Chtěli bychom se s vámi podělit o shrnutí 2. ročníku odborného edukačního semináře LCMS SHIMADZU na PřF UK](https://lcms.cz/events/435), který byl plný zajímavých diskuzí, praktických cvičení v laboratořích a užitečných informací.
Během třech dnů jsme se společně tématicky zaměřili na HPLC a LC/MS systémy na bázi kvadrupolů a probírali jsme klíčové koncepty, teorii a praxi v této oblasti. Prezentace kolegů z PřF UK byly plné cenných informací a věříme, že Vás inspirovaly i k hlubšímu zamyšlení nad principy a procesy v oblasti těchto analytických technik.
Diskuze a cvičení, které probíhaly během semináře, byly živé a plné zajímavých otázek a názorů a doufáme, že jste si odnesli nové poznatky a inspiraci, kterou budete moci využít ve své kařdodenní činnosti.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Uvod_do_HPLC_Petr_Kozlik_Pr_F_UK_2_4d7c7332df/Shimadzu-Uvod-do-HPLC-(Petr-Kozlik-PrF-UK)-2.jpg" alt="Shimadzu: Úvod do HPLC (Petr Kozlík, PřF UK)"/>
Pokud máte další otázky ohledně semináře, materiálů, dalších školení nebo kurzů, neváhejte nás kontaktovat.
Zároveň bychom Vás tímto velmi rádi již nyní pozvali na chystaný hardwarový seminář, který bude zaměřen na téma: základní uživatelská údržba a správná praxe s HPLC systémy. Bude se tedy jednat o více detailní a proktický seminář určený především SHIMADZU uživatelům.
Pokud o tento seminář již nyní jevíte zájem, neváhejte nám napsat a prozatím Vás nezávazně zapíšeme do našeho seznamu úřastníků. Plánovaný termín tohoto semináře je leden/únor 2024.
Děkujeme za váš zájem a těšíme se na další spolupráci a další podobné události.
Za celý Shimadzu tým,
Mgr. Ondrej Hillmich (Business specialist, ondrej.hillmich@shimadzu.eu.com , +420 734 246 627)
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Workshop_Petr_Kozlik_a_Tomas_Krizek_Pr_F_UK_2_17688673ee/Shimadzu-Workshop-(Petr-Kozlik-a-Tomas-Krizek-PrF-UK)-2.jpg" alt="Shimadzu: Workshop (Petr Kozlík a Tomáš Křížek, PřF UK)"/>
<h3>Co jste se mohli naučit v teoretické části?</h3>
<h4><a href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=27&amp;mainauthorItems=1&amp;search=fundamentals">Úvod do HPLC</a></h4>
<ul>
<li>Petr Kozlík (PřF UK)
</li>
<li>Chromatografie
<ul>
<li>MICHAIL SEMJOVIČ CVĚT</li>
<li>Arne Wilhelm Kaurin Tiselius</li>
<li>Archer John Porter Martin a Richard Laurence Millington Synge</li>
<li>Csaba Horváth</li>
</ul>
</li>
<li>Chromatogram
</li>
<li>Rozlišení píků
</li>
<li>Symetrie píků
</li>
<li>Teorie chromatografického patra
</li>
<li>Výškový ekvivalent teoretického patra
</li>
<li>Van Deemterova rovnice
</li>
<li>Mimokolonové příspěvky k rozšiřování zón
</li>
<li>HPLC vs. UHPLC
</li>
<li>Isokratická a gradientová eluce
</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Uvod_do_HPLC_Petr_Kozlik_Pr_F_UK_00f0cbc2e7/Shimadzu-Uvod-do-HPLC-(Petr-Kozlik-PrF-UK).jpg" alt="Shimadzu: Úvod do HPLC (Petr Kozlík, PřF UK)"/>
<h4>Separační systémy LC a stacionární fáze dostupné na trhu</h4>
<ul>
<li>Petr Kozlík (PřF UK)
</li>
<li>Systém s normálními fázemi (NP-HPLC)
</li>
<li>Systém s reverzními fázemi (RP-HPLC)
</li>
<li>Iontově výměnná chromatografie
</li>
<li>Iontově párová chromatografie
</li>
<li>Hydrofilní interakční kapalinová chromatografie ((HILIC))
</li>
<li>Hydrofóbní interakční kapalinová chromatografie
</li>
<li>Micelární kapalinová chromatografie
</li>
<li>Afinitní chromatografie
</li>
<li>Molekulová vylučovací chromatografie
</li>
<li>Chirální chromatografie
</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Separacni_systemy_LC_a_stacionarni_faze_dostupne_na_trhu_Petr_Kozlik_Pr_F_UK_848793f31e/Shimadzu-Separacni-systemy-LC-a-stacionarni-faze-dostupne-na-trhu-(Petr-Kozlik-PrF-UK).jpg" alt="Shimadzu - Separační systémy LC a stacionární fáze dostupné na trhu (Petr Kozlík, PřF UK).jpg"/>
<h4>Praktické aspekty HPLC a <a href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=27&amp;mainauthorItems=1&amp;search=method+development">vývoj HPLC metody</a></h4>
<ul>
<li>Petr Kozlík (PřF UK)
</li>
<li>Udržet HPLC systém v dobrém stavu
</li>
<li>Minimalizace finančních nákladu na opravu HPLC
</li>
<li>Ušetřit čas při řešení problému
</li>
<li>Porozumění činnosti HPLC
</li>
<li>Vývoj chromatografické metody
<ul>
<li>Definování cíle metody</li>
<li>Informace o vzorku</li>
<li>Výběr vhodného detektoru</li>
<li>Výběr LC metody</li>
<li>Prvotní experimenty se standardy</li>
<li>Reálné vzorky; úprava vzorku</li>
<li>Finální optimalizace a řešení problémů</li>
<li>Validace metody</li>
</ul>
</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Prakticke_aspekty_HPLC_a_vyvoj_HPLC_metody_Petr_Kozlik_Pr_F_UK_cdddc81db1/Shimadzu-Prakticke-aspekty-HPLC-a-vyvoj-HPLC-metody-(Petr-Kozlik-PrF-UK).jpg" alt="Shimadzu: Praktické aspekty HPLC a vývoj HPLC metody (Petr Kozlík, PřF UK)"/>
<h4><a href="https://lcms.cz/library?mainauthorItems=1&amp;search=troubleshooting">„Troubleshooting“</a> a trendy v HPLC</h4>
<ul>
<li>Petr Kozlík (PřF UK)
</li>
<li>Zvýšení účinnosti a selektivity separace
</li>
<li>Rychlá separace
</li>
<li>Zelená chemie
</li>
<li>Citlivost
</li>
</ul>
<h5>Běžně se vyskytující problémy</h5>
<ul>
<li>Problém s tlakem – nižší, vyšší, kolísající</li>
<li>Problém se základní linií – šum, drift, cyklický průběh</li>
<li>Problémy retenčního času – fluktuace retenčního času</li>
<li>Problém s chromatografickým píkem – žádný pík, dvojitý pík, nesymetrický pík</li>
<li>Problém s chromatogramem – negativní píky, jíný počet píků</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Troubleshooting_a_trendy_v_HPLC_Petr_Kozlik_Pr_F_UK_f62e306564/Shimadzu-Troubleshooting-a-trendy-v-HPLC-(Petr-Kozlik-PrF-UK).jpg" alt="Shimadzu: Troubleshooting a trendy v HPLC (Petr Kozlík, PřF UK)"/>
<h4><a href="https://lcms.cz/library?instrumentationItems=31&amp;mainauthorItems=1&amp;search=fundamentals">Spojení LC-MS</a> (úvod do MS – ionizační zdroje, analyzátory)</h4>
<ul>
<li>Petr Kozlík (PřF UK)
</li>
<li>Ionty v MS
</li>
<li>Rozlišení MS
</li>
<li>Kalibrace instrumentu
</li>
<li>Iontový zdroj
<ul>
<li>Elektronová ionizace (EI)</li>
<li>Ionizace za atmosférického tlaku</li>
<li>Chemická za atmosférického tlaku (APCI)</li>
</ul>
</li>
</ul>
<h5>Hmotnostní analyzátory</h5>
<ul>
<li>Kvadrupólový analyzátor</li>
<li>Průletový analyzátor</li>
<li>Iontová past</li>
<li>Magnetický sektorový analyzátor</li>
<li>Orbitrap</li>
<li>Iontová cyklotronová resonance</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Jak_hledat_ty_spravne_informace_od_Shimadzu_Portaly_Lab_Rulez_Nejvetsi_on_line_zdroj_informaci_v_oblasti_analyticke_chemie_Ivo_Novotny_Lab_Rulez_78ed6d90ad/Shimadzu-Jak-hledat-ty-spravne-informace-od-Shimadzu-Portaly-LabRulez-Nejvetsi-on-line-zdroj-informaci-v-oblasti-analyticke-chemie-(Ivo-Novotny-LabRulez).jpg" alt="Shimadzu: Jak hledat ty správné informace od Shimadzu - Portály LabRulez - Největší on-line zdroj informací v oblasti analytické chemie (Ivo Novotný, LabRulez)"/>
<h4><a href="https://lcms.cz/products?instrumentationItems=35&amp;manufacturerItems=1">LC-QqQ</a></h4>
<ul>
<li>Petr Kozlík (PřF UK)
</li>
<li>Full scan
</li>
<li>SIM
</li>
<li>Sken produktových iontů
</li>
<li>Sken prekurzorových iontů
</li>
<li>Sken neutrálních ztrát
</li>
<li>SRM
</li>
<li>Volba LC-MS (QqQ) podmínek
</li>
<li>Kvantifikace pomoci LC-QqQ
</li>
<li>Nalezení vhodných MRM přechodů
</li>
<li>LC/MS rady a tipy
</li>
<li>Kontaminace a snížení odezvy analytů
</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_SICRIT_iontovy_zdroj_Nova_dimenze_v_LCMS_Jan_Bucek_Plasmion_16a761f423/Shimadzu-SICRIT-iontovy-zdroj-Nova-dimenze-v-LCMS-(Jan-Bucek-Plasmion).jpg" alt="Shimadzu:- SICRIT iontový zdroj – Nová dimenze v LCMS (Jan Buček, Plasmion)"/>

Jaký byl odborný seminář HPLC a kvadrupólové LC/MS od Shimadzu na PřF UK

V dnešním světě analytické chemie je neustálým cílem dosahovat přesných a spolehlivých výsledků. Jedním z klíčových nástrojů, který nám to umožňuje, je kapalinová chromatografie spojená s hmotnostní spektrometrií. Tyto metody umožňují rozdělit a identifikovat složité směsi látek a zkoumat jejich strukturu a vlastnosti.
V naší sérii článků se budeme zabývat technickými a praktickými problémy, které mohou při těchto analýzách vzniknout, a podívame se možná řešení, postupy a doporučení, které je můžou rychle odstranit.
<h5>V jednotlivých částech rozebereme následující problémy:</h5>
<ul>
<li>Žádné píky</li>
<li>Změny retenčních časů</li>
<li>Vysoký tlak</li>
<li>Křížová kontaminace</li>
<li>Změny MS rozlišení</li>
<li>Nedostatečná přesnost hmoty (HRAM systémy)</li>
<li>Nízký tlak</li>
<li>Změny citlivosti</li>
<li>Nežádoucí fragmentace</li>
</ul>
<blockquote>
💾 Kompletní <a href="https://lcms.cz/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_LCMS_Troubleshooting_Tips_CZ_7e3bc660c1/Shimadzu_LCMS_Troubleshooting_Tips_CZ.pdf">příručka v ČJ ke stažení</a>
</blockquote>
<blockquote>
1. Díl: <a href="https://lcms.cz/article/3172">Průvodce řešením problémů v LC/MS - základní kroky</a>
</blockquote>
<blockquote>
2. Díl: <a href="https://lcms.cz/article/3187">Průvodce řešením problémů v LC/MS - tlak, kontaminace, retenční časy</a>
</blockquote>
<h3>Změny citlivosti, Nežádoucí fragmentace, Žádné píky, Nedostatečná přesnost hmoty (HRAM systémy), Změny MS rozlišení</h3>
<h4>1. Změny citlivosti</h4>
<h5>MS</h5>
<ul>
<li>Pokud se snížila plocha všech píků, zkontrolujte, zda přístroj nepotřebuje údržbu ‒ vyčistětě iontový zdroj, případně také iontovou optiku.</li>
<li>Zkontrolujte, jestli jsou nastavené správné akviziční parametry.</li>
<li>Zkontrolujte přítomnost aduktů Na+, NH4+, K+. Zvažte použití jiného laboratorního nádobí pro přípravu a skladování mobilní fáze. Připravte novou mobilní fázi</li>
<li>Zkuste zvýšit koncetraci aditiv nebo pufrů.</li>
<li>Zkontrolujte nastavení vzdálenosti sprejovací kapiláry od vstupu do vakua hmotnostního spektrometru.</li>
<li>Ověřte působení matričních efektů. Zvažte použití jiné chromatografické metody a postupu přípravy vzorku.</li>
<li>Vyměňte sprejovací kapiláru a desolvatační linii.</li>
<li>Proveďte ladění hmotnostního spektrometru.</li>
</ul>
<h5>Vzorek</h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte, zda-li nedochází k degradaci vzorku. Připravte čerstvý vzorek.</li>
<li>Zkontrolujte postup přípravy vzorku a koncentraci standardů.</li>
<li>Do postupu pro přípravu vzorku zahrňte přídavek vnitřního standardu.</li>
<li>Zvažte jiné ředění vzorku.</li>
<li>Zkontrolujte objem nástřiku.</li>
</ul>
<h5>Ztráta účinnosti kolony</h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte šířky píků a jejich rozlišení. Nastříkněte mix standardu pro testování účinnosti kolony.</li>
<li>Vyměňte analytickou kolonu.</li>
</ul>
<h5>Netěsnosti v LC</h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte těsnost spojů v celém systému.</li>
</ul>
<h5>Mobilní fáze</h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte koncentraci aditiv.</li>
<li>Pokud jste v předchozí analýze použili mobilní fázi obsahující látky snižující účinnost ionizace, vyčistěte iontový zdroj a proveďte proplach LC systému.</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Zmeny_citlivosti_Nezadouci_fragmentace_Zadne_piky_LCMS_Troubleshooting_0093052394/Shimadzu-Zmeny-citlivosti-Nezadouci-fragmentace-Zadne-piky-(LCMS-Troubleshooting).jpg" alt="Shimadzu: Změny citlivosti, Nežádoucí fragmentace, Žádné píky (LCMS Troubleshooting)"/>
<h4>2. Nežádoucí fragmentace</h4>
<h5>Špatné nastavení iontového zdroje</h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte, zda je nastavená teplota iontového zdroje vhodná pro stanovované analyty.</li>
<li>Zkontrolujte, zda je ionizační napětí vhodné pro analyty.</li>
</ul>
<h5>Moc vysoká / nízká kolizní energie</h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte a optimalizujte nastavení tlaku kolizního plynu a kolizní energie.</li>
</ul>
<h5>Iontová optika</h5>
<ul>
<li>Zajistěte správné napětí na desolvatační linii a iontové optice (QArray).</li>
</ul>
<h4>3. Žádné píky</h4>
<h5>Špatné nastavení MS</h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte, jestli jsou v metodě nastaveny správné podmínky MS měření pro analýzu vašich cílených analytů.</li>
<li>Nastavte správnou vzdálenost sprejovací kapiláry od vstupu do vakua hmotnostního spektrometru.</li>
<li>Zkontrolujte nastavení správné výšky sprejovací kapiláry.</li>
<li>Zkontrolujte, jestli dochází ke sprejování na výstupu z kapiláry.</li>
<li>Zkontrolujte nastavení teploty iontového zdroje a průtoků plynů.</li>
<li>Zkontrolujte správné nastavení tlaku kolizního plynu a jeho stabilitu.</li>
<li>Ověřte, že dochází k eluci analytů v okně měření.</li>
<li>Zkontrolujte přítomnost aduktů Na+, NH4+, K+.</li>
<li>Zvažte použití jiného laboratorního nádobí pro přípravu a skladování mobilní fáze. Připravte novou mobilní fázi. Zvažte použití jiné LC metody a postupu přípravy vzorku.</li>
<li>Koncentrace analytu je pod limited detekce.</li>
<li>Proveďte ladění hmotnostního spektrometru.</li>
</ul>
<h5>LC</h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte, jestli je kapilára pro vývod eluentu z LC připojena k MS.</li>
<li>Nedochází k průtoku mobilní fáze. Zkontrolujte, jestli není otevřen odvzdušňovací ventil.</li>
<li>Proveďte proplach celého systému včetně autosampleru, pro odstranění vzduchových bublin.</li>
<li>Propláchněte systém isopropanolem pro zajištění správného fungování „check valves“.</li>
<li>Zkontrolujte, zda nejsou kapiláry zničené nebo skřípnuté.</li>
</ul>
<h5>Nedostatečná nebo naopak moc velká retence analytů</h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte, zda používáte mobilní fázi se správným složením.</li>
<li>Zkontrolujte, zda používáte správnou kolonu.</li>
<li>Prodlužte čas analýzy.</li>
<li>Použijte silnější rozpouštědlo.</li>
<li>Zkontrolujte, zda je nastaven správný průtok mobilní fáze.</li>
</ul>
<h5>Problémy se vzorkem</h5>
<ul>
<li>Připravte čerstvý vzorek.</li>
<li>Zkontrolujte nastavený objem nástřiku v metodě/sekvenci.</li>
<li>Zkontrolujte, zda je vialka na správné pozici v autosampleru.</li>
<li>Zamyslete se nad možnou adsorpcí analytů.</li>
<li>Zkontrolujte, zda nejsou přítomny vzduchové bubliny na dně vialky.</li>
</ul>
<h5>Eluent je veden do odpadu</h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte nastavení přepínacího ventilu (pokud je součástí systému).</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Nedostatecna_presnost_hmoty_HRAM_systemy_Zmeny_MS_rozliseni_LCMS_Troubleshooting_1446e7d9ae/Shimadzu-Nedostatecna-presnost-hmoty-(HRAM-systemy)-Zmeny-MS-rozliseni-(LCMS-Troubleshooting).jpg" alt="Shimadzu: Nedostatečná přesnost hmoty (HRAM systémy), Změny MS rozlišení (LCMS Troubleshooting)"/>
<h4>4. Nedostatečná přesnost hmoty (HRAM systémy)</h4>
<h5>Rozladěný MS</h5>
<ul>
<li>Proveďte a zkontrolujte naladění systému.</li>
</ul>
<h5>Kalibrace TOF analyzátoru</h5>
<ul>
<li>Proveďte kalibraci TOF analyzátoru.</li>
</ul>
<h5>Nesprávná kalibrace</h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte, zda jsou analyty v kalibračním rozsahu a případně upravte faktor ředění.</li>
</ul>
<h5>Saturace detektoru</h5>
<ul>
<li>Nařeďte vzorky nebo snižte objem nástřiku.</li>
</ul>
<h4>5. Změny MS rozlišení</h4>
<h5>Rozladěný MS</h5>
<ul>
<li>Proveďte a zkontrolujte naladění systému.</li>
</ul>

Průvodce řešením problémů v LC/MS - rozlišení, fragmentace, detekce

Akademie

Článek

Video

Nejbližší akce

Naším posláním je šířit informace o produktech firmy Shimadzu v oblasti instrumentálních analytických přístrojů, přístrojů pro testování materiálů a speciálních přístrojů pro life science, jejich prodej a následně - instalace, zaškolení, záruční a pozáruční servis, ověřování a validace a aplikační podpora.

SHIMADZU Handels GmbH - organizační složka

Společnost Shimadzu vyrábí nejširší sortiment přístrojů pro instrumentální analytiku, testování materiálů a life science.

Good practices recommend ed for shutting down HPLC systems

CANNABIS LAB START-UP GUIDE

Differentiating Cannabis and Hemp with the Cannabis Analyzer for Potency

A Fast and Comprehensive Potency Determination of 21 Cannabinoids in Hemp Plant Material and Finished Tinctures using the Cannabis Analyzer for Potency

The Potency Determination of 15 Cannabinoids using the Cannabis Analyzer for Potency

Differentiating Cannabis and Hemp: An Evaluation of Some HPLC Methodologies

A Rugged High-Resolution Potency Determination of 18 Cannabinoids in Hemp Plant Material and Finished Tinctures using the Cannabis Analyzer for Potency

Cannabis Testing Laboratory Solutions

i-Series Cannabis Analyzer - for Potency Testing

Analytical Instruments Solutions for Seized Drugs

Complete Solutions for the Industrial Hemp Market: Flower, Stalk, Seed, Leaves & Root

The Potency Determination of 15 Cannabinoids using the Cannabis Analyzer for Potency™

Shimadzu

Shimadzu Nexera-i „Cannabis Analyzer“

Kompletní řešení na klíč včetně vhodné separační kolony, mobilní fáze, certifikovaných standardů, metody a reportů.

Kompletní řešení na klíč včetně vhodné separační kolony, mobilní fáze, certifikovaných standardů, metody a reportů. Umožňuje zvládnou celý proces od vzorku až k reportu pouze pomocí několika kliknutími myší, se snadným a minimálním pracovním postupem i  pro nezkušeného analytika.

<h3>Three Proven Methods:</h3>
<h5>High Throughput Method</h5>
When high sample throughput is paramount – 60 samples per 8 hr. day. Quantitative for 10 cannabinoids (no THCV) in under 8 minutes. Developed in collaboration with commercial testing laboratories.
<h5>High Sensitivity Method</h5>
When THCV is important, yet with good sample throughput – 48 samples per 8 hr. day. Quantitative for 11 cannabinoids (including THCV) in under 10 minutes. The method provides the sharpest chromatographic peaks and best sensitivity.
<h5>High Resolution Method</h5>
For baseline separation of 11+ components, including THCV. Minimum Resolution = 2.0. 16 samples per 8 hr. day. This is the preferred method when performing research, adding additional compounds, or state regulations change.

Shimadzu Nexera-i „Cannabis Analyzer“

Three Proven Methods:

High Throughput Method

High Sensitivity Method

High Resolution Method

Novinky

Průvodce řešením problémů v LC/MS - rozlišení, fragmentace, detekce

Jaký byl odborný seminář HPLC a kvadrupólové LC/MS od Shimadzu na PřF UK

Aplikace (undefined)

Brožury (undefined)

Manuály (undefined)

Ostatní (undefined)

Webináře

Online Pre-column Derivatization and UHPLC Analysis of Total Amino Acids in Animal Feed

New Nexera Series, the First AI Enabled and IoT Driven LC

The complete solution for cannabis testing

Dual deconvolution of LC-PDA-MS data: A fast-track approach for chemical composition and impurity analysis