Exemplary performance data for steroids

Význam tématu

Liquidní chromatografie v kombinaci s tandemovou hmotnostní spektrometrií je klíčová pro přesné kvantifikování steroidů a dalších biologicky významných látek v klinických vzorcích. Díky vysoké citlivosti a selektivitě umožňuje klinickým laboratořím spolehlivou diagnostiku a monitorování pacientů.

Cíle a přehled studie

Cílem předložené dokumentace je předvést analytické výkony systému Thermo Scientific Vanquish MD HPLC spojeného s TSQ Quantis MD hmotnostním spektrometrem (HESI i APCI) při kvantifikaci estronu a testosteronu. Studie ilustruje přesnost, linearitu a opakovatelnost metody v in vitro diagnostickém prostředí.

Použitá metodika

Vzorky byly extrahovány methyl-terc.butyl-etherem a převedeny do HPLC vialek. Kalibrátory a kontrolní vzorky připravily laboratoře UTAK v sedmi koncentracích pro kalibraci a třech úrovních pro QC.

Použitá instrumentace

• Vanquish MD HPLC s mobilní fází A (0,5 mM NH4F ve vodě) a B (methanol)
• TSQ Quantis MD Series MS s ionizací HESI a APCI
• Softwary: TSQ Quantis MD pro kalibraci a diagnostiku, TraceFinder LDT pro kvantifikaci

Hlavní výsledky a diskuse

Linearita kalibrací byla výborná (R2 > 0,9978) pro oba analyty a polituaci. Přesnost (odchylka < ±15 %) a imprecizita (CV < 15 %) splnily stanovená kritéria. U QC vzorků dosáhl estron i testosteron RSD pod 7 % v obou režimech ionizace. Chromatogramy i MS2 spektra prokázaly dobrou separaci a jednoznačnou identifikaci kvantifikátorů a confirmačních iontů.

Přínosy a praktické využití metody

• Spolehlivá kvantifikace nízkých koncentrací steroidů v biologických matricích
• Vysoká reproducibilita mezi jednotlivými běhy a operátory
• Kompatibilita systému s požadavky na in vitro diagnostiku (LDT workflows)

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření metodiky o další klinicky významné analyty (kortikoidy, estrogeny), automatizované přípravy vzorků a integrace umělé inteligence pro zpracování dat. Dále je perspektivní implementace vysokopropustných platforem pro masový screening a personalizovanou medicínu.

Závěr

Prezentovaný systém Vanquish MD HPLC s TSQ Quantis MD MS poskytuje robustní a validovatelnou metodu pro kvantifikaci steroidů v in vitro diagnostických aplikacích. Výsledky potvrzují jeho vhodnost pro klinickou praxi s požadavky na přesnost, citlivost i reprodukovatelnost.

Reference

CLSI. Liquid Chromatography–Mass Spectrometry Methods; Approved Guideline. CLSI document C62-A. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2014.