Doporučené postupy pro používání HPLC systému Agilent - Čerpadla 1290 Infinity a 1290 Infinity II

V prvním díle série o postupech a doporučeních k práci s HPLC systémy Agilent Technologies jsme se blíže podívali na základní pravidla, práci s rozpouštědly, přípravou a úpravou vzorků před analýzou nebo jak HPLC systém propláchnout. Zdůraznili jsme pak denní a týdenní úkoly a co provést při zapnutí a vypnutí Vašeho kapalinového chromatografu.

Druhý díl byl tématicky zaměřen na odplyňovače a čerpadla, kde jsme věnovali prostor používaným rozpouštědlům a zaměřili se pak především na oplach těsnění HPLC čerpadel.

Jaké zásady dodžovat při používání autosamplerů a proč používat u HPLC čerpadel nebo autosamplerů in-line filtry se dozvíte v třetím díle.

Používání nejnovějšího spotřebního materiálu pro spojení Vašich HPLC kolon vám ušetří čas, ochrání samotné kolony a minimalizuji netěsnosti. Jaké jsou ty správné postupy pro kolony nebo HPLC detektory se dozvíte ve čtvrtém díle.

Pátý díl se blíže podíval na specifika používání Bio Inert a Bio kompatibilních systémů Agilent Technologies.

Další informace pro UHPLC čerpadla 1290 Infinity a 1290 Infinity II

Čerpadla Agilent 1290 Infinity a 1290 Infinity II jsou vybavena ventily pro automatický proplach. To umožňuje řadu dalších funkcí, jež nejsou k dispozici v čerpadlech Agilent s ventily pro manuální oplach.

Je tak možné pragramovat čerpadlo (nastavit parametry a spustit funkce Purge, Condition nebo Prime) pomocí příslušného softwaru.

Funkce Purge

Funkci Purge použijte pro:

• Naplňte systém novým nebo jiným rozpouštědlem

  • Nové rozpouštědlo musí být míchatelné s předchozím rozpouštědlem
  • Pokud je to nutné, zabraňte poškození odplynovače nebo čerpadla pomocí zařazení mezistupně v podobě společně mísitelným rozpouštědlem

• Odstraňte vzduchové bubliny z hadic a hlav pumpy

  • Po několikahodinové nebo dokonce ještě delší nečinnosti čerpadla se může do drah rozpouštědla dostat vzduch.

Jakmile skončí čištění (Purge), modul se automaticky přepne do analytického stavu.

Funkce Condition

Pokud v hlavě čerpadla zůstanou vzduchové mikrobubliny, může dojít ke snížení celkového výkonu čerpadla a může být negativně ovlivněna přesnost průtoku. To se může projevovat jako zvýšený tlak a/nebo zvlnění základního signálu detektoru. Spolehlivým indikátorem takové situace je silně negativní, ale pomalu se zvyšující hodnota signálu ladění (pod –1).

Pro účinné odstranění vzduchu můžete použít funkci Condition. Během kondicionace čerpadlo tlačí mobilní fázi do systému (kolona) a aplikována jsou naposledy použitá nastavení metod, například průtok, složení mobilní fáze a maximální tlak. Analýzu vzorku při tomto procesu provádět není možné.

Pro zajištění účinného odstranění vzduchových bublin ze všech hlav čerpadla používejte přiměřený průtok (například 1,5 mL/min), nastavení složení mobilní fáze (například A: 50 % B: 50 %) a protitlak (>200 bar).

Kondicionaci čerpadla proveďte v následujících případech:

• Nadměrné kolísání tlaku
• Nadměrné kolísání složení mobilní fáze (šum baseline/šum míchání – změny hladiny šumu podle složení mobilní fáze), když jste si jisti, že je typ rozpouštědla nastaven správně a není patrná žádná netěsnost.

Kondicionace může být nezbytná v následujících případech:

• Po dlouhém období pohotovostního režimu
• Po úplnem spotřebovánírozpouštědla
• Po servisu nebo opravě

VAROVÁNÍ Plnění prázdných průtokových cest rozpouštědla a poškození těsnění

• Pro doplnění prázdných cest rozpouštědla použijte stříkačku nebo funkci Purge
• Pro plnění prázdných drah pro rozpouštědla nepoužívejte funkci Prime

Funkce Prime

Funkce „Prime“ je užitečná, pokud do hlav čerpadla pronikl vzduch a nelze jej po dobu 15 minut odstranit kondiciováním. Modul čerpá rozpouštědlo ve vysoké rychlosti se všemi pohony čerpadla současně a pouští toto rozpouštědlo do odpadu pomocí automatického purge ventilu. Tento cyklus se provádí 20 krát a zatěžuje to ventil a těsnění rotoru. Proto by to mělo být provedeno pouze jako poslední možnost, před nuceným naplněním hlav čerpadla stříkačkou nebo pokusem o opravu hlav čerpadla.

Funkci Prime použijte na:

• Uvolnění potencionálně zablokovaného ventilu

Popisované funkce mohou být spuštěny pomocí ovládacího rozhraní:

• 1290 Infinity a 1290 Infinity II

HPST: Příprava čerpadla (Agilent 1290 Infinity)

1. Klikněte pravým tlačítkem na ovládací panel modulu
2. Zvolte příslušnou funkci pro spuštění postupu

Uživatelsky optimalizované kontextové menu pro přípravu čerpadla nahrazuje klasické menu:

• Čerpadla 1290 Infinity II

HPST: Příprava čerpadla (Agilent 1290 Infinity II)

1. Klikněte pravým tlačítkem na ovládací panel modulu
2. Zvolte Prepare Pump...
3. Zvolte postup a vyplňte příslušné parametry
4. Klikněte na Start a spusťte zvolený postup

Výběr literatury na téma řešení problémů a údržba HPLC systému Agilent v knihovně LabRulezLCMS

• Preventive and Routine Maintenance for Your HPLC System (Prezentace | 2022)

• Get Your LC Back Up and Running After the Shut Down (Příručky | 2020)

• HPLC Troubleshooting Fundamentals (Prezentace | 2021)

• Top 10 HPLC Method Development Fails (Prezentace | 2022)

• Don’t Lose It: Troubleshooting Separation Changes (Prezentace | 2020)

• From HPLC Instrument to Column - Tracking Down the HPLC Problem (Prezentace | 2022)

• The Chromatography Checklist (Prezentace | 2018)

• Surviving Chromatography - Part 1: Preventive Action (Prezentace | 2019)

• Surviving Chromatography - Part 2: Corrective Action (Prezentace | 2018)

• LC Troubleshooting Guide - Your guide to solving common problems and staying productive (Postery | 2019)

• HPLC Column Troubleshooting: Is It Really The Column? (Prezentace | 2010)

• The Chromatography Detective: Troubleshooting Tips & Tools for LC & LCMS (Prezentace | 2018)

• All About LC Connections –What to Do to Make A Great One - HPLC educational webinar: Becoming a better chromatographer (Prezentace | 2021)

• It’s Not All About the Column: The Role of the Mobile Phase and Your Instrument (Prezentace | 2021)

• Tips and Tricks of HPLC System Troubleshooting (Prezentace | 2005)

• Maximize Performance and Minimize Maintenance with Genuine Agilent LC Spares (Technické články | 2015)

• Hydrophilic Interaction Chromatography Method Development and Troubleshooting (Technické články | 2018)

• Why Did That Happen? (Prezentace | 2021)

• Around the LC System in 45 Slides (Prezentace | 2016)

• Taking the Trouble Out of TroubleshootingIs It the Column, Method, or Instrument (Prezentace | 2016)