Analysis of Ornithine in Bunashimeji (Beech mushroom) Using Triple Quadrupole LC/MS/MS

Význam tématu

Ornithin je volná aminokyselina důležitá pro detoxikaci amoniaku v játrech a má pozitivní vliv na obnovu energie, kvalitu spánku a sekreci růstových hormonů

Cíle a přehled studie / článku

Cílem byla kvantifikace ornithinu v jedlé hřibovité houbě bunashimeji podle japonské zemědělské normy JAS 0016 pomocí vysoce výkonné LC–MS/MS

Použitá metodika a instrumentace

Vzorek bunashimeji byl homogenně rozemlet, extrahován zředěnou HCl a po odstředění filtrován. Jako interní standard byla použita theanin

• Chromatograf: Shimadzu LCMS-8060NX
• Kolona: Shim-pack GIST Amide (100 × 2,1 mm, 3 μm)
• Mobilní fáze: A 0,3 % kyselina mravenčí ve vodě, B acetonitril s 0,3 % kyseliny mravenčí
• Režim gradientu: B 90 % → 50 % (0–8 min) → 90 % (8–13 min)
• Průtok 0,30 mL/min, teplota kolony 40 °C, injekce 0,5 μL
• Ionizace ESI pozitivní, MRM přechody: ornithin m/z 133→70, theanin m/z 175→84

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivka v rozmezí 20–2000 ng/mL vykázala vynikající linearitu (R>0,9999). Spike-and-recovery test ukázal návratnost 97–103 %. Ornithin v bunashimeji činil 779–2198 mg/kg, což je 7 až 14× více než u šijimi

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje citlivou analýzu bez derivatizace, rychlý cyklus měření (13 min) a opakovatelné výsledky vhodné pro rutinní kontrolu kvality potravin

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se širší aplikace LC–MS/MS v potravinářské a farmaceutické analýze, rozšíření na další matrice, automatizace přípravy vzorků a integrace do metabolomických studií

Závěr

Prokázali jsme, že použitím Shimadzu LCMS-8060NX lze rychle a přesně stanovit vysoký obsah ornithinu v bunashimeji podle JAS 0016. Bunashimeji se jeví jako bohatý zdroj ornithinu vhodný pro potravinářské i nutraceutické aplikace

Reference

• Notification of the Ministry of Agriculture, Forestry and Fisheries (MAFF) No. 445, March 31, 2021. JAS 0016 Determination of the ornithine in mushroom (Hypsizygus marmoreus)
• FAMIC Commentary on JAS 0016 Determination of the ornithine in mushroom (Hypsizygus marmoreus)