Transferring methods to the Agilent 1290 Infinity LC using Intelligent System Emulation Technology (ISET)

Význam tématu

Přesné a konzistentní přenesení chromatografických metod mezi generacemi přístrojů je klíčové pro kontinuitu analytických protokolů bez nutnosti rozsáhlé revalidace. Agilent Intelligent System Emulation Technology (ISET) umožňuje minimalizaci rozdílů v objemu zpoždění a chování míchání mezi staršími HPLC a moderními UHPLC systémy, což je zásadní pro farmaceutickou analytiku při stanovení metoclopramidu a jeho nečistot.

Cíle a přehled studie

Tato studie demonstruje převod standardní HPLC metody analýzy metoclopramidu a jeho nečistot ze systému Agilent 1100 Series Quaternary LC na 1290 Infinity LC s využitím ISET. Testuje vliv ISET a manuálního ladění na doby retence a rozlišení.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity LC System (binary pump G4220A, autosampler s termostatem G4226A/G1330B, column compartment G1316C, diode array detector G4212A)
• Agilent 1100 Series Quaternary LC System (pump G1311A, autosampler G1313A, column compartment G1316A, DAD G1315B s objemem buňky 13 µL)
• Software: Agilent ChemStation C.01.03, ISET revize 1.0; firmware moduly LC rev. A.06.32, B.06.32, B.06.41; RC.Net

Použitá metodika

• Vzorky: metoclopramidu hydrochlorid a devět jeho nečistot dle EP
• Kolona: ZORBAX Eclipse Plus C18 150 × 3,0 mm, 3,5 µm
• Mobilní fáze: voda s 2,5 g/L NH4Ac (pH 6,99)/acetonitril, gradient 5–57,5 % ACN během 15 min
• Průtok 0,6 mL/min, teplota kolony 37 °C, detekce 275 nm/4 nm slit, referencia 400/60 nm, frekvence 5 Hz

Hlavní výsledky a diskuse

Systém 1290 Infinity bez ISET vykázal posun dob retence o 5–23 % proti původnímu 1100 Series, přičemž rozlišení se mírně zlepšilo díky nižšímu disperznímu objemu. Aktivace ISET snížila posun na 1–1,5 %, kromě druhého piku (4 %). Rozlišení se udrželo či mírně zlepšilo. Manuální doladění ISET (20 µL delay volume offset, kompenzace typického tlaku 120 bar) dosáhlo odchylek dob retence pod 0,8 % u většiny píků a pod 3 % u piku 2, při zachování vynikajícího rozlišení.

Přínosy a praktické využití metody

• Zrychlení přechodu na moderní UHPLC systémy bez rozsáhlé revalidace
• Zachování porovnatelnosti dat napříč různými generacemi přístrojů
• Zvýšení laboratorní produktivity a snížení nákladů na vývoj a validaci metod

Budoucí trendy a možnosti využití

ISET se může rozšířit o adaptaci na další chromatografické systémy a mobilní fáze. Automatizované ladění parametrů a pokročilá diagnostika mohou zvýšit robustnost. Integrace s cloudovými platformami zajistí konzistenci metod globálně.

Závěr

ISET efektivně kompenzuje rozdíly mezi HPLC a UHPLC systémy a umožňuje bezproblémový přenos metod s minimálními odchylkami dob retence a rozlišení. Kombinace ISET a manuálního ladění poskytuje výkonnost srovnatelnou s originálním systémem.

Reference

1. Agilent 1290 Infinity LC with Intelligent System Emulation Technology, Agilent Brochure, publication number 5990-8670EN, 2011
2. Vanhoenacker G., David F., Sandra P., Glatz B., Naegele E., Increasing productivity in the analysis of metoclopramide hydrochloride formulations using the Agilent 1290 Infinity LC system, Agilent Application Note, 5990-3981EN, May 2009