<p><strong>Tým Shimadzu pro Vás vytvořil praktického průvodce, který vám pomůže při řešení problémů s kapalinovou chromatografií. Na jednotlivé části se detailněji podíváme ve 4 dílném seriálu, pokrývající témata jako:</strong></p>
<ul>
<li>Základní postup a tipy</li>
<li>Žádné píky</li>
<li>Zdvojené píky</li>
<li>Chvostující píky</li>
<li>Čelní chvostování</li>
<li>Široké píky</li>
<li>Píky navíc</li>
<li>Fluktuace retenčních časů</li>
<li>Ztráta rozlišení</li>
<li>Změny citlivosti</li>
<li>Drift základní linie</li>
<li>Šum základní linie</li>
<li>Tlak není zobrazen, ale průtok je správný</li>
<li>Nízký tlak</li>
<li>Fluktuace tlaku</li>
<li>Vysoký tlak</li>
</ul>
<blockquote>
<h4><a href="https://lcms.cz/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_HPLC_Troubleshooting_CZ_Pruvodce_resenim_problemu_v_kapalinove_chromatografii_573693cdb3/Shimadzu-HPLC-Troubleshooting-CZ-Pruvodce-resenim-problemu-v-kapalinove-chromatografii.pdf">Kompletní příručka dostupná ke stažení v knihovně!</a></h4>
</blockquote>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Nexera_Series_LC_40_vyvoj_3d8c34eff0/Shimadzu-Nexera-Series-LC-40-vyvoj.png" alt="Shimadzu: Nexera Series LC-40 - vyvoj"/></p>
<h3><strong>Úvod</strong></h3>
<p><strong>Odstávka přístroje je často nákladná a časově náročná, ale problémy lze mnohdy rychle odstranit pomocí základních znalostí jejich řešení.</strong></p>
<p>Tato příručka pro <strong>řešení potíží</strong> s <strong>kapalinovou chromatografií</strong> je navržena tak, aby pomohla uživatelům rychle vyhodnotit <strong>běžné problémy</strong> s jejich HPLC systémem. Brožura obsahuje informace o tom, jak tyto problémy <strong>identifikovat</strong>, efektivně <strong>řešit</strong> a systém <strong>opravit</strong>, abyste mohli Váš instrument znovu spustit a pokračovat v analýzách.</p>
<h4><strong>Prevence je lepší než léčba - základní tipy zabraňují běžným problémům s HPLC</strong></h4>
<p>Mnohým běžným problémům lze zabránit <strong>pravidelnou výměnou spotřebního</strong> materiálu, např. těsnění, aby systém fungoval hladce a spolehlivě. Projděte si níže uvedené tipy, aby vaše přístroje pracovaly správně:</p>
<ul>
<li><p>Používejte <strong>oplach těsnění</strong> a roztok <strong>pravidelně vyměňujte</strong>, aby byla zachována životnost těsnění čerpadla.</p>
</li>
<li><p><strong>Neuchovávejte vodné pufry příliš dlouho</strong>, abyste zabránili růstu mikrobů.</p>
</li>
<li><p>Zajistěte <strong>uzavření organických mobilních fází</strong>, aby se zabránilo změnám složení.</p>
</li>
<li><p>Používejte vhodné třídy <strong>kvality rozpouštědel</strong>. V ideálním případě by se jako minimální standard měl používat stupeň HPLC, <strong>vyhnete se částicím v mobilní fázi</strong>, které mohou blokovat části LC nebo způsobit problémy v základní linii.</p>
</li>
<li><p><strong>Proplachujte</strong> přístroj (a kolonu) <strong>mobilní fází bez pufru</strong>, jako je H2O / MeCN (1: 1 v/v), abyste zabránili srážení solí nebo degradaci kolony.</p>
</li>
<li><p>Zajistěte, aby <strong>detektor nebyl skladován v koncentrované mobilní fázi</strong> a <strong>nenechávejte lampu zapnutou</strong>, pokud ji nepoužíváte, aby nedošlo ke zkrácení životnosti lampy.</p>
</li>
<li><p>Mějte ošetřenou odpovídající záruku nebo balíčky údržby, které vám pomůže snížit prostoje v důsledku neočekávaných problémů.</p>
</li>
</ul>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_online_monitoring_mobilni_faze_a_Lab_Solution_Direct_software_pro_vzdalenou_spravu_bec25f744f/Shimadzu-online-monitoring-mobilni-faze-a-LabSolution-Direct-software-pro-vzdalenou-spravu.png" alt="Shimadzu: Online monitoring mobilní fáze a LabSolution Direct software pro vzdálenou správu"/></p>
<h4><strong>Osvědčené postupy pro odstraňování problémů</strong></h4>
<ol>
<li><p>Je problém <strong>reprodukovatelný</strong> nebo <strong>občasný</strong>?</p>
</li>
<li><p>Veďte pečlivě <strong>záznamy</strong></p>
</li>
<li><p>Vizuálně <strong>zkontrolujte přístroj</strong> a prověřte těsnost, vzduchové bubliny, správnou instalaci kolony, apod.</p>
</li>
<li><p>Ujistěte se, že <strong>metoda</strong> je správná, <strong>rozpouštědla</strong> jsou správně připojena, <strong>kolona</strong> je správná a ve správné pozici a nastavení <strong>průtoku</strong> a <strong>teploty</strong> je v pořádku, atd.</p>
</li>
<li><p>Proveďte <strong>test</strong> funkčnosti systému. Test by měl mít známý robustní výsledek.</p>
</li>
<li><p>Chcete-li zjistit, o jaký problém jde, <strong>měňte proměnné po jedné</strong>. Pracujte systematicky.</p>
</li>
<li><p>Zkuste <strong>nahradit podezřelý vadný element</strong> dílem, o kterém víte, že je v pořádku.</p>
</li>
<li><p>Pokud se tím problém nevyřeší, <strong>nezapomeňte změnu vrátit</strong>.</p>
</li>
</ol>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_LCMS_8060_9e7eb8f7a1/Shimadzu-LCMS-8060.jpg" alt="Shimadzu: LCMS-8060NX tandemový hmotnostní spektrometr"/></p>
<h4><strong>Uchovávejte záznamy</strong></h4>
<p>Záznamy mohou být <strong>klíčem k lokalizaci problémů</strong> a také zdrojem informací. Zaznamenávání použití přístrojů, kolon i přípravy vzorků a mobilní fáze může být zdrojem informací, když dojde k problému. I jednoduchý záznam použité mobilní fáze a kolony můře odhalit, proč došlo k zablokování nebo změně tlaku.</p>
<h4><strong>Typ záznamu a Typ zaznamenaných informací</strong></h4>
<h5><strong>Příprava vzorku/mobilní fáze</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Jak se připravují</strong> mobilní fáze.</li>
<li><strong>Čísla šarží</strong> rozpouštědla</li>
<li><strong>Kalibrace</strong> zařízení, jako jsou <strong>pipety</strong> a <strong>váhy</strong>.</li>
<li><strong>Příprava vzorku</strong> včetně objemů a ředicích medií.</li>
</ul>
<h5><strong>Přístroj - Moduly, velikost směšovače, sériová čísla, informace o záruce.</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Protokol údržby</strong> včetně dat k náhradním dílům.</li>
<li><strong>Charakteristiky HPLC</strong>, jako je mrtvý objem, disperze, přesnost a reprodukovatelnost autosampleru, typické tlaky.</li>
</ul>
<h5><strong>Kolona - Test funkčnosti systému výrobce/chromatografické vlastnosti.</strong></h5>
<ul>
<li>Datum pořízení a datum prvního použití.</li>
<li>Informace o uložení.</li>
<li>Shrnutí <strong>využití kolony</strong>, <strong>počet nástřiků</strong>, <strong>tlak</strong> během provozu, typ použitých <strong>mobilních fází</strong>.</li>
</ul>
<h5><strong>Problém trvá?</strong></h5>
<p>Stále bojujete? Kontaktujte nás (<em>cz@shimadzu.eu.com</em>).</p>


Průvodce řešením problémů v HPLC - základní postup

<p><strong>V <a href="https://lcms.cz/article/1731">prvním díle seriálu o řešení problémů v HPLC</a> jsme se podívali na základní tipy jak Váš HPLC systém provozovat a také osvědčené postupy pro odstraňování problémů, pokud se nakonec vyskytnou. Druhý díl série přináší detailnější pohled na problematiku chromatografických píků</strong></p>
<blockquote>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_zakladni_postup_8309b7ee11/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-zakladni-postup.jpg" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC"/></p>
</blockquote>
<blockquote>
<h4><a href="https://lcms.cz/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_HPLC_Troubleshooting_CZ_Pruvodce_resenim_problemu_v_kapalinove_chromatografii_573693cdb3/Shimadzu-HPLC-Troubleshooting-CZ-Pruvodce-resenim-problemu-v-kapalinove-chromatografii.pdf">Kompletní příručka dostupná ke stažení v knihovně!</a></h4>
</blockquote>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_Zadne_piky_0974bbf93b/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-Zadne-piky.png" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC -  Žádné píky"/></p>
<h3><strong>Žádné píky</strong></h3>
<h5><strong>Problémy s nastavením detektoru</strong></h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte, zda je <strong>zapnutá lampa</strong> detektoru</li>
<li>Zkontrolujte, zda jsou připojeny <strong>elektrické kabely</strong></li>
<li>kontrolujte <strong>životnost lampy</strong> a v případě překročení ji vyměňte</li>
<li>Zajistěte, aby byl dle fyzikálně chemických vlastností analytu použit  <strong>vhodný detektor</strong></li>
<li>Zkontrolujte, zda metoda používá vhodné <strong>nastavení detektoru</strong> odpovídající hledaným látkám</li>
</ul>
<h5><strong>Eluční čas analytů delší než doba analýzy</strong></h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte <strong>složení mobilní fáze</strong></li>
<li>Zkontrolujte, zda se používá <strong>správná kolona</strong></li>
<li><strong>Prodlužte</strong> čas analýzy</li>
<li>Zvyšte <strong>eluční schopnost</strong> mobilní fáze</li>
</ul>
<h5><strong>Problémy se vzorkem</strong></h5>
<ul>
<li>Zajistěte, aby se vzorek nezměnil. Připravte  <strong>čerstvé vzorky</strong></li>
<li>Ujistěte se, že je <strong>vzorek v autosampleru</strong> je ve správné poloze</li>
<li>Problém s <strong>adsorpcí</strong> vzorku</li>
</ul>
<h5><strong>Ucpaná jehla</strong></h5>
<ul>
<li>Pokuste se <strong>odstranit ucpání</strong> nebo <strong>vyměnit jehlu</strong></li>
<li>Zjistěte, proč je jehla ucpána (např. <strong>septem</strong> nebo špatnou <strong>přípravou vzorku</strong>)</li>
</ul>
<h5><strong>Přístroj</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Žádný průtok</strong> mobilní fáze, případně proplachovací ventil ponechán otevřený</li>
<li><strong>Odvzdušněte systém</strong>, abyste odstranili možné vzduchové bubliny v čerpadle</li>
<li>Propláchněte injektor, abyste odstranili vzduchové bubliny v dávkovacím čerpadle</li>
</ul>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_Dvojite_piky_876a784604/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-Dvojite-piky.png" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Dvojité píky"/></p>
<h3><strong>Zdvojené píky</strong></h3>
<h5><strong>Znečištěný vstup kolony nebo předkolony</strong></h5>
<ul>
<li>Vyměňte <strong>předkolonu</strong> nebo <strong>předfiltr</strong> nebo vloženou filtrační <strong>fritu</strong></li>
<li><strong>Propláchněte</strong> předkolonu nebo vlastní kolonu zpětným tokem (pokud lze)</li>
</ul>
<h5><strong>Rozpouštědlo vzorku  je nekompatibilní s mobilní fází</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Vyměňte rozpouštědlo</strong> vzorku</li>
<li>Použijte <strong>počáteční složení mobilní fáze</strong> (pokud  ze)</li>
<li>Použijte funkci vstřikování Co-Solvent nebo POISe</li>
</ul>
<h5><strong>Vlastnosti analytu</strong></h5>
<ul>
<li>Možnost změny izomeru nebo analytu - <strong>změňte podmínky</strong></li>
</ul>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_Chvostujici_piky_c588d73d17/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-Chvostujici-piky.png" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Chvostující píky"/></p>
<h3><strong>Chvostující píky</strong></h3>
<h5><strong>Sekundární interakce</strong></h5>
<ul>
<li>U zásad <strong>zvyšte pH</strong> (jak lze); u kyselin <strong>snižte pH</strong>  </li>
<li>Zvyšte <strong>iontovou sílu pufru</strong> (jak lze)</li>
<li>Změňte <strong>kolonu</strong></li>
</ul>
<h5><strong>Mrtvý objem</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Znovu připojte</strong> kolonu s fitinky pro redukci mrtvého objemu.</li>
</ul>
<h5><strong>Degradace kolony</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Vyměňte</strong> kolonu</li>
</ul>
<h5><strong>Trhliny v koloně</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Vyplňte</strong> trhlinu (pravděpodobně ale vlastnosti kolony už nebudou dobré).</li>
</ul>
<h5><strong>Interferující pík</strong></h5>
<ul>
<li>Použijte <strong>delší kolonu</strong>; další <strong>vývoj metody</strong></li>
</ul>
<h5><strong>Nevhodné pH mobilní fáze</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Upravte pH</strong> (doporučují se 2 jednotky pH  od  pKa).</li>
</ul>
<h5><strong>Chelatace vzorku na aktivních místech</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Omezte interakci</strong> pomocí ion párového činidla, modifikátoru nebo sekvestračního činidla</li>
<li><strong>Změňte kolonu</strong> nebo průtokovou cestu za a injektorem</li>
</ul>
<h5><strong>Nedostatečná pufrace</strong></h5>
<ul>
<li>Použijte koncentraci pufru 50-100 mM (UV metody)</li>
</ul>
<h5><strong>Nástřik vzorku</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Snižte koncentraci</strong> vzorku</li>
</ul>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_Celni_chvostovani_9fd86c0b41/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-Celni-chvostovani.png" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Čelní chvostování"/></p>
<h3><strong>Čelní chvostování</strong></h3>
<h5><strong>Degradace kolony</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Vyměňte kolonu</strong></li>
</ul>
<h5><strong>Mobilní fáze/rozpouštědlo vzorku nejsou kompatibilní</strong></h5>
<ul>
<li>Upravte <strong>složení</strong> mobilní fáze.</li>
<li>Použijte <strong>počáteční složení</strong> mobilní fáze (pokud  lze)</li>
</ul>
<h5><strong>Přetížení vzorkem</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Snižte koncentraci</strong> vzorku</li>
</ul>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_Siroke_piky_2cc8d09f48/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-Siroke-piky.png" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Široké píky"/></p>
<h3><strong>Široké píky</strong></h3>
<h5><strong>Nástřik vzorku</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Snižte koncentraci</strong> vzorku nebo nástřik</li>
</ul>
<h5><strong>Problém s kolonou</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Degradace kolony</strong>, kolona by měla být vyměněna</li>
</ul>
<h5><strong>Problém s nastavením termostatu kolony</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Zkontrolujte</strong> správnou teplotu termostatu. Vyšší teplota kolony obvykle vede k rychlejší eluci  látek (<strong>pozor na teplotní limit kolony</strong> doporučený výrobcem)</li>
</ul>
<h5><strong>Mobilní fáze</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Ověřte</strong>, že používáte správnou mobilní fázi</li>
</ul>
<h5><strong>Nastavení přístroje</strong></h5>
<ul>
<li>Zvyšte <strong>vzorkovací frekvenci</strong> detektoru pro zjištění, zda se zlepší  tvar píků</li>
<li>Dlouhé kapiláry a další faktory zvyšující <strong>vnitřní objem</strong> systému rozmývají píky, zkontrolujte možnosti omezení</li>
<li>Zkontrolujte, zda je nastaven <strong>správný průtok</strong> MF (mobilní fáze) a je dodržován</li>
</ul>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_Piky_navic_4f584dce96/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-Piky-navic.png" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Píky navíc"/></p>
<h3><strong>Píky navíc</strong></h3>
<h5><strong>Další látky ve vzorku</strong></h5>
<ul>
<li>Pokud jsou ve vzorku <strong>další látky</strong>, není to chyba</li>
</ul>
<h5><strong>Píky s dlouhým RT z předchozí analýzy</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Prodlužte RT</strong> (retenční čas), nebo zvyšte <strong>eluční sílu MF</strong>  </li>
<li><strong>zvyšte průtok</strong> MF</li>
</ul>
<h5><strong>Ghost  píky</strong></h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte <strong>čistotu MF</strong></li>
<li>Použijte trap ghost píků  (je-li možno)</li>
</ul>


Průvodce řešením problémů v HPLC - chromatografické píky

<p><strong>V <a href="https://lcms.cz/article/1731">prvním díle seriálu o řešení problémů v HPLC</a></strong> jsme se podívali na <strong>základní tipy</strong> jak Váš HPLC systém provozovat a také osvědčené postupy pro odstraňování problémů, pokud se nakonec vyskytnou.</p>
<p><a href="https://lcms.cz/article/1743"><strong>Druhý díl - chromatografické píky</strong></a> přinesl detailnější pohled na problematiku chromatografických píků z pohledu chvostování nebo frontování, širokých píků, žádných píků, píků navíc nebo píků dvojitých.</p>
<p>Třetí díl seriálu rozebere postupy v případě výskytu <strong>fluktuace retenčních časů</strong>, <strong>ztráty rozlišení</strong>, <strong>změny citlivosti</strong>, <strong>driftu základní linie</strong> nebo <strong>šumu základní linie</strong>.</p>
<blockquote>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_zakladni_postup_8309b7ee11/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-zakladni-postup.jpg" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC"/></p>
</blockquote>
<blockquote>
<h4><a href="https://lcms.cz/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_HPLC_Troubleshooting_CZ_Pruvodce_resenim_problemu_v_kapalinove_chromatografii_573693cdb3/Shimadzu-HPLC-Troubleshooting-CZ-Pruvodce-resenim-problemu-v-kapalinove-chromatografii.pdf">Kompletní příručka dostupná ke stažení v knihovně!</a></h4>
</blockquote>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_Fluktuace_retencnich_casu_65fd009d2b/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-Fluktuace-retencnich-casu.jpg" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Fluktuace retenčních časů"/></p>
<h3><strong>Fluktuace retenčních časů</strong></h3>
<h5><strong>Průtok</strong></h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte, zda metoda používá <strong>správný průtok</strong>. Průtokoměrem zjistěte skutečný průtok.</li>
</ul>
<h5><strong>Nedostatečná stabilizace</strong></h5>
<ul>
<li>Kolona s reverzní fází by měla být <strong>ekvilibrována</strong> nejméně deseti-násobným objemem MF. Pokud je i toto nedostatečné, <strong>zvyšte čas ekvilibrace</strong>.</li>
<li>Platí i pro další techniky, jako je iontová výměna a HILIC.</li>
</ul>
<h5><strong>Špatná regulace teploty</strong></h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte, zda metoda používá <strong>správnou teplotu</strong>.</li>
<li>Zajistěte, aby teplota v kolonové peci byla <strong>přesná</strong>.</li>
</ul>
<h5><strong>Změna rozměrů kolony</strong></h5>
<ul>
<li>Ujistěte se, že je použita <strong>správná kolona</strong> včetně rozměrů.</li>
</ul>
<h5><strong>Změna stacionární fáze kolony</strong></h5>
<ul>
<li>Pro <strong>paměťové efekty</strong> nepoužívejte kolonu s ion párovým činidlem pro jinou mobilní fázi.</li>
<li><strong>Vysušená stacionární fáze</strong> (historicky nesprávně „kolaps fáze“)</li>
</ul>
<h5><strong>Nesprávná mobilní fáze</strong></h5>
<ul>
<li>Zajistěte, aby byla mobilní fáze <strong>připravena správně</strong>.</li>
<li>Pokud používáte čerpadlo k směšování mobilní fáze, ověřte, že <strong>dávkování je přesné</strong>.</li>
<li>Zajistěte, aby byla použita <strong>správná mobilní fáze</strong> a <strong>správné trasy</strong> dle zvolené metody.</li>
</ul>
<h5><strong>Netěsnosti</strong></h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte, zda v systému nejsou <strong>uvolněné spoje</strong>.</li>
</ul>
<h5><strong>Vzduchová bublina v čerpadle</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Odvzdušněte čerpadlo</strong> pomocí odvzdušňovacího ventilu.</li>
</ul>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_Ztrata_rozliseni_a22c65d1e7/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-Ztrata-rozliseni.jpg" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Ztráta rozlišení"/></p>
<h3><strong>Ztráta rozlišení</strong></h3>
<h5><strong>Změna šířky píků</strong></h5>
<ul>
<li>Změny <strong>vlastností kolony</strong> a <strong>nástřiku</strong> vzorku/účinnosti kolony může mít za následek rozšíření píků.</li>
<li>Zajistěte, aby kolona nebyla <strong>přetížena</strong> nebo vyměňte kolonu aby zatížení snesla.</li>
</ul>
<h5><strong>Změny retenčního času</strong></h5>
<ul>
<li>Viz popis v části retenční čas.</li>
</ul>
<h5><strong>Změna mobilní fáze nebo odpaření</strong></h5>
<ul>
<li>Připravte <strong>nové mobilní fáze</strong>.</li>
</ul>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_Zmeny_citlivosti_b83c1b0c7d/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-Zmeny-citlivosti.jpg" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Změny citlivosti"/></p>
<h3><strong>Změny citlivosti</strong></h3>
<h5><strong>Problém s injektorem</strong></h5>
<ul>
<li>Změny dávkovacího objemu injektoru, k identifikaci změn <strong>použijte QC kontrolní vzorek</strong>.</li>
<li>Zkontrolujte metodu a <strong>podrobnosti k nástřiku</strong>.</li>
<li>Zvyšte <strong>proplach jehly</strong> a <strong>smyčky</strong> k potlačení přenosu vzorku mezi nástřiky.</li>
<li><strong>Odvzdušněte</strong> dávkovací čerpadlo.</li>
</ul>
<h5><strong>Vzorek</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Degradace vzorku</strong> může snížit píky analytů a zvýšit píky nečistot. Připravte <strong>nový vzorek</strong>.</li>
<li><strong>Zkontrolujte přípravu vzorku</strong> aby bylo zajištěno, že koncentrace se nezměnila.</li>
</ul>
<h5><strong>Detektor</strong></h5>
<ul>
<li>Pokud se změnila citlivost u všech píků, zkontrolujte <strong>nastavení</strong> a <strong>citlivost detektoru</strong>.</li>
<li>Zkontrolujte <strong>životnost lampy</strong> a vyměňte ji, pokud je za limitem.</li>
<li>Možná bude nutné vyměnit okénka průtokových kyvet.</li>
</ul>
<h5><strong>Změna vlastností kolony</strong></h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte <strong>šířky píku</strong> a <strong>rozlišení</strong>. Otestujte výkon kolony pomocí standardního <strong>QC testu</strong>.</li>
</ul>
<h5><strong>Netěsnosti přístroje</strong></h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte, zda v systému nejsou <strong>uvolněné spoje</strong>.</li>
</ul>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_Drift_zakladni_linie_02dfe031d7/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-Drift-zakladni-linie.jpg" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Drift základní linie"/></p>
<h3><strong>Drift základní linie</strong></h3>
<h5><strong>Fluktuace teploty kolony</strong></h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte teplotu kolony.</li>
</ul>
<h5><strong>Nízká kvalita mobilní fáze</strong></h5>
<ul>
<li>Použijte <strong>HPLC rozpouštědla</strong>, vysoce čisté soli a přísady.</li>
<li>Zajistěte, aby byly mobilní fáze dostatečně <strong>odplyněny</strong>.</li>
</ul>
<h5><strong>Kontaminant nebo vzduchová bublina v kyvetě detektoru</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Propláchněte</strong> průtokovou kyvetu isopropanolem.</li>
<li>Je-li nutno, propláchněte kyvetu <strong>1M kys. dusičnou</strong>.</li>
</ul>
<h5><strong>Prasklé okénko kyvety</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Vyměňte</strong> okénka kyvety.</li>
</ul>
<h5><strong>Problém s mícháním mobilní fáze</strong></h5>
<ul>
<li>Použijte <strong>větší</strong> nebo <strong>efektivnější</strong> mixér.</li>
</ul>
<h5><strong>Pomalá ekvilibrace kolony</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Vypláchněte kolonu</strong> mobilní fází (minimálně 10–20 objemy kolony).</li>
</ul>
<h5><strong>Analyty s dlouhým RT eluující v dalším nástřiku</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Použijte proplach</strong> mezi nástřiky, nebo, pokud je možno, použijte <strong>zpětný proplach kolony</strong> k vymytí kontaminantů s dlouhým retenčním časem.</li>
</ul>
<h5><strong>Recyklovaná mobilní fáze, ale detektor není správně vynulován</strong></h5>
<ul>
<li>Proveďte <strong>autozero</strong> detektoru.</li>
</ul>
<h5><strong>Detektor (UV) není nastaven na maximum absorbance</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Změňte vlnovou délku</strong> na maximum UV absorbance.</li>
</ul>
<p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Shimadzu_Pruvodce_resenim_problemu_v_HPLC_Sum_zakladni_linie_652ec723f8/Shimadzu-Pruvodce-resenim-problemu-v-HPLC-Sum-zakladni-linie.jpg" alt="Shimadzu: Průvodce řešením problémů v HPLC - Šum základní linie"/></p>
<h3><strong>Šum základní linie</strong></h3>
<h5><strong>Bublina v detektoru nebo čerpadle</strong></h5>
<ul>
<li>Dostatečně <strong>odplyňte</strong> mobilní fázi a <strong>propláchněte</strong> cestu MF (mobilní fáze)</li>
</ul>
<h5><strong>Netěsnost</strong></h5>
<ul>
<li>Zkontrolujte <strong>cesty MF</strong> a spojky</li>
</ul>
<h5><strong>Nedokonalé míchání mobilní fáze</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Předmíchejte</strong> mobilní fázi nebo použijte <strong>větší mixér</strong></li>
</ul>
<h5><strong>Teplotní změny detektoru</strong></h5>
<ul>
<li>Použijte <strong>teplotně stabilizovanou</strong> průtokovou celu detektoru</li>
</ul>
<h5><strong>Kontaminovaná nebo vadná mobilní fáze</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Zkontrolujte</strong> mobilní fázi</li>
</ul>
<h5><strong>Nemísitelné složky mobilní fáze (pozorujeme i tlakové pulzy)</strong></h5>
<ul>
<li>Použijte <strong>mísitelné</strong> složky MF</li>
</ul>
<h5><strong>Bublina zachycená v systému</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Propláchněte</strong> a <strong>vyčistěte</strong> průtokovou cestu</li>
</ul>
<h5><strong>Slabá lampa detektoru</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Vyměňte</strong> lampu</li>
</ul>
<h5><strong>Únik náplně kolony</strong></h5>
<ul>
<li><strong>Vyměňte</strong> kolonu</li>
</ul>


Průvodce řešením problémů v HPLC - Retenční čas, Rozlišení, Citlivost, Drift a Šum

<p><strong>Zajímáte se o stanovení PFAS látek nebo se jim věnujete profesně? Přijměte srdečné pozvání na odborný webinář na téma:</strong></p><h4><strong>Stanovení celkového obsahu PFAS pomocí spalovací iontové chromatografie</strong></h4><p>🗓️ <strong>Datum:</strong> 11. června 2025<br>🕙 <strong>Čas: </strong>10:00<br>⏱️ <strong>Délka trvání: </strong>cca 50 minut<br>🔗 <strong>Přihlášení:</strong> <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://docs.google.com/forms/d/e/1FAIpQLSfIljAlZ_LjuQtunBcuDew3Iid9L-AroBxkhklXLin2tE1oGA/viewform"><strong>ZDE</strong></a></p><p>Webinář pořádají společnosti <strong>ANAMET s.r.o.</strong> a <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/companies/43"><strong>Shimadzu Česká republika </strong></a>a představí se na něm dva zahraniční řečníci:</p><ul><li><strong>Takuro Kato </strong>(Chief Technical Manager, Nittoseiko Analytech)</li><li><strong>Vadim Kraft</strong> (Product Specialist HPLC, Shimadzu Europe)</li></ul><p>Aplikační specialisté vás seznámí s principem <strong>spalovací části </strong>a následné analýzy pomocí <strong>iontové chromatografické části </strong>analytické sestavy.</p><p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Spalovaci_iontovy_chromatograf_AQF_5000_H_s_automatickym_spalovanim_vzorku_od_spolecnosti_Nittoseiko_Analytec_Corporation_vpravo_a_iontovy_chromatograf_HIC_ESP_s_elektrodialyzou_od_spolecnosti_Shimadzu_Corporation_vlevo_bedff7321d.jpg" alt="Shimadzu: Spalovací iontový chromatograf AQF-5000H s automatickým spalováním vzorků od společnosti Nittoseiko Analytec Corporation (vpravo) a iontový chromatograf HIC-ESP s elektrodialýzou od společnosti Shimadzu Corporation (vlevo)." srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Spalovaci_iontovy_chromatograf_AQF_5000_H_s_automatickym_spalovanim_vzorku_od_spolecnosti_Nittoseiko_Analytec_Corporation_vpravo_a_iontovy_chromatograf_HIC_ESP_s_elektrodialyzou_od_spolecnosti_Shimadzu_Corporation_vlevo_bedff7321d.jpg 245w," sizes="100vw" width="1231" height="412"></p><h5><strong>Součástí webináře bude:</strong></h5><ul><li>vysvětlení pojmů jako „<i>total</i>“ a „<i>sum</i>“ PFAS,</li><li>detailní popis postupu měření včetně <strong>předúpravy vzorků</strong>,</li><li><strong>aplikace na různé druhy matric</strong> a srovnání s jinými metodami pro stanovení PFAS,</li><li>diskuze o <strong>současné evropské legislativě</strong> týkající se PFAS.</li><li>Aplikační poznámka: <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/an_01_00786_en_8c1f73b5b8.pdf"><strong>Analysis of AOF (Adsorbable Organic Fluorine) According EPA Method 1621</strong></a></li></ul><h5><strong>Webinář je určen zejména pro:</strong></h5><p>🔬 vědce v oblasti životního prostředí<br>🧪 laboratorní analytiky<br>📋 zástupce regulačních orgánů<br>🌊 odborníky zabývající se testováním PFAS a kvalitou vody</p><p><strong>Těšíme se na Vaši účast!</strong></p><p>Hynek Mácha – ANAMET s.r.o.</p><p>Ondřej Hillmich – Shimadzu Česká republika</p>

Pozvánka na Shimadzu webinář Stanovení celkového obsahu PFAS pomocí spalovací iontové chromatografie

<p>Pokud se zajímáte o stanovení PFAS látek a propásli jste webinář pořádaný společností <strong>ANAMET s.r.o.</strong> a <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/companies/43"><strong>Shimadzu Česká republika</strong></a> na téma "<i><strong>Stanovení celkového obsahu PFAS pomocí spalovací iontové chromatografie</strong></i>" dne <strong>11. 6. 2025</strong>, nezoufejte, připravili jsme pro Vás záznam tohoto webináře. Pustit si jej budete moci po zaregistrování, kdy vám přijde odkaz na záznam webináře do e-mailové schránky.</p><blockquote><p class="cke-user_style-important"><strong>👉 </strong><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://docs.google.com/forms/d/e/1FAIpQLSfIljAlZ_LjuQtunBcuDew3Iid9L-AroBxkhklXLin2tE1oGA/viewform"><strong>Registrujte se ZDE</strong></a></p></blockquote><h4><strong>Úvod do analýzy PFAS</strong></h4><p>Per- a polyfluorované látky (PFAS) jsou syntetické chemikálie používané od 40. let 20. století v průmyslových i spotřebních produktech. Díky své odolnosti vůči rozkladu získaly přezdívku „věčné chemikálie“. Jejich perzistence a potenciální zdravotní rizika – včetně hormonálních poruch, karcinogenity a bioakumulace – je však dostaly do centra pozornosti regulátorů po celém světě.</p><h5><strong>Proč je důležitá analýza celkového obsahu PFAS</strong></h5><p>Klasické metody, jako je kapalinová chromatografie s hmotnostní detekcí (LC-MS), dokáží identifikovat jen omezené množství známých PFAS (obvykle 6–40 látek). Nové legislativní požadavky, například <strong>Směrnice EU o pitné vodě</strong>, však vyžadují <strong>kvantifikaci celkového množství PFAS</strong>, včetně neidentifikovaných prekurzorů a degradačních produktů.</p><h4><strong>Spalovací iontová chromatografie (CIC): Řešení pro celkovou analýzu PFAS</strong></h4><p>Metoda CIC se zaměřuje na jednu společnou vlastnost všech PFAS: <strong>vazbu uhlík-fluor</strong>. Pomocí spalování vzorku a převedení všech fluorovaných sloučenin na <strong>fluoridové ionty (F⁻)</strong> lze určit <strong>celkový obsah organického fluoru</strong>.</p><p><span style="font-family:&quot;Segoe UI Emoji&quot;,sans-serif;"><strong>🔬</strong></span><strong> Třístupňový proces CIC</strong></p><ol><li><strong>Spalování:</strong> Všechny PFAS se přemění na plynný HF (fluorovodík).</li><li><strong>Absorpce:</strong> HF je zachycen ve vodném roztoku.</li><li><strong>Kvantifikace:</strong> Stanovení fluoridů pomocí iontové chromatografie.</li></ol><p>Metoda je použitelná pro široké spektrum matric: <strong>voda, půda, spotřební zboží, obaly, kosmetika, chemikálie a další</strong>.</p><h5><strong>Oblasti použití a případové studie</strong></h5><p><strong>1. Testování produktů</strong></p><ul><li><strong>Příklad:</strong> Obaly potravin, textilie.</li><li><strong>Zjištění:</strong> LC-MS často detekuje méně než 1 % celkového fluoru naměřeného CIC – což odhaluje přítomnost neznámých či neoznačených PFAS.</li></ul><p><strong>2. Analýza životního prostředí</strong></p><ul><li><strong>Parametr: </strong><i>Adsorbovatelný organický fluor (AOF)</i></li><li><strong>Metoda:</strong> Standardizovaná (ISO, EPA), využívá aktivní uhlí k separaci anorganického fluoru.</li><li><strong>Výsledek:</strong> Značné rozdíly mezi LC-MS a CIC potvrzují přítomnost dalších PFAS látek, které nejsou běžně identifikovatelné.</li></ul><p><strong>3. Monitoring pitné vody</strong></p><ul><li>Probíhá výzkum pro dosažení limitů dle EU (např. 0,5 µg/l pro PFAS Total).</li><li>Aktuální AOF metody nejsou dostatečně citlivé, ale vývoj pokračuje.</li></ul><h5><strong>Pokročilá přístrojová technika od Shimadzu</strong></h5><p>Dr. Kraft prezentoval moderní IC systém od Shimadzu, speciálně vyvinutý pro PFAS analýzy:</p><ul><li><strong>ICDS-40A supressor:</strong> Malý objem, vysoká účinnost, nízký šum – ideální pro detekci fluoridu.</li><li><strong>Modulární konstrukce:</strong> Kompaktní (šířka 42 cm), flexibilní, snadno propojitelný se spalovací jednotkou.</li><li><strong>Software LabSolutions:</strong> Intuitivní rozhraní, automatizace dávkování, sledování v reálném čase, minimalizace chyb.</li></ul><p><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Spalovaci_iontovy_chromatograf_AQF_5000_H_s_automatickym_spalovanim_vzorku_od_spolecnosti_Nittoseiko_Analytec_Corporation_vpravo_a_iontovy_chromatograf_HIC_ESP_s_elektrodialyzou_od_spolecnosti_Shimadzu_Corporation_vlevo_bedff7321d.jpg" alt="Shimadzu: Spalovací iontový chromatograf AQF-5000H s automatickým spalováním vzorků od společnosti Nittoseiko Analytec Corporation (vpravo) a iontový chromatograf HIC-ESP s elektrodialýzou od společnosti Shimadzu Corporation (vlevo)" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Spalovaci_iontovy_chromatograf_AQF_5000_H_s_automatickym_spalovanim_vzorku_od_spolecnosti_Nittoseiko_Analytec_Corporation_vpravo_a_iontovy_chromatograf_HIC_ESP_s_elektrodialyzou_od_spolecnosti_Shimadzu_Corporation_vlevo_bedff7321d.jpg 245w," sizes="100vw" width="1231" height="412"></p><h4><strong>Hlavní poznatky</strong></h4><ul><li><strong>CIC řeší limity klasických metod</strong> a poskytuje komplexní pohled na celkový obsah PFAS.</li><li>Metoda je <strong>všestranná, škálovatelná a legislativně relevantní</strong> – ideální pro laboratoře, které chtějí držet krok s novými požadavky.</li><li><strong>Systém Shimadzu</strong> nabízí vysokou citlivost, snadnou automatizaci a efektivní správu dat – klíč pro přesnou environmentální kontrolu.</li></ul>

Záznam webináře Stanovení celkového obsahu PFAS pomocí spalovací iontové chromatografie

Webináře

Aplikace

Akademie

Osobnosti

Plasty

Životní prostředí

Potraviny

Vody

Zdraví

Přednáška

Vědecký článek

Rozhovor

Toxikologie

Popularizace

Věda a výzkum

Software

Covid-19

Kariéra

Článek

Laboratoře

Různé

Produkt

Video

Poster

Nejbližší akce

Typ novinky

Zaměření

Naším posláním je šířit informace o produktech firmy Shimadzu v oblasti instrumentálních analytických přístrojů, přístrojů pro testování materiálů a speciálních přístrojů pro life science, jejich prodej a následně - instalace, zaškolení, záruční a pozáruční servis, ověřování a validace a aplikační podpora.

Záznam webináře Stanovení celkového obsahu PFAS pomocí spalovací iontové chromatografie

Pozvánka na Shimadzu webinář Stanovení celkového obsahu PFAS pomocí spalovací iontové chromatografie

Průvodce řešením problémů v HPLC - Retenční čas, Rozlišení, Citlivost, Drift a Šum

Průvodce řešením problémů v HPLC - chromatografické píky

Průvodce řešením problémů v HPLC - základní postup

Nejbližší akce

Waters Seminář FOOD & Water

45. Moderní elektrochemické metody

VITATOX 2026

Webináře

Ion-Pair Reversed‑Phase LC Method Development for sgRNA Impurity Analysis

PFAS proven: Show me the data

Building Reliable Lateral Flow Assays: Real-World Case Studies Reviewed