Analysis of Ornithine in Bunashimeji(Beech mushroom)

Význam tématu

Ornitin je neesenciální aminokyselina s významnou rolí v metabolismu močoviny a syntéze polyaminů. Jeho přesná kvantifikace v potravinách, jako jsou houby bunashimeji, je důležitá pro nutriční hodnocení, kontrolu kvality a výzkum funkčních potravin.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a ověřit robustní HILIC-LC–MS/MS metodu pro stanovení ornitinu v extraktu z houby bunashimeji. Metoda má zajistit rychlou analýzu, dostatečnou selektivitu a citlivost vhodnou pro rutinní laboratorní aplikace.

Použitá metodika

Pro separaci se využila HILIC kolona Shim-pack GIST Amide (100 mm × 2,1 mm, 3 µm). Mobilní fáze A byla 0,3 % kyseliny mravenčí ve vodě, fáze B 0,3 % kyseliny mravenčí v acetonitrilu. Gradientní program vedl od 90 % fáze B k 50 % v prvních 5–8 minutách, poté návrat na počáteční podíl. Průtok činil 0,3 mL/min, teplota kolony byla 40 °C a objem injekce 0,5 µL.

Použitá instrumentace

• HPLC soustava Nexera™ se Shim-pack GIST Amide kolonou
• LCMS-8060NX s ESI pozitivní ionizací
• MRM režim, přechod ornitin m/z 133→70, CE 22 V

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda poskytla ostré, dobře rozlišené píky ornitinu s reprodukovatelnou dobou retence. Detekční limit a kvantifikační limit byly na úrovni nízkých ng/mL, což odpovídá požadavkům analýzy v potravinových matricích. Celková doba analýzy byla 13 minut, což umožňuje vysokou propustnost vzorků.

Přínosy a praktické využití metody

Vyvinutá metoda je vhodná pro rutinní stanovení ornitinu v potravinách, doplňcích stravy a biologických vzorcích. Nabízí rychlý průběh analýzy, vysokou citlivost a selektivitu díky HILIC separaci a MRM detekci.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může směřovat k multiplexnímu stanovení souboru aminokyselin v jedné analýze, integraci on-line přípravy vzorku a využití vysokého rozlišení hmotnostní spektrometrie pro identifikaci neznámých metabolitů.

Závěr

Prokázaná HILIC-LC–MS/MS metoda umožňuje spolehlivou a efektivní kvantifikaci ornitinu v houbách bunashimeji. Díky krátké analýze a nízkým limitům detekce je vhodná pro průmyslovou i akademickou praxi.

Reference

• Application News 01-00175 (JP, ENG)
• Shimadzu Corporation. First Edition: Sep. 2024