Robust and Sensitive Azido Impurities Quantitative Analysis in Five Sartan Drug Substances

Význam tématu

Azido nečistoty v léčivech ze skupiny sartanů se ukázaly jako potenciálně mutagenní látky, jež mohou zvyšovat riziko karcinogenity. Regulace těchto sloučenin na úrovni ICH M7 (1,5 µg/osoba/den) je klíčová pro zajištění bezpečnosti pacientů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem aplikace bylo vyvinout a validovat rychlou a vysoce citlivou LC-MS/MS metodu pro stanovení dvou hlavních azido nečistot (AZBT a AMBBT) v pěti sartanových API: olmesartanu, losartanu, irbesartanu, valsartanu a kandesartanu. Studie demonstruje plnou separaci a kvantifikaci v krátkém chromatografickém běhu.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky API a standardy azido nečistot byly připraveny v metanolové matrici s postupným ředěním pro kalibrační řady 0,005–500 ng/mL. Extrakce vzorků zahrnovala vortexaci a sonikaci.

• Chromatografie: Shim-pack Velox SP-C18 (100 × 2,1 mm, 2,7 µm), gradient 50–98 % methanolu, 0,4 mL/min, 40 °C, inj. 5 µL, běh 8,5 min.
• MS/MS: Shimadzu LCMS-8060, ESI pozitivní režim, MRM přechody pro AZBT (m/z 278 → 235; 278 → 207) a AMBBT (m/z 448 → 207; 448 → 405).
• Detektor PDA: rozsah 190–800 nm, divert valve program minimalizoval kontaminaci MS.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla plné separace všech analyzovaných látek během 8,5 min. LOD a LOQ byly stanoveny na 0,005 ng/mL (S/N > 6) a 0,01 ng/mL (S/N > 15) pro obě nečistoty. Kalibrační křivky byly lineární v rozsahu 0,01–500 ng/mL (AZBT) a 0,01–200 ng/mL (AMBBT) s R2 > 0,999. Opakovatelnost retence i plochy dosahovala %RSD < 3 %. Recovery testy v API prokázaly 70–130 % návratnost.

Přínosy a praktické využití metody

Navržená LC-MS/MS metoda umožňuje spolehlivou kontrolu mutagenních nečistot v sartanových léčivech během krátké doby analýzy. Díky vysoké citlivosti je vhodná pro rutinní QA/QC laboratoře i regulatorní testování.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může vést k integraci HRMS pro širší profil nečistot, automatizaci přípravy vzorků a implementaci strojového učení pro zrychlenou analýzu dat. Možné je i rozšíření metodiky na další farmaceutické třídy.

Závěr

Jedna jednota LC-MS/MS metoda na platformě Shimadzu LCMS-8060 prokázala robustnost, citlivost a reprodukovatelnost v analýze azido nečistot v pěti sartanových API. Metoda splňuje požadavky ICH M7 a podporuje bezpečnost farmaceutických produktů.

Reference

• Risk of the presence of mutagenic azido impurities in losartan active substance, EDQM.
• Multiple lots of irbesartan, losartan and valsartan drugs recalled, Health Canada.
• ICH M7(R1): Assessment and control of DNA reactive (mutagenic) impurities in pharmaceuticals, 2017.
• Guidance for Industry Q2B Validation of Analytical Procedures: Methodology, FDA, 1996.