Agilent 1290 Infinity Binary LC System with ISET – Emulation of a Waters Alliance 2695 LC Applying Concave, Convex, and Linear Gradients

Význam tématu

V oblasti vysoce výkonné kapalinové chromatografie (HPLC) je častá potřeba přenášet analytické metody mezi různými přístroji bez nutnosti časově i finančně náročných úprav. Technologie Intelligent System Emulation Technology (ISET) v kombinaci s Agilent 1290 Infinity Binary LC System umožňuje napodobit chování starších Agilent LC systémů i zařízení jiných výrobců, jako je Waters Alliance 2695. Takové řešení zkracuje dobu zavádění nových přístrojů do provozu a minimalizuje riziko nesrovnalostí ve srovnávací analýze.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem technického přehledu bylo demonstrovat schopnost systému Agilent 1290 Infinity Binary LC s ISET emulovat lineární, konkávní a konvexní gradienty používané na Waters Alliance 2695 LC. Provedla se komparativní analýza chromatogramů generovaných na obou systémech za identických podmínek.

Použitá metodika a instrumentace

Pro testovací měření byl použit standardní vzorek RRLC checkout sample.

• Agilent 1290 Infinity Binary LC System s ISET (pumpa G4220A, autosampler G4226A, termostat G1330B, tlumící komora G1316C, diode array detektor G4212A)
• Waters Alliance 2695 LC s dvojitým UV/VIS detektorem VWD 2487

Chromatografické podmínky:

• Kolona Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18, 4,6 × 100 mm, 5 µm
• Teplota kolony 30 °C, teplota vzorku 10 °C
• Fázové složení: voda (A) a acetonitril (B), tok 1,2 mL/min
• Gradient 10→90 % B: lineární, konkávní a konvexní průběh dle možnosti Alliance 2695 a jejich emulace na 1290 Infinity
• Detekce: DAD, 245/10 nm (ref. 400/100 nm), 10 Hz
• Software OpenLAB CDS, ChemStation Rev. C.01.05

Hlavní výsledky a diskuse

Výsledky ukázaly vysokou shodu chromatogramů generovaných na obou systémech:

• Překrytí procentuálního průběhu gradientů a normalizovaných chromatogramů pro lineární, konkávní i konvexní průběh
• Odchylky retenčních časů na Agilent 1290 Infinity s ISET bez doladění do ±4,7 %, s doladěním (fine tuning) do ±2,25 % pro konvexní gradient
• Výrazné zlepšení rozlišení na systému 1290 Infinity díky nižšímu extra-kolonnímu objemu, s odchylkou rozlišení v povoleném rozsahu (±5 %)

Přínosy a praktické využití metody

Nasazení Agilent 1290 Infinity Binary LC s ISET přináší:

• Rychlý a spolehlivý přenos metod mezi přístroji bez rozsáhlé revalidace
• Zachování tvaru a účinnosti gradientů i u starších LC systémů
• Vyšší rozlišení a citlivost analýzy díky modernější hydrodynamice a nižšímu extra-kolonnímu objemu

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj technologie ISET může zahrnovat:

• Rozšíření emulace na další výrobce a modely LC systémů
• Automatizované doladění parametrů pomocí algoritmů strojového učení
• Integraci s online monitorováním kvality dat v reálném čase
• Využití pokročilých gradientních tvarů pro specifické aplikace (biologické vzorky, potravinářské analýzy)

Závěr

Agilent 1290 Infinity Binary LC System s ISET prokázal schopnost věrně emulovat lineární, konkávní a konvexní gradienty pružně a s vysokou shodou s Waters Alliance 2695 LC. Technologie umožňuje výrazné úspory času a prostředků při přenosu metod mezi přístroji a poskytuje zlepšené chromatografické rozlišení. Fine tuning parametrů dále zvyšuje přesnost přenosu retenční doby.

Reference

1. Agilent 1290 Infinity Binary LC and 1290 Infinity Quaternary LC with Intelligent System Emulation Technology, Agilent Technologies, 5991-3369EN, 2013
2. Huesgen A.G. Seamless instrument-to-instrument method transfer from an Agilent 1100/1200 Series LC to an Agilent 1290 Infinity LC using Intelligent System Emulation Technology (ISET), Agilent Technologies Technical Overview, 5990-9113EN, 2011
3. Huesgen A.G. Agilent 1290 Infinity Binary LC with ISET - Emulation of the Waters Alliance 2695 LC system analyzing endocrine disruptors, Agilent Technologies Application Note, 5991-1605EN, 2013