A RAPID METHOD FOR THE ULTRA-SENSITIVE QUANTIFICATION OF FLUTICASONE PROPIONATE AND SALMETEROL XINAFOATE FROM HUMAN PLASMA

Význam tématu

Flutikason propionát a salmeterol xinafoát jsou inhalabilní léčiva s nízkou systémovou expozicí a sub pg/mL koncentracemi v plazmě. Pro farmakokinetické studie a monitorování účinnosti či bezpečnosti je klíčové mít spolehlivou, citlivou a rychlou analytickou metodu.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout a validovat rychlou LC-MS/MS metodu umožňující ultra citlivou kvantifikaci obou látek z lidské plazmy s limity detekce 0,1 pg/mL pro flutikason a 0,05 pg/mL pro salmeterol. Studie navazovala na předchozí práce a optimalizovala přípravu vzorku i chromatografické podmínky.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika obsahovala:

• Příprava vzorku: 400 μL plazmy denaturováno směsí ZnSO4 a amoniaku, extrakce pomocí Oasis PRiME HLB 96well μElution, vysprání 50 % methanolu a eluce 10:90 isopropanol/methanol.
• Chromatografie: ACQUITY UPLC I-Class, kolona BEH C18 (1,7 μm, 2,1×50 mm), teplota 60 °C, mobilní fáze A: 10 % NH4OH ve vodě, B: 10:90 isopropanol:methanol, gradient 0–5 min, průtok 0,3 mL/min, objem injekce 50 μL.
• Detekce MS: Waters Xevo TQ-XS, ESI+, MRM přechody 501,3→293,3 pro flutikason a 416,4→232,2 pro salmeterol, optimalizované zdrojové a kolizní podmínky.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda vykázala:

• LLOQ 0,1 pg/mL pro flutikason a 0,05 pg/mL pro salmeterol.
• Lineární rozsahy 0,1–10 pg/mL a 0,05–5 pg/mL s R2 > 0,99.
• Přesnosti 82–114 % a přesnost (RSD) < 10 % intra- i interdenně.
• Vysoké zotavení analytů > 90 % a matrix efekt < 1 %.
• Vynikající tvary píků a poměr signál/šum.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda je rychlá, jednoduše proveditelná a nákladově efektivní. Je vhodná pro klinické farmakokinetické studie, monitorování dávkování a QA/QC v biomedicínských laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Možné rozšíření zahrnují plnou automatizaci přípravy vzorku, multiplexní analýzy dalších kortikosteroidů či bronchodilatátorů, využití nových sorbentů a pokročilých vysokorozlišovacích MS systémů pro širší profilování metabolitů.

Závěr

Vyvinutá LC-MS/MS metoda dosažením sub-pg/mL citlivosti představuje robustní nástroj pro přesnou kvantifikaci flutikasonu propionátu a salmeterolu xinafoátu v lidské plazmě a podporuje pokročilé farmakokinetické a klinické studie.

Reference

1. Allena J Ji et al. Ultrasensitive and automated 1 pg/mL fluticasone propionate assay in human plasma using LC-MS/MS. Bioanalysis, 2013.
2. Joanne Mather et al. Quantification of Fluticasone Propionate and Salmeterol Xinafoate in plasma at the sub pg/mL level using UPLC/MS/MS. Application Note, 2012.
3. Zia R Tayab et al. Pharmacokinetic/pharmacodynamic evaluation of urinary cortisol suppression after inhalation of fluticasone propionate and mometasone furoate. Br J Pharmacol, 2007.
4. Fvasconcellos. Wikipedia, 2007.
5. Ayacop. PubChem, 2007.
6. Ahmed Samir et al. Simultaneous Determination of Salmeterol Xinafoate and Fluticasone Propionate. Pharmaceutica Analytica Acta, 2012.
7. Abdelkawy. Pharmaceutica Analytica Acta, 2012.