A Simple Conversion of the USP Method for Diphenhydramine HCl Impurities to the Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C8 Column

Význam tématu

Správná implementace a přenos kompendiálních USP metod mezi chromatografickými systémy umožňuje farmaceutickým laboratořím redukovat spotřebu rozpouštědel a zkrátit dobu analýzy při zachování kvality a souladu s normami USP. Při přechodu z kapitálně neporézních C8 kolon na povrchově porézní Poroshell 120 EC-C8 lze významně zvýšit produktivitu bez potřeby rozsáhlé revalidace metody.

Cíle a přehled studie / článku

Tento dokument demonstruje převod USP metody pro stanovení nečistot diphenhydramini hydrochloridum z kolony 4.6×250 mm, 5 μm na Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C8 4.6×100 mm, 2.7 μm. Cílem je zkrácení doby analýzy na třetinu původního času, zachování požadovaných parametrů systému (resoluce a platnosti metody) a splnění předpisů USP37-NF32S1 a Stage 4 Harmonization.

Použitá instrumentace

• HPLC systém Agilent 1260 Infinity II: binární pumpa G7117B, multisampler G7167A, termostat kolony G7116A, DAD detektor G7117A.
• Kolony Agilent ZORBAX Eclipse Plus C8 4.6×250 mm, 5 μm (referenční) a InfinityLab Poroshell 120 EC-C8 4.6×100 mm, 2.7 μm.
• Software: Agilent OpenLAB CDS C.2.6.
• Reagencie: USP monobazický fosfát draselný, kyselina fosforečná, acetonitril, voda (18 MΩ).

Použitá metodika

Výchozí metoda používala předem připravenou mobilní fázi (35:65 acetonitril:fosfátový pufr, pH 3.0), průtok 1.2 mL/min, teplotu 25 °C, UV detekci 220 nm a injekční objem 10 μL. Požadovaná doba běhu činila sedminásobek retenčního času diphenhydraminu (37.1 min). Upravovaná metoda aplikovala pravidlo L/dp dle USP Stage 4 pro přechod na povrchově porézní částice, zvýšil se průtok na 1.5 mL/min, injekční objem se geometricky škáloval na 4 μL, aniž by byla nutná revalidace.

Hlavní výsledky a diskuse

Použitím 100 mm Poroshell 120 EC-C8 kolony se retenční čas diphenhydraminu zkrátil z 5.30 na 1.76 min (celková doba analýzy 12.33 min), tedy na 33 % původní doby. Výkonnost kolony (N) se zvýšila z 10 334 na 12 873, rezoluce mezi diphenhydraminovým a příbuzným vrcholem A vzrostla z 2.85 na 3.02. Generovaný tlak zůstal pod 400 bar, systémové požadavky USP pro dobu běhu a rozlišení byly splněny.

Přínosy a praktické využití metody

Zkrácení doby analýzy o 66 % vedlo k úspoře rozpouštědel a zvýšení propustnosti analytického pracoviště. Přechod nevyžaduje výměnu přístrojového vybavení ani rozsáhlou revalidaci, přičemž je zajištěna plná shoda s kompendiálními požadavky USP.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozšíření aplikace povrchově porézních kolon na další USP metody, přechod k UPLC/UHPLC technologiím pro další zkracování analýz, integrace do on-line monitoringu výrobních procesů a automatizovaných pracovních postupů.

Závěr

Převod USP metody pro nečistoty diphenhydraminu HCl na Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C8 vedl k významnému zkrácení analýz, zlepšení efektivity a úspoře prostředků bez nutnosti revalidace. Dodržení pravidel USP Stage 4 zaručuje plnou kompendiální shodu.

Reference

• USP Diphenhydramine HCl, Impurity Method, United States Pharmacopeia 43(4).
• USP General Chapter <621> Chromatography, USP 37-NF32, First Supplement.
• USP Stage 4 Harmonization, Official December 1, 2022.