A Sensitive LC-MS/MS Method for the Analysis of Azido Impurity in Losartan Drug

Význam tématu

Losartan a další sartany patří mezi klíčové léky na léčbu hypertenze, avšak mohou obsahovat genotoxické azido nečistoty (AZBT, AZBC, AMBBT, AMBBC), jejichž detekce a kvantifikace je nezbytná pro ochranu zdraví pacientů a splnění přísných regulatorních požadavků.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a validovat vysoce citlivou LC-MS/MS metodu pro analýzu čtyř azido nečistot v losartanové surovině s využitím Shimadzu Nexera X3 LC a LCMS-8050. Hodnoceny byly linearita, limity detekce (LOD), limity kvantifikace (LOQ), opakovatelnost a recoverie.

Použitá metodika a instrumentace

• Příprava vzorků: 100 mg losartanu extrahováno vodou : acetonitrilem (20 : 80 v/v), vortex, centrifugace, injekce 5 µL supernatantu.
• Chromatografie: Shim-pack GIST C18 (3 µm, 3,0 × 100 mm), 40 °C, průtok 0,4 mL/min, gradient 35 → 40 % B (0–5,5 min), 100 % B (12–14 min), re-equilibrace 35 % B (14,01–18 min).
• Diverter valve: 0–7,6 min do odpadu, 7,6–13,0 min do MS; minimalizace kontaminace.
• Mass spectrometer LCMS-8050: ESI pozitivní, MRM režim pro prekurzor/produkt ionty AZBT (278→235), AZBC (207→179), AMBBT (448→405), AMBBC (405→192).

Hlavní výsledky a diskuse

• Linearita: Kalibrační rozsah 0,5–50 ng/mL, korelace r2 > 0,99 pro všechny analyty.
• Citlivost: LOD 0,01–0,2 ng/mL; LOQ 0,03–0,5 ng/mL.
• Recoverie: 84–116 % pro koncentrace 1, 20 a 40 µg/kg s dobrou opakovatelností (n=3).

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje spolehlivou a citlivou detekci azido nečistot v losartanu na úrovni jednotek ng/mL, což podporuje dodržení limitů EMA, Health Canada a MFDS. Diverter valve zajišťuje ochranu spektrometru před kontaminací léčivou složkou.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Adaptace metody pro další sartany a příbuzné antihypertenziva.
• Vyšší automatizace a vysokopropustné formáty analýzy s online čištěním kolony.
• Testování alternativních ionizačních režimů pro další zvýšení citlivosti.

Závěr

Vyvinutá LC-MS/MS metoda na platformě Shimadzu Nexera X3 – LCMS-8050 pro analýzu AZBT, AZBC, AMBBT a AMBBC v losartanu prokázala vynikající linearitu, citlivost i přesnost. Je připravena k implementaci v QA/QC farmaceutických laboratořích pro kontrolu genotoxických nečistot.

Reference

1. MFDS. Test method for AZBT in sartan drugs using LC-MS/MS (2021).
2. EDQM. AZBT impurity in Valsartan, Irbesartan, Losartan, Candesartan LC-MS/MS Method (2021).
3. Swissmedic OMCL. Genotoxic substances in sartans (2021).