikroskopie, LC/MS, LC/HRMS, LC/MS/MS, LC/TOF
Výrobce
Shimadzu
Zaměření
Potraviny a zemědělství

Anions in lithium-ion battery solvents

Aplikace
| 2025 | Metrohm
Instrumentace
Iontová chromatografie
Výrobce
Metrohm
Zaměření
Průmysl a chemie

A Direct Aqueous Injection Method for Polar Pesticides in Drinking and Nonpotable Water

Aplikace
| 2025 | Agilent Technologies
Instrumentace
LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
Výrobce
Agilent Technologies
Zaměření
Životní prostředí

Robustness Evaluation of PFAS Analysis in Soil Using LCMS -8060RX

Aplikace
| 2025 | Shimadzu
Instrumentace
LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
Výrobce
Shimadzu
Zaměření
Životní prostředí
 

Podobné články

Mikropolutanty pod lupou: GAČR projekt docentky Stiborové zkoumá roli symbiotických hub v ochraně rostlin
Článek | Věda a výzkum

Mikropolutanty pod lupou: GAČR projekt docentky Stiborové zkoumá roli symbiotických hub v ochraně rostlin

Mikropolutanty z léčiv či plastů mohou ovlivnit půdu a rostliny. Výzkum Hany Stiborové zkoumá jejich přestup do rostlin a vliv mykorhizních hub na cestu těchto látek půdním prostředím.
Vysoká škola chemicko-technologická v Praze
tag
share
more
Altium - Akční ceny na váhy ADAM Equipment
Článek | Produkt

Altium - Akční ceny na váhy ADAM Equipment

Altium International nabízí v květnu a červnu 10% slevu na vybrané modely vah značky ADAM Equipment. Nenechte si ujít tuto výjimečnou nabídku!
Altium International
tag
share
more
Watrex P102 – Vysoce přesné HPLC čerpadlo s jednoduchou údržbou
Článek | Produkt

Watrex P102 – Vysoce přesné HPLC čerpadlo s jednoduchou údržbou

Čerpadlo Watrex P102 spojuje přesnost a snadnou údržbu. Naučte se sami vyměnit těsnění podle našeho návodu a prodlužte životnost i spolehlivost čerpadla bez nutnosti servisu.
Watrex Praha
tag
share
more
Česká chromatografická škola - HPLC.cz 2025 - Den 4
Článek | Nejbližší akce

Česká chromatografická škola - HPLC.cz 2025 - Den 4

Středeční program se zaměřil na HILIC – od principů po praktické využití ve farmacii a bioanalýze. Nechyběla inspirace z HPLC, LC-MS ani inovativní přístup Repetto LC.
Česká chromatografická škola - HPLC.cz
tag
share
more
 

Mohlo by Vás zajímat

Efficient Profiling of Lipid Nanoparticle Formulations Using Waters GTxResolve 2000 Å SEC Column, MaxPeak Premier 3 μm

Aplikace
| 2025 | Waters
Instrumentace
GPC/SEC, Spotřební materiál, LC kolony
Výrobce
Waters
Zaměření
Lipidomika

A Study of the Spatial Distribution of Gossypol and Other Terpenoids in Cotton Leaves and Ovules

Aplikace
| 2025 | Shimadzu
Instrumentace
Mikroskopie, LC/MS, LC/HRMS, LC/MS/MS, LC/TOF
Výrobce
Shimadzu
Zaměření
Potraviny a zemědělství

Anions in lithium-ion battery solvents

Aplikace
| 2025 | Metrohm
Instrumentace
Iontová chromatografie
Výrobce
Metrohm
Zaměření
Průmysl a chemie

A Direct Aqueous Injection Method for Polar Pesticides in Drinking and Nonpotable Water

Aplikace
| 2025 | Agilent Technologies
Instrumentace
LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
Výrobce
Agilent Technologies
Zaměření
Životní prostředí

Robustness Evaluation of PFAS Analysis in Soil Using LCMS -8060RX

Aplikace
| 2025 | Shimadzu
Instrumentace
LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
Výrobce
Shimadzu
Zaměření
Životní prostředí
 

Podobné články

Mikropolutanty pod lupou: GAČR projekt docentky Stiborové zkoumá roli symbiotických hub v ochraně rostlin
Článek | Věda a výzkum

Mikropolutanty pod lupou: GAČR projekt docentky Stiborové zkoumá roli symbiotických hub v ochraně rostlin

Mikropolutanty z léčiv či plastů mohou ovlivnit půdu a rostliny. Výzkum Hany Stiborové zkoumá jejich přestup do rostlin a vliv mykorhizních hub na cestu těchto látek půdním prostředím.
Vysoká škola chemicko-technologická v Praze
tag
share
more
Altium - Akční ceny na váhy ADAM Equipment
Článek | Produkt

Altium - Akční ceny na váhy ADAM Equipment

Altium International nabízí v květnu a červnu 10% slevu na vybrané modely vah značky ADAM Equipment. Nenechte si ujít tuto výjimečnou nabídku!
Altium International
tag
share
more
Watrex P102 – Vysoce přesné HPLC čerpadlo s jednoduchou údržbou
Článek | Produkt

Watrex P102 – Vysoce přesné HPLC čerpadlo s jednoduchou údržbou

Čerpadlo Watrex P102 spojuje přesnost a snadnou údržbu. Naučte se sami vyměnit těsnění podle našeho návodu a prodlužte životnost i spolehlivost čerpadla bez nutnosti servisu.
Watrex Praha
tag
share
more
Česká chromatografická škola - HPLC.cz 2025 - Den 4
Článek | Nejbližší akce

Česká chromatografická škola - HPLC.cz 2025 - Den 4

Středeční program se zaměřil na HILIC – od principů po praktické využití ve farmacii a bioanalýze. Nechyběla inspirace z HPLC, LC-MS ani inovativní přístup Repetto LC.
Česká chromatografická škola - HPLC.cz
tag
share
more
 

Mohlo by Vás zajímat

Efficient Profiling of Lipid Nanoparticle Formulations Using Waters GTxResolve 2000 Å SEC Column, MaxPeak Premier 3 μm

Aplikace
| 2025 | Waters
Instrumentace
GPC/SEC, Spotřební materiál, LC kolony
Výrobce
Waters
Zaměření
Lipidomika

A Study of the Spatial Distribution of Gossypol and Other Terpenoids in Cotton Leaves and Ovules

Aplikace
| 2025 | Shimadzu
Instrumentace
Mikroskopie, LC/MS, LC/HRMS, LC/MS/MS, LC/TOF
Výrobce
Shimadzu
Zaměření
Potraviny a zemědělství

Anions in lithium-ion battery solvents

Aplikace
| 2025 | Metrohm
Instrumentace
Iontová chromatografie
Výrobce
Metrohm
Zaměření
Průmysl a chemie

A Direct Aqueous Injection Method for Polar Pesticides in Drinking and Nonpotable Water

Aplikace
| 2025 | Agilent Technologies
Instrumentace
LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
Výrobce
Agilent Technologies
Zaměření
Životní prostředí

Robustness Evaluation of PFAS Analysis in Soil Using LCMS -8060RX

Aplikace
| 2025 | Shimadzu
Instrumentace
LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
Výrobce
Shimadzu
Zaměření
Životní prostředí
 

Podobné články

Mikropolutanty pod lupou: GAČR projekt docentky Stiborové zkoumá roli symbiotických hub v ochraně rostlin
Článek | Věda a výzkum

Mikropolutanty pod lupou: GAČR projekt docentky Stiborové zkoumá roli symbiotických hub v ochraně rostlin

Mikropolutanty z léčiv či plastů mohou ovlivnit půdu a rostliny. Výzkum Hany Stiborové zkoumá jejich přestup do rostlin a vliv mykorhizních hub na cestu těchto látek půdním prostředím.
Vysoká škola chemicko-technologická v Praze
tag
share
more
Altium - Akční ceny na váhy ADAM Equipment
Článek | Produkt

Altium - Akční ceny na váhy ADAM Equipment

Altium International nabízí v květnu a červnu 10% slevu na vybrané modely vah značky ADAM Equipment. Nenechte si ujít tuto výjimečnou nabídku!
Altium International
tag
share
more
Watrex P102 – Vysoce přesné HPLC čerpadlo s jednoduchou údržbou
Článek | Produkt

Watrex P102 – Vysoce přesné HPLC čerpadlo s jednoduchou údržbou

Čerpadlo Watrex P102 spojuje přesnost a snadnou údržbu. Naučte se sami vyměnit těsnění podle našeho návodu a prodlužte životnost i spolehlivost čerpadla bez nutnosti servisu.
Watrex Praha
tag
share
more
Česká chromatografická škola - HPLC.cz 2025 - Den 4
Článek | Nejbližší akce

Česká chromatografická škola - HPLC.cz 2025 - Den 4

Středeční program se zaměřil na HILIC – od principů po praktické využití ve farmacii a bioanalýze. Nechyběla inspirace z HPLC, LC-MS ani inovativní přístup Repetto LC.
Česká chromatografická škola - HPLC.cz
tag
share
more
 

Mohlo by Vás zajímat

Efficient Profiling of Lipid Nanoparticle Formulations Using Waters GTxResolve 2000 Å SEC Column, MaxPeak Premier 3 μm

Aplikace
| 2025 | Waters
Instrumentace
GPC/SEC, Spotřební materiál, LC kolony
Výrobce
Waters
Zaměření
Lipidomika

A Study of the Spatial Distribution of Gossypol and Other Terpenoids in Cotton Leaves and Ovules

Aplikace
| 2025 | Shimadzu
Instrumentace
Mikroskopie, LC/MS, LC/HRMS, LC/MS/MS, LC/TOF
Výrobce
Shimadzu
Zaměření
Potraviny a zemědělství

Anions in lithium-ion battery solvents

Aplikace
| 2025 | Metrohm
Instrumentace
Iontová chromatografie
Výrobce
Metrohm
Zaměření
Průmysl a chemie

A Direct Aqueous Injection Method for Polar Pesticides in Drinking and Nonpotable Water

Aplikace
| 2025 | Agilent Technologies
Instrumentace
LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
Výrobce
Agilent Technologies
Zaměření
Životní prostředí

Robustness Evaluation of PFAS Analysis in Soil Using LCMS -8060RX

Aplikace
| 2025 | Shimadzu
Instrumentace
LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
Výrobce
Shimadzu
Zaměření
Životní prostředí
 

Podobné články

Mikropolutanty pod lupou: GAČR projekt docentky Stiborové zkoumá roli symbiotických hub v ochraně rostlin
Článek | Věda a výzkum

Mikropolutanty pod lupou: GAČR projekt docentky Stiborové zkoumá roli symbiotických hub v ochraně rostlin

Mikropolutanty z léčiv či plastů mohou ovlivnit půdu a rostliny. Výzkum Hany Stiborové zkoumá jejich přestup do rostlin a vliv mykorhizních hub na cestu těchto látek půdním prostředím.
Vysoká škola chemicko-technologická v Praze
tag
share
more
Altium - Akční ceny na váhy ADAM Equipment
Článek | Produkt

Altium - Akční ceny na váhy ADAM Equipment

Altium International nabízí v květnu a červnu 10% slevu na vybrané modely vah značky ADAM Equipment. Nenechte si ujít tuto výjimečnou nabídku!
Altium International
tag
share
more
Watrex P102 – Vysoce přesné HPLC čerpadlo s jednoduchou údržbou
Článek | Produkt

Watrex P102 – Vysoce přesné HPLC čerpadlo s jednoduchou údržbou

Čerpadlo Watrex P102 spojuje přesnost a snadnou údržbu. Naučte se sami vyměnit těsnění podle našeho návodu a prodlužte životnost i spolehlivost čerpadla bez nutnosti servisu.
Watrex Praha
tag
share
more
Česká chromatografická škola - HPLC.cz 2025 - Den 4
Článek | Nejbližší akce

Česká chromatografická škola - HPLC.cz 2025 - Den 4

Středeční program se zaměřil na HILIC – od principů po praktické využití ve farmacii a bioanalýze. Nechyběla inspirace z HPLC, LC-MS ani inovativní přístup Repetto LC.
Česká chromatografická škola - HPLC.cz
tag
share
more
Další projekty
GCMS
ICPMS
Sledujte nás
Další informace
WebinářeO násKontaktujte násPodmínky užití
LabRulez s.r.o. Všechna práva vyhrazena. Obsah dostupný pod licencí CC BY-SA 4.0 Uveďte původ-Zachovejte licenci.