LC-MS/MS Method for Detection and Quantitation of Azido Impurity in Valsartan Drug Substance

Význam tématu

Vysoká čistota léčivých substancí je v praxi zásadní pro zajištění bezpečnosti pacientů a splnění regulačních požadavků. Azidové nečistoty v sartanových lécích představují riziko mutagenního či karcinogenního působení. Precizní kvantifikace těchto látek v surovinách je nezbytná pro prevenci nepřípustné expozice a pro dodržení mezinárodních standardů kvality.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem aplikace bylo vyvinout a validovat vysoce citlivou LC MS MS metodu pro separaci, detekci a kvantifikaci čtyř azidových nečistot v substanci valsartanu. Práce zahrnovala posouzení linearity, meze detekce (LOD), meze kvantifikace (LOQ), opakovatelnosti a recovery.

Použitá instrumentace

Analýza proběhla na přístrojové sestavě Shimadzu Nexera X3 LC spojené s hmotnostním spektrometrem LCMS 8050. Využit byl sloupcový materiál Shim pack GIST C18 (3,0 x 100 mm, 3 µm). Ionizace proběhla ESI v pozitivním režimu. Pro optimalizované MRM kvantifikace byly nastaveny specifické předchozí a produktové ionty a kolizní energie pro každou látku.

Metodika

Pro přípravu vzorku bylo 100 mg valsartanu extrahováno vodou s acetonitrilem v poměru 20 80, poté extrakt centrifugován a 5 µl přečištěného roztoku injektováno do LC MS MS.

Podmínky chromatografie:

• Mobile phase A: 0,1 formiová kyselina ve vodě
• Mobile phase B: 0,1 formiová kyselina v 95 acetonitrilu
• Gradient: B od 35 do 40 (0–5,5 min), až do 100 (12–14 min), návrat na 35 (14–18 min)
• Tok 0,4 ml min 1, teplota kolony 40 °C

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla vynikající separace valsartanu od čtyř azidových nečistot díky divergenci ventilu, která chránila spektrometr před znečištěním. Linearity pro všechny nečistoty vykázala korelační koeficient vyšší než 0,99 v rozsahu 0,5–50 ng ml 1. LOD se pohybovaly mezi 0,01 a 0,2 ng ml 1, LOQ mezi 0,03 a 0,5 ng ml 1. Recovery testy při nízké, střední a vysoké úrovni ukázaly průměrné hodnoty mezi 93,0 a 105,3 .

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí vysokou citlivost a opakovatelnost, což usnadňuje rutinní kontrolu kvality sartanových farmak v souladu s regulatorními požadavky. Díky optimalizované MRM detekci lze rychle identifikovat a kvantifikovat azidové nečistoty bez potřeby složitých předchozích úprav.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může spočívat v automatizaci přípravy vzorků pro zvýšení laboratorní efektivity a v rozšíření metody na další lékové třídy náchylné k azidovým či jiným toxickým nečistotám. Vývoj ultra vysokotlaké kapalinové chromatografie (UHPLC) s ještě vyšším rozlišením by umožnil zkrácení doby analýzy a snížení spotřeby mobilní fáze.

Závěr

Vyvinutá LC MS MS metoda na systémech Shimadzu Nexera X3 a LCMS 8050 prokázala vynikající analytické parametry pro detekci a kvantifikaci azidových nečistot ve valsartanu. Metoda splňuje požadavky na linearitu, citlivost i srozumitelnost a je vhodná pro rutinní QA QC kontrolu farmacii.

Reference

• Food and Drug Safety in Korea AZBT test method for sartan drugs using LC MS MS 2021 08
• Genotoxic substances in sartans OMCL Swissmedic 2021