Agilent 1260 Infinity II Prime LC with ISET - Emulation of the Agilent 1200 Series Quaternary LC for the Analysis of Antihistaminic Drugs

Význam tématu

Přenos analytických metod mezi různými typy kapalinové chromatografie je klíčový pro udržení konzistentní kvality výsledků a minimalizaci nákladů na revalidaci, zejména v regulovaných prostředích.
Intelligent System Emulation Technology (ISET) nabízí automatickou kompenzaci rozdílů v mrtvém objemu systému a chování čerpacích modulů při migraci metod z konvenčního HPLC na modernější UHPLC.

Cíle a přehled studie / článku

Ukázat, jak lze pomocí Agilent ISET emulovat metodu původně vyvinutou na systému Agilent 1200 Series Quaternary LC při jejím přenosu na Agilent 1260 Infinity II Prime LC.
Analyzovanou vzorkovou sadou byla směs pěti antihistaminik: tripelenamin, chlorfeniramin, tetrakain, promethazin a cetirizin.

Použitá metodika a instrumentace

Analýza probíhala za následujících chromatografických podmínek:

• Kolona: Agilent ZORBAX SB C18, 4,6 × 75 mm, 3,5 µm
• Mobilní fáze A: 0,1 % TFA ve vodě, B: acetonitril; gradient 10–55 % B za 10 min
• Proud: 0,8 mL/min; teplota kolony: 25 °C
• Objem injekce: 5 µL, jehla omývána 3 s v 50 % acetonitrilu
• Detekce: diodový array detector, λ = 232 nm, 20 Hz
• Instrumentace:
  – Agilent 1200 Series Quaternary LC (G1311A, G1329A, G1316A, G1315D)
  – Agilent 1260 Infinity II Prime LC s ISET (pumpa G7104C, multisampler G7167A s chlazením, termostat G7116A, detektor G7117C)

Hlavní výsledky a diskuse

Přenos bez aktivovaného ISET způsobil posun retenčních časů o 5–11 % směrem k nižším hodnotám.
Po aktivaci ISET byly odchylky RT menší než 3 %, v souladu se specifikací (max. 5 %).
Dalším laděním (offset mrtvého objemu –50 µL) se maximalizoval soulad RT, odchylky klesly pod 0,5 %.
V desetikorunových opakovaných měřeních obě platformy vykázaly vestavěnou přesnost RT (RSD 0,01–0,03 %) a ploch (RSD 0,05–0,07 %), přičemž systém 1260 Prime projevil mírně lepší parametry.
Rozlišení mezi anality zůstalo srovnatelné nebo mírně zlepšené při použití ISET a finetuningu.

Přínosy a praktické využití metody

• Eliminace potřeby změn původních metodických podmínek a rozsáhlé revalidace
• Rychlý a spolehlivý přenos metod mezi konvenčními HPLC a UHPLC systémy
• Zajištění vysoké reprodukovatelnosti a přesnosti výsledků v rutině

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj ISET pro komplexní gradientní a multi-komponentní aplikace, širší využití ve výrobní a farmaceutické praxi a integrace s automatizovanými pracovišti pro vysokopropustnou analýzu.

Závěr

ISET umožňuje prakticky beze změn původní metody dosáhnout na systému 1260 Infinity II Prime LC téměř identických chromatogramů (RT odchylky < 0,5 %) a lepší přesnosti a rozlišení, čímž zjednodušuje přechod mezi LC platformami.

Reference

1. Gratzfeld-Huesgen A. Transferring methods to the Agilent 1290 Infinity LC using Intelligent System Emulation Technology (ISET) – Analysis of metoclopramide hydrochloride and its impurities, Agilent Technologies Application Note 5990-9692EN, 2014.
2. Agilent InfinityLab LC with ISET, Agilent Technologies User Manual, part number G7120-90310, 2017.