Migrating Peptide Mapping Methods from the Arc™ Premier System to the Alliance™ iS Bio System with Gradient SmartStart Technology and Intelligent Method Translator App (iMTA)

Význam tématu

Peptidové mapování je klíčovou technikou v analýze proteinových biofarmaceutik, umožňující detailní charakterizaci primární struktury a modifikací terapeutických protilátek. Přenos ověřených HPLC metod mezi instrumenty v různých laboratořích šetří čas, snižuje riziko chyb a zajišťuje konzistentní výsledky v režimech kvality (QC).

Cíle a přehled studie / článku

Hlavním cílem bylo ukázat migraci peptidového mapování z Arc Premier systému (s binárním nebo kvartérním správcem rozpouštědel) na novou platformu Alliance iS Bio HPLC System vybavenou Gradient SmartStart Technology a aplikací Intelligent Method Translator (iMTA). Studie porovnává selektivitu, opakovatelnost retencí a procentuální podíl plochy píků bez nutnosti komplexní reoptimalizace metodiky.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika:

• Vzorek: komerčně dostupný mAb Tryptic Digestion Standard, 0,5 mg/ml v 0,1 % kyselině mravenčí.
• Fáze mobilní: A – 0,1 % kyseliny mravenčí ve vodě, B – 0,1 % kyseliny mravenčí v acetonitrilu.
• Gradient: lineární gradient modifikovaný pomocí Gradient SmartStart podle rozdílu objemů disipace mezi systémy.

Použitá instrumentace:

• Alliance iS Bio HPLC System s kvartérním správcem (QSM).
• Arc Premier System s binárním (BSM) nebo kvartérním (QSM) správcem rozpouštědel.
• Detektor TUV, λ = 214 nm.
• Kolona XSelect Premier Peptide CSH C18, 130 Å, 2,5 µm, 4,6 × 100 mm.
• Software Empower 3.6.1 (Arc Premier) a Empower 3.8 (Alliance iS Bio).

Hlavní výsledky a diskuse

Porovnání chromatogramů 11 klíčových peptidů ukázalo:

• Oba systémy (QSM vs. QSM) dosáhly podobné selektivity a retence s RT SD ≤ 1,0 s (Alliance) vs. ≤ 1,8 s (Arc Premier).
• Alliance iS Bio System vykázal lepší opakovatelnost plochy píků (%RSD ≤ 3,3 %) v porovnání s Arc Premier (%RSD ≤ 7,2 %).
• Při přenosu z BSM se bez úpravy gradientu docházelo k ∆RT až 0,64 minuty kvůli rozdílům v objemu disipace (1669 vs. 1080 µL).
• Gradient SmartStart umožnil vyrovnání RT mezi systémy nastavením posunu startu gradientu o 589 µL, čímž byla dosažena shodná selektivita.

Přínosy a praktické využití metody

Automatizovaná aplikace iMTA a inteligentní korekce gradientu výrazně zkracují čas potřebný k migraci metod, eliminují riziko ručních přepisů a poskytují konzistentní výsledky. To zvyšuje efektivitu laboratoří QC a usnadňuje validaci nových instrumentů v biofarmaceutickém prostředí.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření podobných přenosových aplikací na další typy separačních metod a integrace strojového učení pro automatizované optimalizace gradientů. Dále lze očekávat pokročilé komponenty pro další snížení objemu disipace a vylepšenou biokompatibilitu v analýze proteinů a peptidů.

Závěr

Platforma Alliance iS Bio HPLC System ve spojení s iMTA a Gradient SmartStart Technology poskytuje spolehlivý a efektivní postup pro přenos peptidového mapování bez nutnosti zásadní reoptimalizace. Výsledkem je konsistentní chromatografický výkon a vyšší důvěra v analýzu proteinových bioterapeutik.

Reference

1. Du X. et al. Method Scaling from ACQUITY Premier to Arc Premier System. Waters Application Note 720007862, 2023.
2. Du X., Birdsall R.E., Bigos P., Han D., Nyholm K. Deploying the Alliance iS Bio HPLC System... 720008288, 2024.
3. Bigos P., Birdsall R.E., Nyholm K. Modernizing Compendial SEC Methods... 720008290, 2024.
4. Amini K., Hong P. Tools to Assist in Moving Established Methods... 720008333, 2024.