Therapeutic Peptide Analysis of GLP‑1 Agonists

Význam tématu

Analýza terapeutických peptidů, zejména GLP-1 agonistů, je klíčová pro zajištění kvality, bezpečnosti a účinnosti biotechnologických léčiv. Rozdíly ve výrobních postupech mezi dodavateli mohou ovlivnit čistotu a identitu finálního produktu, což může vést k variabilitě v biologickém účinku a regulatorním komplikacím.

Cíle a přehled studie

Studie se zaměřila na potvrzení molekulové hmotnosti a hodnocení profilu čistoty čtyř GLP-1 agonistů (semaglutid, liraglutid, tirzepatid, retatrutid) z různých dodavatelů. Cílem bylo ověřit vhodnost kolony Agilent Altura Peptide Plus v kombinaci se systémem Agilent InfinityLab Pro iQ Plus pro kvalitativní a kvantitativní charakterizaci syntetických peptidů.

Použitá metodika a instrumentace

Reagencie a vzorky:

• Liraglutid, semaglutid, retatrutid, tirzepatid (různí dodavatelé)
• ACN a voda LC/MS kvality, formátová kyselina

Instrumentace:

• Agilent 1290 Infinity II Bio LC (pumpy, multisampler, termostat)
• Kolona Altura Peptide Plus 2.1×150 mm, 2.7 μm
• Agilent InfinityLab Pro iQ Plus (ESI modul)
• Software Agilent OpenLab CDS 2.8

Podmínky analýzy:

• Gradientní eluce 15 min, teplota 60 °C, průtok 0,4 mL/min
• ESI v pozitivním režimu, m/z 200–3000
• Injekční objem 5 μL

Hlavní výsledky a diskuse

Potvrzení identity a profilu čistoty:

• Semaglutid: jeden ostrý vrchol, vysoká čistota bez zjevných nečistot
• Liraglutid: hlavní vrchol doprovázený pěti drobnými nečistotami
• Tirzepatid: jednoznačný hlavní vrchol se třemi koelutujícími nečistotami
• Retatrutid: hlavní vrchol s dvěma koelutujícími nečistotami

Komparativní analýza u liraglutidu a tirzepatidu od tří dodavatelů odhalila značné rozdíly v čistotě a typu nečistot, což podtrhuje význam systematického hodnocení dodavatelů.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje:

• Rychlé potvrzení molekulové hmotnosti peptidů
• Citlivou detekci nízkomolekulárních nečistot
• Srovnávací kvalifikaci dodavatelů
• Podporu vývoje a výroby na úrovni QA/QC

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávaný rozvoj zahrnuje:

• Integraci vysokorychlostních MS systémů pro ještě rychlejší screening
• Automatizaci přípravy vzorků a datovou analýzu s umělou inteligencí
• Rozšíření metody na další třídy terapeutických peptidů a modifikované biologické makromolekuly

Závěr

Agilent Altura Peptide Plus kolona v kombinaci s InfinityLab Pro iQ Plus poskytuje robustní platformu pro precizní analýzu GLP-1 agonistů. Metoda efektivně potvrzuje identitu, detekuje nečistoty a umožňuje porovnání kvality napříč dodavateli, což přispívá k vývoji bezpečnějších a účinnějších biomedicínských přípravků.

Reference

• Colalto C. Aspects of Complexity in Quality and Safety Assessment of Peptide Therapeutics and Peptide-Related Impurities: A Regulatory Perspective. Regul. Toxicol. Pharmacol. 2024, 153, 105699.