Náš tým produktových a aplikačních specialistů pro Vás na 25. ročníku školy hmotnostní spektrometie připravil:<ul><li>Stánek s novinkami nebo ochutnávkou tradičních japonských whisky</li><li>Jako generální sponzor úterní taneční večer s DJem</li><li>Úterní odbornou přednáškou od kolegů z SHIMADZU Velká Británie&nbsp;</li></ul><h4>Název přednášky: Supercritical Fluid Chromatography coupled with Mass Spectrometry – A viable alternative to traditional LCMS?</h4><ul><li>Úterý 18:05 - 18:35</li><li>Přednášející: Richard Hodgson, Ph.D.</li><li>Pharmaceutical Market Specialist, SHIMADZU UK Limited</li></ul><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Richard_Hodgson_Pharmaceutical_Market_Specialist_SHIMADZU_UK_Limited_68b0cb9d6f.jpg" alt="Shimadzu: Dr Richard Hodgson (Pharmaceutical Market Specialist, SHIMADZU UK Limited)" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Richard_Hodgson_Pharmaceutical_Market_Specialist_SHIMADZU_UK_Limited_68b0cb9d6f.jpg 245w," sizes="100vw" width="800" height="429"><h3>Příručky a webináře Shimadzu o základech SFC</h3><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/65237_tn_sfc_infographic_a417cd5f28.pdf">Rewriting the Book on Supercritical Fluid Chromatography</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/c190_e270_7005c31609/c190-e270.pdf">SFC Basic Guide</a></li></ul><h3>Nejnovější literatura Shimadzu pro spojení SFC s LC/MS v knihovně LabRulezLCMS</h3><ul><li>On-line extraction and determination of targeted carotenoids from habanero red (Capsicum Chinese) (Aplikace | 2024 | Příprava vzorků, LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC)</li><li>Determination of heterocyclic oxygen compounds in Citrus essential oils by Supercritical fluid chromatography-tandem mass spectrometry (Aplikace | 2023 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC)</li><li>Multiple Analytical Techniques For Carotenoid Analysis In Capsicum Cultivars (Technické články | 2023 | Příprava vzorků, HPLC, LC/TOF, LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC, LC/IT)</li><li>Characterization of 16 Capsicum Varieties by Evaluation of Their Carotenoid Profle by SFE-SFC-MS/MS (Aplikace | 2022 | Příprava vzorků, LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC)</li><li>Method development and Identification of Triacylglycerols species with Supercritical Fluid Chromatography and Method Scouting Software (Postery | 2022 | (AOAC) | Software, LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC)</li><li>Fast Analysis of Ciclesonide Inhalant by Online SFE-SFC-QTOFMS (Aplikace | 2022 | Příprava vzorků, LC/TOF, LC/HRMS, LC/MS, LC/MS/MS, SFC)</li><li>Characterization of 17 Capsicum varieties by evaluation of their apocarotenoid profile by Nexera UC (Aplikace | 2022 | Příprava vzorků, LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC)</li><li>Method Development and Identification of Triacylglycerols Species with Supercritical Fluid Chromatography and Method Scouting Software (Aplikace | 2022 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC)</li><li>Chiral Separation of Triacyclglycerols Isomers by Supercritical Fluid Chromatography (Aplikace | 2022 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC)</li><li>An evaluation of rapid method for simultaneous analysis of ciclesonide and its impurities in an inhaler using online SFE-SFC-QTOFMS (Postery | 2021 | (ASMS) | Příprava vzorků, LC/TOF, LC/HRMS, LC/MS, LC/MS/MS, SFC)</li><li>Study of Effective Parameters for Separation of Isomers of Fluorescent Substance by Supercritical Fluid Chromatography (Aplikace | 2021 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC)</li><li>Analytical Instruments Solutions for Seized Drugs (Brožury a specifikace | 2020 | GC, GC/MSD, HPLC, LC/MS, SFC, LC/SQ)</li><li>Ensure consumer safety - SFC-MS/MS solution for pesticide analysis (Brožury a specifikace | 2020 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC)</li><li>Shimadzu Journal vol.8 Issue1 (Ostatní | 2020 | GC/MSD, GC/MS/MS, GC/QQQ, HPLC, LC/TOF, LC/HRMS, LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC, PrepLC)</li><li>Solutions for Flexible Work Styles LCMS Food Safety Applications (Příručky | 2020 | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC)</li><li>Analytical Solutions for Food Safety – a Closer Look in the Analytical Toolbox (Postery | 2020 | (AOAC) | LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC)</li></ul>

Program Shimadzu na 25. Škole hmotnostní spektrometie

Víctor Cutillas a tým analytických chemiků na univerzitě v Almeríi ve Španělsku používali k <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?categoryItems=2&amp;mainauthorItems=1&amp;search=pesticides">analýze reziduí pesticidů v ovoci a zelenině</a> konvenční standardní metodu. V časovém zájmu tým používal také sekundární, „záložní“ metodu. V průběhu práce si však tým uvědomil, jak dobře funguje sekundární metoda. Byla snad ještě výkonnější než primární metoda? Víctor Cutillas se rozhodl, že na tuto otázku musí znát odpověď. Pustil se tedy do srovnávacího výzkumu obou systémů.Víctor Cutillas analyzuje rezidua pesticidů v Referenční laboratoři EU pro rezidua pesticidů v ovoci a zelenině (EURL-FV) na univerzitě v Almeríi ve Španělsku. Analýza reziduí pesticidů má zásadní význam pro zajištění bezpečnosti potravin a dodržování právních předpisů a laboratoř EURL-FV hraje klíčovou roli při zajišťování bezpečnosti spotřebitelů tím, že zlepšuje kvalitu, přesnost a srovnatelnost výsledků testů bezpečnosti potravin.Nejčastěji používanou metodou při analýze reziduí pesticidů je kapalinová chromatografie s reverzní fází v kombinaci s <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?categoryItems=2&amp;instrumentationItems=31-32&amp;mainauthorItems=1&amp;search=pesticides">tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC-MS/MS)</a>. Důvodem je její robustnost a široká použitelnost pro semipolární a některé termolabilní pesticidy. Nicméně <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?categoryItems=2&amp;instrumentationItems=38&amp;mainauthorItems=1&amp;search=pesticides">superkritická fluidní chromatografie (SFC)</a> - široce používaná v oblastech, jako je farmaceutický sektor - se příležitostně používá i při analýze reziduí pesticidů, a to díky svým výhodám, např. v oblasti ionizace.<blockquote>Použitá konfigurace<ul><li>Jediný kombinovaný chromatografický systém: <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/930">Nexera UC</a></li><li>Čerpadlo CO2</li><li>Regulátor protitlaku</li><li>Hmotnostní spektrometr s trojitým kvadrupólem: <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/134">LCMS-8060</a></li><li>Iontový zdroj: ESI</li></ul></blockquote><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Victor_Cutillas_European_Union_Reference_Laboratory_for_Pesticide_Residues_in_Fruit_and_Vegetables_University_of_Almeria_6ca216607c.jpg" alt="Shimadzu: Víctor Cutillas (European Union Reference Laboratory for Pesticide Residues in Fruit &amp; Vegetables, University of Almería)" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Victor_Cutillas_European_Union_Reference_Laboratory_for_Pesticide_Residues_in_Fruit_and_Vegetables_University_of_Almeria_6ca216607c.jpg 156w," sizes="100vw" width="1024" height="1024">Jednoho dne se Víctor a tým EURL-FV velmi intenzivně věnovali analýzám, při nichž používali jak metody LC-MS/MS, tak SFC-MS/MS. Jak prováděli další a další vzorky, začali si všímat, že termolabilní sloučeniny, které obvykle v iontovém zdroji trpí, vykazují při použití SFC pozoruhodnou stabilitu. Kromě toho některé chemické skupiny vykazovaly při použití SFC mnohem lepší citlivost, než jakou kdy zaznamenali při použití LC. A přestože očekávali určité snížení matricových efektů při použití SFC, výsledky často předčily jejich očekávání - někdy dramaticky.<h5>Srovnání výkonnosti LC a SFC pro analýzu více složek pesticidů v potravinách</h5>Cutillas se rozhodl provést formální studii obou metod, protože ho zajímalo, zda byl potenciální přínos SFC pro jejich práci podceněn. Cílem studie bylo přímo porovnat výkonnost LC a SFC u 215 pesticidů v ovoci a zelenině za použití stejného hmotnostního spektrometru (<a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/930">Nexera UC</a> spojený s <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/134">LCMS-8060</a>, oba od společnosti Shimadzu). Zaměřila se na citlivost, matricové efekty a účinnost ionizace u různých vzorků potravin, včetně rajčat, póru, cibule a pomeranče.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Obrazek_1_Procento_identifikovanych_sloucenin_pri_trech_testovanych_teplotach_iontoveho_zdroje_215_pesticidu_bylo_hodnoceno_pomoci_LC_i_SFC_v_rozpoustedle_a_v_matricich_rajcat_cibule_poru_a_pomerance_17ad5ce702.jpg" alt="Shimadzu: Obrázek 1 - Procento identifikovaných sloučenin při třech testovaných teplotách iontového zdroje. 215 pesticidů bylo hodnoceno pomocí LC i SFC v rozpouštědle a v matricích rajčat, cibule, póru a pomeranče." srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Obrazek_1_Procento_identifikovanych_sloucenin_pri_trech_testovanych_teplotach_iontoveho_zdroje_215_pesticidu_bylo_hodnoceno_pomoci_LC_i_SFC_v_rozpoustedle_a_v_matricich_rajcat_cibule_poru_a_pomerance_17ad5ce702.jpg 245w," sizes="100vw" width="1978" height="871"><h5>Citlivost a teplota iontového zdroje</h5>Studie hodnotila optimální teploty rozhraní elektrosprejové ionizace (ESI) pro obě techniky, což je rozhodující pro dosažení nejvyšší citlivosti při detekci pesticidů. Tyto informace jsou shrnuty na obrázku 1. LC vykazovala mírně vyšší citlivost při teplotě 350 °C, přičemž při této teplotě bylo identifikováno 95 % pesticidů v čistém rozpouštědle a 92 % v matrici rajčat. Oproti tomu SFC vykazovala konzistentní výsledky v širším teplotním rozsahu, přičemž 99 % pesticidů bylo stanoveno v čistém rozpouštědle a 95 % v matrici rajčat i při nižších teplotách, jako je 200 °C a 125 °C.Ve složitých matricích, jako je pórek a cibule, byly rozdíly výraznější. V případě pórku LC identifikovala 80 % pesticidů při 350 °C, ale pouze 69 % při 125 °C. SFC si však zachovala vyšší míru identifikace 83-85 % při všech teplotách. Podobně u cibule LC určila 89 % pesticidů při 350 °C, ale při 125 °C klesla na 67 %, zatímco SFC identifikovala trvale 86-89 %. To naznačuje, že SFC může být univerzálnější při práci s různými teplotami iontových zdrojů, aniž by byla ohrožena citlivost, což nabízí významné výhody pro laboratoře, které se zabývají různými vzorky potravin.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Tabulka_1_Procento_215_pesticidu_ovlivnenych_ucinky_matrice_v_matricich_rajcat_poru_a_pomerance_pri_pouziti_LC_na_reverzni_fazi_a_SFC_b63905d0d3.jpg" alt="Shimadzu: Tabulka 1 - Procento 215 pesticidů ovlivněných účinky matrice v matricích rajčat, póru a pomeranče při použití LC na reverzní fázi a SFC" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Tabulka_1_Procento_215_pesticidu_ovlivnenych_ucinky_matrice_v_matricich_rajcat_poru_a_pomerance_pri_pouziti_LC_na_reverzni_fazi_a_SFC_b63905d0d3.jpg 245w," sizes="100vw" width="976" height="407"><h5>Citlivost chemické skupiny</h5>Různé chemické skupiny reagovaly na každou chromatografickou techniku jedinečně. Například mezi 70 sloučeninami vykazujícími vyšší citlivost při LC bylo 27 % organofosfátů. Karbamáty, deriváty močoviny a triaziny rovněž vykazovaly vysokou citlivost při LC, přičemž 10, 7 a 6 pesticidů vykazovalo o více než 50 % vyšší hodnoty plochy než SFC.Naopak mezi 77 sloučeninami vykazujícími vyšší citlivost při SFC bylo 22 % triazolů, jako je bromukonazol a cyprokonazol. Ostatní skupiny, jako jsou benzoylurey a neonikotinoidy, měly rovněž lepší výsledky v SFC. K této zvýšené citlivosti pravděpodobně přispěla nepolární povaha superkritického CO2 používaného při SFC spolu s jeho jedinečným mechanismem eluce. Průměrné hodnoty logPow byly u obou technik podobné, což naznačuje, že samotná polarita neurčuje nejlepší techniku pro jednotlivé pesticidy. Tato nuance pomáhá laboratořím vybrat nejvhodnější techniku na základě chemické povahy analytů, s nimiž se setkávají.<h5>Vliv matrice a potlačení iontů</h5>Účinky matrice mohou významně ovlivnit přesnost a spolehlivost analýzy reziduí pesticidů. Studie odhalila, že SFC má nižší stupeň potlačení iontů než LC, zejména ve složitých matricích, jako je pór, cibule a pomeranč. Například v póru mělo pouze 5 % pesticidů v LC nízké nebo žádné matricové efekty (0-20 %), zatímco 28 % pesticidů v SFC spadalo do této kategorie. U cibule byly výsledky podobné, 11 % pesticidů analyzovaných LC vykazovalo nízké matricové účinky ve srovnání s 29 % u SFC.U pomerančové matrice byl rozdíl ještě markantnější. Pouze 7 % pesticidů analyzovaných pomocí LC mělo nízké matricové účinky ve srovnání s 53 % u SFC. Tato zjištění mají zásadní význam, protože ukazují, že SFC je účinnější při snižování potlačení iontů způsobeného koextrahovanými složkami matrice. To lze přičíst účinnosti rozprašování a odběru vzorků při SFC, která minimalizuje koeluci se složkami matrice. Kromě toho hrají zásadní roli rozdílné eluční profily SFC a LC, přičemž jedinečný mechanismus SFC snižuje překrývání mezi analyty a interferujícími látkami, čímž zvyšuje citlivost a přesnost identifikace (obrázek 2).Cutillasova srovnávací studie odhalila, že ačkoli LC i SFC mají své přednosti, SFC nabízí výrazné výhody při analýze složitých potravinových matric s vysokým obsahem koextraktů. Její schopnost zachovat citlivost při nižších teplotách iontového zdroje ji činí obzvláště vhodnou pro termolabilní sloučeniny. Rutinní laboratoře mohou mít prospěch ze začlenění SFC do svých pracovních postupů pro lepší analýzu reziduí pesticidů. Při volbě mezi LC a SFC je třeba zvážit konkrétní potřeby laboratoře, včetně typů analyzovaných pesticidů a složitosti příslušných potravinových matric. Díky své konzistentní vysoké citlivosti při různých teplotách a nižšímu vlivu matrice představuje SFC robustní a univerzální alternativu pro moderní analýzu reziduí pesticidů.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Obrazek_2_Chromatogramy_celkovych_iontu_TIC_oranzove_matrice_se_prekryvaji_s_chromatogramy_multirezidualnich_metod_na_urovni_koncentrace_5_mg_kg_0c768e5170.jpg" alt="Shimadzu: Obrázek 2 - Chromatogramy celkových iontů (TIC) oranžové matrice se překrývají s chromatogramy multireziduálních metod na úrovni koncentrace 5 μg/kg" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Obrazek_2_Chromatogramy_celkovych_iontu_TIC_oranzove_matrice_se_prekryvaji_s_chromatogramy_multirezidualnich_metod_na_urovni_koncentrace_5_mg_kg_0c768e5170.jpg 245w," sizes="100vw" width="2169" height="783">Cutillas také poznamenává, že SFC je udržitelnější metoda analýzy, protože produkuje méně odpadu. CO2, který používá, je recyklovatelný, zatímco LC je závislá na větším množství organických rozpouštědel. Navíc díky použití zařízení, jako je <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/930">Nexera UC</a>, mohou laboratoře provozovat obě metody na stejné platformě bez dalšího hardwaru.Znalosti jsou složitý konstrukt a někdy to, co si myslíme, že „víme“, je pouze maskou naší nevědomosti. V tomto případě se to, co bylo považováno za zálohu, změnilo v průlom. Skutečné znalosti tu celou dobu ležely a čekaly, až si jich všimne zvědavý vědec. A nyní se díky Víctoru Cutillasovi a týmu z EURL-FV ve Španělsku objevil účinnější, citlivější a udržitelnější způsob zajištění bezpečnosti potravin. Výsledkem je pokrok: pro laboratoře, pro vědu i pro lidstvo.

Odhalení skrytého potenciálu (SFC)

Toto video jsme vytvořili jako úvod pro techniku HPLC. Má poskytnout první představu o tom, co je to „vysokoúčinná kapalinová chromatografie“ (HPLC) a jaké jsou její možné aplikace. HPLC je definována jako „laboratorní technika separace směsi, při níž kapalná mobilní fáze přenáší analyt přes kolonu držící stacionární fázi“. To - podle mě - nechává některé otázky otevřené, např. jaká směs, jaký analyt, co je mobilní fáze, kolona, stacionární fáze?Na úvod se naučme několik základních pojmů:<ul><li>Analyt: Například jídlo a pití nebo jakýkoli druh léku - Směs jednotlivých složek, které je třeba oddělit a jednotlivě změřit.</li><li>Kolona (neboli separační kolona) je klíčový spotřební materiál při chromatografických separacích. LC kolonu lze popsat jako trubku - většinou vyrobenou z nerezové oceli, která drží „stacionární fázi“ mezi dvěma kovovými fritami a koncovkami, které umožňují instalaci v systému HPLC.</li><li>Mobilní fáze: Mobilní fáze v HPLC je kapalina, která přenáší analyt přes separační kolonu.</li><li>Stacionární fáze: Chemická vazba na malé částice, které vyplňují tělo kolony. Stacionární fáze je místem, kde dochází k separaci na základě rozdílných tendencí sloučenin k interakci s ní, což vede k rozdílné rychlosti pohybu kolonou a způsobuje separaci látek.</li></ul><figure class="image"><img style="aspect-ratio:606/107;" src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Getting_started_Figure_1_Typical_set_up_of_HPLC_instrumentation_84c8fdb370.jpg" alt="Shimadzu/Gesa Schad: Shimadzu HPLC Blog: Začínáme - Obrázek 1 Typické uspořádání HPLC instrumentace" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Getting_started_Figure_1_Typical_set_up_of_HPLC_instrumentation_84c8fdb370.jpg 245w," sizes="100vw" width="606" height="107"></figure>Jakmile se analyt nesený mobilní fází oddělí v koloně se stacionární fází, vhodný detektor rozpozná analyt vystupující z kolony a vytvoří signálový pík v grafu zvaném chromatogram.Typické schéma systému HPLC a jeho jednotlivých složek je vidět na obrázku 1, zatímco obrázek 2 znázorňuje proces separace na koloně naplněné stacionární fází.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Getting_started_Figure_2_Schematic_representation_of_a_liquid_chromatographic_separation_of_two_compounds_f817ccdf48.jpg" alt="Shimadzu/Gesa Schad: Shimadzu HPLC Blog: Začínáme - Obrázek 2 Schematické znázornění separace dvou sloučenin pomocí kapalinové chromatografie" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Getting_started_Figure_2_Schematic_representation_of_a_liquid_chromatographic_separation_of_two_compounds_f817ccdf48.jpg 245w," sizes="100vw" width="1488" height="943">Jako příklad aplikace kapalinové chromatografie uveďme <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=1&amp;search=beverages">nápoje</a>. Nápoje (např. voda, džus, nealkoholický nápoj, káva, pivo, víno) obsahují vodu, cukr, vitamíny, kofein, alkohol a další složky - žádoucí i nežádoucí. Ty nežádoucí se nazývají kontaminanty, které mohou být škodlivé.Jednou z nejčastějších aplikací HPLC je zajištění kvality výrobků - tedy bezpečnosti spotřebitelů. Aby bylo možné určit přesné množství každé jednotlivé složky - ať už jde o vitamin, cukr nebo pesticid - je třeba je od sebe oddělit a po oddělení HPLC usnadňuje identifikaci a kvantifikaci každé jednotlivé složky, aby bylo zajištěno správné složení složek, nepřítomnost nežádoucí kontaminace a kvalita výrobku.Chceme vědět, co v něm je, a v ideálním případě také, kolik toho je přítomno. Cílem je separace a termínem pro měření separace v chromatografii je rozlišení. Rozlišení je důležité a bude tématem dalšího článku.&nbsp;<blockquote><h5>Edukativní HPLC a LC/MS webinaře Shimadzu</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/2299">Introducing Shimadzu's Analytical Intelligence in AQbD Method Development</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/4568">Chromatography Unleashed: Elevate Your Chiral and Achiral Separations</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/547">Shimadzu's LC Method Development (RP) Series - Session 1: Method Screening</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/2495">MALDI-Imaging For All: A Researcher’s Guide</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/3378">Analytical Technologies for COVID-19 Challenges: Drug Repurposing | Vaccine Research | PPE &amp; Material Testing | Environmental Monitoring</a></li></ul></blockquote><h4>Výběr literatury Shimadzu se zaměřením na základy a principy HPLC a LC/MS <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=1&amp;search=basics+fundumentals">v knihovně LabRulezLCMS</a></h4><ul><li>Back to Basics - Explaining Resolution (Technické články | 2020)</li><li>Back to Basics - Gradient Retention Factor, K* (Technické články | 2020)</li><li>Back to Basics - Dispersion - Protocols for LC Instruments (Technické články | 2020)</li><li>RF-20A Fluorescence Detector Basics and Applications (Technické články | 2010)</li><li>Back to Basics - Gradient Anatomy - Protocols for LC Instruments (Technické články | 2020)</li><li>The Very Basics of IMAGEREVEAL MS - With differential analysis as an example (Prezentace)&nbsp;</li><li>Back to Basics - Pump Linearity and Dwell Volume Measurements - Protocols for LC Instruments (Technické články | 2020)</li><li>Improving the Yield of Basic Amino Acids in a Protein Sequencer (Aplikace | 2023)</li><li>SFC Basic Guide - Shimadzu Supercritical Fluid Chromatograph (Příručky | 2021)</li><li>Rewriting the Book on Supercritical Fluid Chromatography (Technické články | 2024)</li></ul>

Shimadzu HPLC Blog: Začínáme

Dnes si povíme něco o rozlišení (R). Přesná identifikace a kvantifikace jednotlivých sloučenin je možná pouze tehdy, když příslušné píky v chromatogramu vystupují z kolony s určitým odstupem. Tento prostor mezi píky se nazývá rozlišení. Cílem chromatografické separace je odpovídající rozlišení složek, které nás zajímají, v přiměřeném časovém rámci.Rs lze vypočítat s přihlédnutím k rozdílům v retenci a šířce elučních píků. Čím větší je rozdíl v retenčním čase (tR) a čím menší je šířka píku, tím širší je rozlišení. Tenké píky budou obecně lépe rozlišeny od sousedních píků než široké pásy, jak je znázorněno na obrázku 1.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Zakladni_teorie_Obrazek_1_Znazorneni_vlivu_retence_a_sirky_piku_na_rozliseni_e4a240b0d1.jpg" alt="Shimadzu/Gesa Schad: Shimadzu HPLC Blog: Základní teorie - Obrázek 1 Znázornění vlivu retence a šířky píku na rozlišení" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Zakladni_teorie_Obrazek_1_Znazorneni_vlivu_retence_a_sirky_piku_na_rozliseni_e4a240b0d1.jpg 245w," sizes="100vw" width="2698" height="1409">Než však budeme pokračovat, je dobré seznámit se s několika základními pojmy, se kterými se budeme setkávat i později:<ul><li>Základní linie: Čára, která je vidět na chromatogramu, když není detekována žádná sloučenina - základní linie odráží nulový signál.</li><li>Separace na základní linii: Graf se vrací k nule, dotýká se základní linie, než vystoupá k dalšímu maximu píku.</li><li>Chromatogram: Vizuální výstup separačního systému - různé píky na chromatogramu odpovídají různým složkám separované směsi (obrázek 2).</li><li>Eluce: proces migrace sloučeniny přes kolonu nesenou mobilní fází.</li><li>Retenční čas (tR): Doba, za kterou určitý analyt projde systémem za stanovených podmínek. Nazývá se retenční, protože stacionární fáze sloučeninu zadržuje.</li><li>Rozlišení (Rs): Měřítko separace dvou píků v chromatogramu - na základě rozdílů v retenci a šířce píku.</li></ul>Existují různé způsoby výpočtu rozlišení - žádným z nich se zatím nebudeme zabývat. O způsobu dosažení rozlišení a vzorcích pro jeho výpočet budeme hovořit, až se dostaneme k vývoji a optimalizaci metody. Jedním ze základních požadavků na cestě k separaci je však to, aby sloučeniny, které nás zajímají, vykazovaly retenci na stacionární fázi. Pokud analyt neinteraguje se stacionární fází kolony, pak celý vzorek projde kolonou a všechny jeho složky dopadnou na detektor současně, tudíž nedojde k separaci. Prvním důležitým krokem je tedy nastavení systému, ve kterém se budou sloučeniny na koloně zadržovat. Existují různé mechanismy, které nabízejí retenci pro různé vzorky, které představíme jako další téma. Dnes se ještě jednou podíváme na chromatogram, protože je důležité pochopit vizuální výstup - výsledek naší LC separace.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Zakladni_teorie_Obrazek_2_Ukazka_HPLC_chromatogramu_68911ed8d4.jpg" alt="Shimadzu/Gesa Schad: Shimadzu HPLC Blog: Základní teorie - Obrázek 2 Ukázka HPLC chromatogramu" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Zakladni_teorie_Obrazek_2_Ukazka_HPLC_chromatogramu_68911ed8d4.jpg 245w," sizes="100vw" width="4103" height="2475">Chromatogram je dvourozměrný graf, kde osa Y představuje intenzitu signálu detektoru a osa X čas analýzy. Odezva detektoru se vztahuje ke koncentraci cílové sloučeniny v elučním píku.tR - neboli retenční čas - označuje časový interval mezi nadávkováním vzorku a vrcholem jeho píku. Na druhé straně doba, kterou potřebuje nezadržená látka k cestě přes kolonu k detektoru, se nazývá mrtvý čas a vyjadřuje se jako t0. Pouze pokud je tR větší než t0, znamená to, že pík vykazuje známky interakce se stacionární fází. Pokud sloučeniny eluují při t0, je třeba separační systém upravit tak, aby se zvýšila retence. Obecně platí, že za stejných podmínek bude analyt vždy vykazovat stejný retenční čas, a proto lze tR použít k identifikaci píku.Podívejme se na příklad (obrázek 3): Standardní roztok kofeinu je analyzován pomocí HPLC, výsledkem je jeden pík sloučeniny v čase pět minut. V následném experimentu je stejným způsobem analyzován zředěný vzorek čaje, jehož výsledkem je chromatogram s několika píky. Mezi těmito signály je jeden eluující v retenčním čase přibližně 5 min, stejném jako u standardu kofeinu. Tento pík lze považovat za kofein, identifikovaný na základě LC retence. Dále lze plochu pod křivkou píku použít k výpočtu koncentrace cílové sloučeniny.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Gesa_Schad_Product_Manager_at_Shimadzu_Europa_Gmb_H_My_LC_Blog_Zakladni_teorie_b357bf75f0.jpg" alt="Shimadzu/Gesa Schad: Shimadzu HPLC Blog: Základní teorie - Obrázek 3 Srovnání chromatogramu standardu kofeinu a vzorku zředěného čaje s vyznačeným píkem kofeinu" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Gesa_Schad_Product_Manager_at_Shimadzu_Europa_Gmb_H_My_LC_Blog_Zakladni_teorie_b357bf75f0.jpg 245w," sizes="100vw" width="2079" height="1107">V dalším díle našeho Shimadzu HPLC blogu se můžete těšit na příklady různých separačních režimů v HPLC.<blockquote><h5>Edukativní HPLC a LC/MS webinaře Shimadzu</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/2299">Introducing Shimadzu's Analytical Intelligence in AQbD Method Development</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/4568">Chromatography Unleashed: Elevate Your Chiral and Achiral Separations</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/547">Shimadzu's LC Method Development (RP) Series - Session 1: Method Screening</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/2495">MALDI-Imaging For All: A Researcher’s Guide</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/3378">Analytical Technologies for COVID-19 Challenges: Drug Repurposing | Vaccine Research | PPE &amp; Material Testing | Environmental Monitoring</a></li></ul></blockquote><h4>Výběr literatury Shimadzu se zaměřením na základy a principy HPLC a LC/MS <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=1&amp;search=basics+fundumentals">v knihovně LabRulezLCMS</a></h4><ul><li>Back to Basics - Explaining Resolution (Technické články | 2020)</li><li>Back to Basics - Gradient Retention Factor, K* (Technické články | 2020)</li><li>Back to Basics - Dispersion - Protocols for LC Instruments (Technické články | 2020)</li><li>RF-20A Fluorescence Detector Basics and Applications (Technické články | 2010)</li><li>Back to Basics - Gradient Anatomy - Protocols for LC Instruments (Technické články | 2020)</li><li>The Very Basics of IMAGEREVEAL MS - With differential analysis as an example (Prezentace)&nbsp;</li><li>Back to Basics - Pump Linearity and Dwell Volume Measurements - Protocols for LC Instruments (Technické články | 2020)</li><li>Improving the Yield of Basic Amino Acids in a Protein Sequencer (Aplikace | 2023)</li><li>SFC Basic Guide - Shimadzu Supercritical Fluid Chromatograph (Příručky | 2021)</li><li>Rewriting the Book on Supercritical Fluid Chromatography (Technické články | 2024)</li></ul>

Shimadzu HPLC Blog: Základní teorie

Navážeme na minulý díl (Shimadzu HPLC Blog: Základní teorie) a probereme, jak dosáhnout retence cílových sloučenin ve stacionární fázi. Rozhodujícími parametry, které je třeba zvážit, jsou kombinace mobilní fáze a stacionární fáze. Sloučeniny, které se raději zdržují v mobilní fázi, budou kolonou postupovat rychleji než ty, které budou pravděpodobně silně interagovat se stacionární fází. Pouze sloučeniny, které vykazují určitou přitažlivost ke zvolené separační koloně, v ní budou zadrženy.&nbsp;Pro začátek je třeba mít představu o chemických vlastnostech daného vzorku a podle toho zvolit vhodný separační systém. Různá uspořádání LC systému jsou znázorněny v tabulce 1.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Separacni_mody_Tabulka_1_Zakladni_separacni_mody_v_HPLC_5b539aef78.jpg" alt="Shimadzu/Gesa Schad: Shimadzu HPLC Blog: Separační módy - Tabulka 1 Základní separační módy v HPLC" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Separacni_mody_Tabulka_1_Zakladni_separacni_mody_v_HPLC_5b539aef78.jpg 245w," sizes="100vw" width="1600" height="648">V praxi se naprostá většina aplikací HPLC provádí v režimu reverzní fáze s použitím kolony C18 - což bude podrobněji vysvětleno v dalším článku - ale i ostatní jsou neméně důležité a neměly by zůstat nezmíněny. Pro lepší pochopení budou v následujícím textu vysvětleny některé pojmy podrobněji.<h3>Chromatografie na Normální fázi</h3><ul><li>Literatura Shimadzu zaměřená na <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=27&amp;mainauthorItems=1">HPLC v knihovně LabRulezLCMS</a></li></ul>V režimu kapalinové chromatografie "na normální fázi" se používá polární stacionární fáze a mobilní fáze s nízkou polaritou pro separaci nízko až středně polárních sloučenin, které se snadno rozpouštějí v organických rozpouštědlech (tj. vzorků, které jsou nerozpustné ve vodných roztocích). Separace je založena na rozdílech v polaritě, zatímco pro analýzu sloučenin s malými rozdíly v hydrofobicitě je nevhodná. Typickými stacionárními fázemi používanými v LC na normální fázi jsou např. oxid křemičitý nebo fáze s malými polárními funkčními skupinami, jako jsou amino, diol nebo kyano vázané na povrch oxidu křemičitého. Mobilními fázemi jsou nepolární rozpouštědla, např. n-hexan nebo ethylacetát. Grafické znázornění retenčního chování v LC na normální fázi je znázorněno níže.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Separacni_mody_Obrazek_1_Retence_analytu_v_chromatografii_na_normalni_fazi_02aaf230ae.jpg" alt="Shimadzu/Gesa Schad: Shimadzu HPLC Blog: Separační módy - Obrázek 1 Retence analytu v chromatografii na normální fázi" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Separacni_mody_Obrazek_1_Retence_analytu_v_chromatografii_na_normalni_fazi_02aaf230ae.jpg 245w," sizes="100vw" width="1600" height="725"><ul><li>Polarita: Fyzikální vlastnost sloučeniny, která určuje stupeň interakce s mobilní a stacionární fází při separaci na normální a reverzní fázi HPLC.</li><li>Polární sloučenina: nebo-li „hydrofilní“, což v překladu znamená „s afinitou k vodě“ nebo „milující vodu“. Zjednodušeně řečeno - polární sloučenina se rozpouští ve vodě a silně interaguje s polární stacionární fází.</li><li>Nepolární sloučenina: nebo-li „hydrofobní“ je jinými slovy „odpuzující vodu“ nebo „nesnášející vodu“, jako například olej. Nepolární sloučeniny se ve vodě nerozpouštějí a přilnou k nepolárním stacionárním fázím.</li></ul><h3>Iontová chromatografie (IC)</h3><ul><li>Literatura Shimadzu zaměřená na <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=28&amp;mainauthorItems=1">Iontovou chromatografii v knihovně LabRulezLCMS</a></li></ul>Jinými slovy „iontově výměnná chromatografie“ (IEC) je určena ke stanovení látek nesoucích náboj, ať už anorganických nebo organických iontů. Příkladem mohou být peptidy, proteiny, organické kyseliny nebo protonované báze. Iontově výměnná stacionární fáze se skládá z iontových skupin, které jsou vázány na nosič, zatímco mobilní fází je obvykle vodný pufrový systém s upraveným pH. Retence je řízena pH a iontovou silou mobilní fáze. K separaci dochází prostřednictvím výměnných rovnováh mezi analyty v roztoku a ionty eluentu, které interagují s nabitým povrchem stacionární fáze. Obrázek 2 ukazuje schéma tohoto mechanismu pro aniontové (záporně nabité) sloučeniny. Vyšší koncentrace iontů v mobilní fázi má za následek rychlejší eluci rozpuštěného iontu prostřednictvím konkurence.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Separacni_mody_Obrazek_2_Retencni_mechanismus_v_iontove_chromatografii_364dbf919f.jpg" alt="Shimadzu/Gesa Schad: Shimadzu HPLC Blog: Separační módy - Obrázek 2 Retenční mechanismus v iontové chromatografii" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Separacni_mody_Obrazek_2_Retencni_mechanismus_v_iontove_chromatografii_364dbf919f.jpg 245w," sizes="100vw" width="1600" height="428"><ul><li>pH: míra kyselosti nebo zásaditosti vodného roztoku. Stupnice se pohybuje od 1 (kyselý) do 14 (zásaditý). Změny pH ovlivňují chromatografickou retenci.</li><li>Pufr: Roztoky pufru - tedy vodné roztoky slabé kyseliny a její soli (např. kyselina mravenčí + mravenčanový iont) jsou běžně používané mobilní fáze, protože mohou odolávat změnám pH při přidání malého množství kyselin nebo zásad, což vede ke stabilním LC podmínkám.</li><li>Iontová síla: Koncentrace iontů v roztoku, přičemž ion znamená kladně nebo záporně nabitý atom nebo molekulu.</li></ul><h3>Vylučovací chromatografie (SEC)</h3><ul><li>Literatura Shimadzu zaměřená na <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=42&amp;mainauthorItems=1">GPC/SEC v knihovně LabRulezLCMS</a></li></ul>SEC se používá pro vzorky, které obsahují vysokomolekulární sloučeniny a jejichž složky se výrazně liší molekulovou velikostí. Lze ji například použít k separaci proteinů s různou velikostí, přičemž jako mobilní fáze se používají vodné pufry s téměř neutrálním pH, aby se zachovala biologická aktivita proteinů. Další typickou aplikací je stanovení distribuce molekulových hmotností polymerů, kde se typicky jedná o tzv. gelovou permeační chromatografii (GPC) - zde se jako eluent používají organická rozpouštědla při zvýšené teplotě, aby se polymery rozpustily. Retence je určena především velikostí pórů stacionární fáze, nikoliv vlastnostmi mobilní fáze. Molekuly malých rozměrů vstupují hluboko do pórů, což způsobuje, že se po koloně pohybují mnohem pomaleji než molekuly větších rozměrů, které se do pórů nevejdou (nebo jen částečně). Výsledkem je pořadí eluce z kolony podle velikosti, přičemž velké sloučeniny &nbsp;vycházejí z kolony jako první, zatímco malé molekuly jsou zadržovány déle. Vizualizace tohoto principu je na obrázku 3.<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Separacni_mody_Obrazek_3_Princip_separace_ve_vylucovaci_chromatografii_df8c2d56b1.jpg" alt="Shimadzu/Gesa Schad: Shimadzu HPLC Blog: Separační módy - Obrázek 3 Princip separace ve vylučovací chromatografii" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Gesa_Schad_Shimadzu_HPLC_Blog_Separacni_mody_Obrazek_3_Princip_separace_ve_vylucovaci_chromatografii_df8c2d56b1.jpg 245w," sizes="100vw" width="1369" height="426">Vzhledem k tomu, že chromatografie na reverzní fázi se používá v naprosté většině aplikací HPLC, bude jí věnován další příspěvek na blogu.<blockquote><h5>Edukativní HPLC a LC/MS webinaře Shimadzu</h5><ul><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/2299">Introducing Shimadzu's Analytical Intelligence in AQbD Method Development</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/4568">Chromatography Unleashed: Elevate Your Chiral and Achiral Separations</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/547">Shimadzu's LC Method Development (RP) Series - Session 1: Method Screening</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/2495">MALDI-Imaging For All: A Researcher’s Guide</a></li><li><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.labrulez.com/webinar/3378">Analytical Technologies for COVID-19 Challenges: Drug Repurposing | Vaccine Research | PPE &amp; Material Testing | Environmental Monitoring</a></li></ul></blockquote><h4>Výběr literatury Shimadzu se zaměřením na základy a principy HPLC a LC/MS <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=1&amp;search=basics+fundumentals">v knihovně LabRulezLCMS</a></h4><ul><li>Back to Basics - Explaining Resolution (Technické články | 2020)</li><li>Back to Basics - Gradient Retention Factor, K* (Technické články | 2020)</li><li>Back to Basics - Dispersion - Protocols for LC Instruments (Technické články | 2020)</li><li>RF-20A Fluorescence Detector Basics and Applications (Technické články | 2010)</li><li>Back to Basics - Gradient Anatomy - Protocols for LC Instruments (Technické články | 2020)</li><li>The Very Basics of IMAGEREVEAL MS - With differential analysis as an example (Prezentace)&nbsp;</li><li>Back to Basics - Pump Linearity and Dwell Volume Measurements - Protocols for LC Instruments (Technické články | 2020)</li><li>Improving the Yield of Basic Amino Acids in a Protein Sequencer (Aplikace | 2023)</li><li>SFC Basic Guide - Shimadzu Supercritical Fluid Chromatograph (Příručky | 2021)</li><li>Rewriting the Book on Supercritical Fluid Chromatography (Technické články | 2024)</li></ul>

Shimadzu HPLC Blog: Separační módy

<h4>Zastavte se na stánku Shimadzu</h4>👉 Přijďte za námi na stánek Shimadzu během 26. ročníku Školy hmotnostní spektrometrie!📍 Kdy a kde? 8.–12. září 2025, OREA Resort Devět SkalNa našem stánku:<ul><li>zjistíte novinky z portfolia Shimadzu,</li><li>můžete se přihlásit k odběru newsletteru Shimadzu Česká republika,</li><li>a získáte jako dárek víno z vinařství Zlomek &amp; Vávra.</li></ul><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Stanek_Shimadzu_na_24_Skole_hmotnostni_spektrometrie_2023_014d2b0732/Shimadzu-Stanek-Shimadzu-na-24.-Skole-hmotnostni-spektrometrie-2023.jpg" alt="Shimadzu: Stánek Shimadzu na 24. Škole hmotnostní spektrometrie 2023" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Stanek_Shimadzu_na_24_Skole_hmotnostni_spektrometrie_2023_014d2b0732/thumbnail_Shimadzu-Stanek-Shimadzu-na-24.-Skole-hmotnostni-spektrometrie-2023.jpg 245w," sizes="100vw" width="2016" height="1134"><h4>Přednáška Shimadzu</h4>Jsme hrdí, že naše pozvání přijal Dennis van Heuvel (produktový specialista LCMS, Shimadzu Benelux) s více než 20 lety zkušeností v oblasti hmotnostní spektrometrie.🎤 Přednáška: „Oxygen Attachment Dissociation for the Structural Characterization of Lipids Involved in Pancreatic Cancer“📅Datum: pondělí 8. 9. v 17:15<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_prednaska_Dennis_Van_den_Heuvel_1600x900_0a61a5e82c.jpg" alt="Shimadzu: přednáška Dennis Van den Heuvel" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_prednaska_Dennis_Van_den_Heuvel_1600x900_0a61a5e82c.jpg 245w," sizes="100vw" width="1600" height="900"><h4>Abstrakt přednášky "Oxygen Attachment Dissociation for the Structural Characterization of Lipids Involved in Pancreatic Cancer"</h4>D. Vandenheuvel1, E. Armitage2, E. Correa3, S. Takeda4, W. Chung5, N. J. Loftus1Shimadzu Benelux B.V., 's-Hertogenbosch, Netherlands, 2Shimadzu Corporation, Manchester, United Kingdom, 3Liverpool John Moores University, Liverpool, United Kingdom,4 Teikyo University School of Medicine, Department of Anatomy, Tokyo, Japan, 5Leicester HPB Unit, Glenfield Hospital, Leicester, United Kingdom<h5>Introduction</h5>Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is an aggressive cancer with one of the lowest survival rates due to late diagnosis and high resistance to treatment. To aid early detection, potential lipid biomarkers of PDAC have been identified in human serum using untargeted LCMS/ MS with collision induced dissociation (CID). Since the architecture of lipids is directly related to biochemical function, it is essential to structurally characterize lipids to understand their biological roles. Lipid class and chain length can be identified using CID, however alternative fragmentation is required to localize double bonds. In this study, Oxygen Attachment Dissociation (OAD) has been applied to provide C=C specific fragmentation to structurally characterize lipids significantly affected by PDAC.<h5>Material and Methods</h5>Healthy and PDAC patient serum extracts were analysed using LC-OAciD-MS/MS (<a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/846">LCMS-9050</a>, Shimadzu Corporation). The OAD Radical source I was used to introduce gas phase O/OH radicals into the collision cell to enable C=C specific fragmentation. Spectra were acquired with simultaneous OAD and CID-MS/MS (OAciD-MS/MS) in positive and negative ion mode. Data were analysed using MS-DIAL, which incorporates the OAD database for automated annotation of data acquired using OAciD-MS/MS. The research project was approved by the Pancreatic Cancer Research Fund Tissue Bank (PCRFTB) Access Committee in the United Kingdom.<h5>Results</h5>Untargeted LC-MS/MS analysis of serum samples from PDAC patients and healthy controls revealed significant alterations in lipids putatively identified as PC(18:1_18:2), PC(18:2_18:2), PC(18:2_20:4), LPC(18:2) and LPE(18:2). OAciD-MS/MS spectra revealed that all these potential lipid biomarkers of PDAC specifically contain omega-6 linoleic acid (18:2(n-6,9)).<h5>Conclusion</h5>The use of oxygen attachment dissociation aims to enhance pancreatic cancer research by providing more comprehensive identification needed to understand the biological roles of the lipids identified as potential markers of PDAC.<h4><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/988">Shimadzu OAD-TOF LCMS Q-TOF</a> hmotnostní spektrometr</h4><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_OAD_TOF_LCMS_Q_TOF_hmotnostni_spektrometr_1eb4eb1cc9/Shimadzu-OAD-TOF-LCMS-Q-TOF-hmotnostni-spektrometr.jpg" alt="Shimadzu: OAD-TOF LCMS Q-TOF hmotnostní spektrometr" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_OAD_TOF_LCMS_Q_TOF_hmotnostni_spektrometr_1eb4eb1cc9/thumbnail_Shimadzu-OAD-TOF-LCMS-Q-TOF-hmotnostni-spektrometr.jpg 167w," sizes="100vw" width="738" height="689"><h5>Klíčové vlastnosti</h5><ul><li>Inovativní fragmentace OAD (Oxygen Attachment Dissociation) – umožňuje cílené štěpení dvojných vazeb C=C pomocí neutrálních kyslíkových radikálů.</li><li>Snadné přepínání OAD ↔ CID – obě technologie dostupné v jednom systému, automatizované ovládání v softwaru <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/617">LabSolutions LCMS</a>.</li><li>Vysoká hmotnostní přesnost (±3 ppm) – stabilní dlouhodobé výsledky díky UF-FlightTube a iRefTOF technologii.</li><li>Flexibilita systému <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/846">LCMS-9050</a> – kompatibilní s doplňky jako DPiMS QT pro rychlou analýzu bez chromatografie nebo se <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products?category=45&amp;manufacturerItems=1">SFC systémem Nexera UC</a>.</li><li>Spolehlivý odhad struktury – nové MS/MS fragmenty, které nejsou dostupné pomocí konvenční CID.</li></ul><h5>Aplikace</h5><ul><li>Analýza lipidů – přesné určení polohy dvojných vazeb v triacylglycerolech, mastných kyselinách a dalších lipidech.</li><li>Studium organických sloučenin – poskytuje nové strukturní informace pro sloučeniny, kde CID nestačí.</li><li>Profilování izomerů – využití s Nexera UC (SFE/SFC) pro separaci a charakterizaci izomerních lipidů.</li><li>Rychlá přímá analýza vzorků – díky DPiMS QT bez potřeby chromatografické separace.</li><li>Potenciál pro biologické a průmyslové aplikace – nové možnosti v lipidomice, vývoji funkčních produktů i studiu biologických procesů.</li></ul><h4>Shimadzu jako sponzor Ceny Vladimíra Hanuše</h4>Shimadzu je pro letošní rok hrdým sponzorem Ceny Vladimíra Hanuše, jejíž vítěz bude vyhlášen během pondělního programu 26. ročníku Školy hmotnostní spektrometrie.Cena je udělována za nejlepší publikovanou práci v oboru hmotnostní spektrometrie a je věnována památce Vladimíra Hanuše, předního odborníka, který se zásadním způsobem zasloužil o rozvoj hmotnostní spektrometrie.<blockquote>Více o soutěži se můžete dočíst v tomto článku: <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/article/4976">Soutěž o Cenu Vladimíra Hanuše za rok 2025</a></blockquote><h4>SHIMADZU párty – Silent Disco</h4>Ani letos nebudeme chybět na společenském večeru! Ve středu pro vás chystáme Silent Disco – dva DJs a jen vy rozhodnete, komu dáte svou přízeň. 🎧<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Koncert_kapely_The_Cupcake_Collective_ze_Skoly_MS_2023_4e5f2c40de.jpg" alt="Shimadzu: Koncert kapely The Cupcake Collective ze Školy MS 2023" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Shimadzu_Koncert_kapely_The_Cupcake_Collective_ze_Skoly_MS_2023_4e5f2c40de.jpg 245w," sizes="100vw" width="1179" height="477"><blockquote>Podívejte, jak to vypadalo na minulých ročnících:<a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://gcms.cz/article/3149">Škola MS 2023 - Shimadzu tým</a></blockquote>Těšíme se na setkání s vámi!Tým Shimadzu Česká republika

Shimadzu na Škole hmotnostní spektrometrie 2025

Webináře

Aplikace

Akademie

Osobnosti

Plasty

Životní prostředí

Potraviny

Vody

Zdraví

Přednáška

Vědecký článek

Rozhovor

Toxikologie

Popularizace

Věda a výzkum

Software

Covid-19

Kariéra

Článek

Laboratoře

Různé

Produkt

Video

Poster

Nejbližší akce

Typ novinky

Zaměření

Naším posláním je šířit informace o produktech firmy Shimadzu v oblasti instrumentálních analytických přístrojů, přístrojů pro testování materiálů a speciálních přístrojů pro life science, jejich prodej a následně - instalace, zaškolení, záruční a pozáruční servis, ověřování a validace a aplikační podpora.

SHIMADZU Handels GmbH - organizační složka

Moderní elektroanalytické metody (Cena Metrohm 2026)

ALS Kurz Analýzou HYDRAULICKÝCH a TURBÍNOVÝCH olejů k větší efektivitě výroby

Praktický kurz ŠKOLA HPLC

Big Scale, Big Wins: Prep Chromatography Explained

High-throughput stability screening strategies for antibody formulation

PFAS in Food & Food Contact Material