Assessing Repeatability of a Peptide Mapping Method Using the ACQUITY Arc Bio System
Technické články | 2018 | WatersInstrumentace
Peptidové mapování je klíčová analytická metoda pro detailní charakterizaci proteinů, zejména monoklonálních protilátek
díky schopnosti identifikovat a kvantifikovat jednotlivé peptidové fragmenty. Moderní UHPLC systémy poskytují vyšší rozlišení,
snižují rozptyl a zvyšují citlivost při detekci nízkoodabných komponent biologických vzorků.
Cílem studie bylo otestovat opakovatelnost retencí a ploch píků u peptidové mapy trastuzumabu průběžně pěti injekcemi
na platformě ACQUITY Arc Bio System. Měřicími parametry byly procentuální relativní standardní odchylky (RSD) retencí a ploch.
Metodika:
Instrumentace:
Další rozvoj zahrnuje optimalizaci chemie kolonek a mobilní fáze pro snížení RSD u časných píků,
rozšíření metodiky na další biopolymerní systémy a implementaci vícenásobné atributové metodiky (MAM).
ACQUITY Arc Bio System prokázal vynikající opakovatelnost retencí i ploch, což potvrzuje jeho vhodnost pro
rutinní peptidové mapování a kontrolu kvality proteinových terapeutik.
HPLC
ZaměřeníProteomika
VýrobceWaters
Souhrn
Význam tématu
Peptidové mapování je klíčová analytická metoda pro detailní charakterizaci proteinů, zejména monoklonálních protilátek
díky schopnosti identifikovat a kvantifikovat jednotlivé peptidové fragmenty. Moderní UHPLC systémy poskytují vyšší rozlišení,
snižují rozptyl a zvyšují citlivost při detekci nízkoodabných komponent biologických vzorků.
Cíle a přehled studie
Cílem studie bylo otestovat opakovatelnost retencí a ploch píků u peptidové mapy trastuzumabu průběžně pěti injekcemi
na platformě ACQUITY Arc Bio System. Měřicími parametry byly procentuální relativní standardní odchylky (RSD) retencí a ploch.
Použitá metodika a instrumentace
Metodika:
- Tryptický digest trastuzumabu
- Gradientní eluce 60 minut
- Detekce a zpracování dat softwarem Empower 3 pro odstranění uživatelského biasu
Instrumentace:
- ACQUITY Arc Bio System – kvaternární UHPLC systém s biokompatibilními materiály
- Kolonka Waters XBridge BEH C18 XP (130 Å, 2,5 µm, 4,6 × 100 mm)
- Software Empower 3
Hlavní výsledky a diskuse
- Retenční čas 102 píků: většina RSD v rozmezí 0,025–0,05 %
- Plocha vybraných 8 píků: RSD mezi 0,26–0,93 %
- Vyšší RSD u časných píků kvůli nízkým hodnotám retenčního faktoru ḱ
- Výsledky dokazují vynikající přesnost a stabilitu analýzy
Přínosy a praktické využití metody
- Zajištění spolehlivých dat pro vývoj a kontrolu kvality proteinů
- Minimální zásahy uživatele díky automatizovanému zpracování dat
- Možnost aplikace na široké spektrum biologických vzorků
Budoucí trendy a možnosti využití
Další rozvoj zahrnuje optimalizaci chemie kolonek a mobilní fáze pro snížení RSD u časných píků,
rozšíření metodiky na další biopolymerní systémy a implementaci vícenásobné atributové metodiky (MAM).
Závěr
ACQUITY Arc Bio System prokázal vynikající opakovatelnost retencí i ploch, což potvrzuje jeho vhodnost pro
rutinní peptidové mapování a kontrolu kvality proteinových terapeutik.
Reference
- ICH Q10 Pharmaceutical Quality System, International Council for Harmonisation, červen 2008
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
METHOD TRANSFER AND ROUTINE ANALYSIS OF PROTEIN AND PEPTIDE-BASED DRUG PRODUCTS USING A BIOCOMPATIBLE UHPLC SYSTEM
2019|Waters|Postery
METHOD TRANSFER AND ROUTINE ANALYSIS OF PROTEIN AND PEPTIDE-BASED DRUG PRODUCTS USING A BIOCOMPATIBLE UHPLC SYSTEM Brooke M. Koshel, Robert Birdsall, Corey Reed, Stephan Koza, Zhimin Li, Paula Hong, Joe Fredette, and Scott Berger Waters Corporation INTRODUCTION Many of the…
Klíčová slova
bio, bioarc, arcsystem, systemmodernization, modernizationmean, meanacquity, acquitylegacy, legacyigg, iggtransfer, transferhplc, hplcrsd, rsduhplc, uhplcdevelopment, developmentequivalency, equivalencyclass
Impact of Instrument and Detector Characteristics on Size Exclusion Chromatography Method Transfer Across Biocompatible UHPLC Systems
2018|Agilent Technologies|Technické články
[ APPLICATION NOTE ] Impact of Instrument and Detector Characteristics on Size Exclusion Chromatography Method Transfer Across Biocompatible UHPLC Systems Zhimin Li, Paula Hong, and Patricia R. McConville Waters Corporation, Milford, MA, USA APPLICATION BENEFITS ■■ ■■ INTRODUCTION Biocompatible system…
Klíčová slova
hmw, hmwbio, bioarc, arclmw, lmwacquity, acquitypda, pdamonomer, monomerexclusion, exclusiontransfer, transfermean, meanrsd, rsdsize, sizesec, secmethod, methodtuv
Waters ACQUITY QDa Detector - QC APPLICATIONS COMPENDIUM - EDITION 2
2018|Waters|Příručky
[ APPLICATION NOTEBOOK ] ACQUITY QDa Detector QC APPLICATIONS COMPENDIUM EDITION 2 Dear Colleague The 2013 introduction of the ACQUITY™ QDa™ Detector was a breakthrough in Chromatography and Mass Spectrometry integration. It was the fulfilment of a vision 20 years…
Klíčová slova
acquity, acquityqda, qdauplc, uplcdetector, detectormass, massarc, arcdetection, detectionbound, boundcetrimonium, cetrimoniumusing, usingminutes, minuteswaters, watersintensity, intensityclass, classanalysis
Migrating Peptide Mapping Methods from the Arc™ Premier System to the Alliance™ iS Bio System with Gradient SmartStart Technology and Intelligent Method Translator App (iMTA)
2024|Waters|Aplikace
Application Note Migrating Peptide Mapping Methods from the Arc™ Premier System to the Alliance™ iS Bio System with Gradient SmartStart Technology and Intelligent Method Translator App (iMTA) Duanduan Han, Robert E. Birdsall, Karen Nyholm Waters Corporation Abstract The Alliance iS…
Klíčová slova
imta, imtasmartstart, smartstartalliance, alliancetranslator, translatormigrating, migratingapp, apparc, arcbio, biopremier, premierintelligent, intelligentsystem, systemmapping, mappinggradient, gradientpeptide, peptidetechnology
