A Rapid Method for the Ultra-Sensitive Quantification of Fluticasone Propionate and Salmeterol Xinafoate from Human Plasma

Význam tématu

Fluticasone propionate a salmeterol xinafoate jsou inhalacni leciva s velmi nizkou systemovou expozici, primarne pouzivana pri lecbe astmatu a COPD. Presne stanovení jejich stopovych koncentraci v plazme je klicove pro vyhodnoceni biologicke dostupnosti, farmakokinetiky a monitorovani ucinnosti lecby.

Cíle a přehled studie

Cilem studie bylo vyvinout rychlou, jednoduchou a ultra-senzitivní metodu pro kvantifikaci fluticasone propionate a salmeterol xinafoate v lidské plazme s LLOQ 0.1 pg/mL a 0.05 pg/mL. Workflow kombinuje optimalizovanou SPE, UPLC oddělení a kvantitativní MRM detekci.

Použitá metodika a instrumentace

• Predpracovani vzorku: 400 µL plazmy smichano s 400 µL roztoku ZnSO4/10% NH4OH
• Extrahce: Oasis PRiME HLB 96-well µElution plate, wash 50:50 methanol:voda, eluce 2×25 µL 10:90 IPA:methanol, finalni naředění vodou
• Chromatografie: ACQUITY UPLC I-Class PLUS, BEH C18 1.7 µm (2.1×50 mm), teplota 60 °C, flow 300 µL/min, gradient z 50:50 na 5:95 A:B
• Detekce: Xevo TQ-XS, ESI+ MRM (fluticasone 501.3→293.3, salmeterol 416.4→232.2), optimalizovane napeti, toky plynů a teploty
• Software: MassLynx v4.2, TargetLynx pro kvantifikaci

Hlavní výsledky a diskuse

• SPE obnovy analyto >90 % a matricovy efekt <1 %
• Elucni roztok 10:90 IPA:methanol zajistil nejvyssi signal
• Optimalni flow 300 µL/min s vrcholy sirky ~7 s
• Dosazene LLOQ 0.1 pg/mL pro fluticasone a 0.05 pg/mL pro salmeterol
• Linearita v rozsahu 0.1–10 a 0.05–5 pg/mL s R²>0.99 (1/x váha)
• Intra- a inter-day preciznost <10 % RSD, accuracy QC 90–115 %

Přínosy a praktické využití metody

• Rychla a jednoduchá preparace bez kondicionace SPE
• Minimální objem vzorku (400 µL)
• Vhodná pro farmakokinetické studie, bioekvivalentní hodnocení a klinické monitorování

Budoucí trendy a možnosti využití

• Adaptace na další inhalacní sloučeniny a steroidy
• Multiplexní analýzy pro soucasnou kvantifikaci vice analyto
• Miniaturizace a automatizace workflow pro vysoki throughput
• Použití v personalizované medicine pro optimalizaci davkování

Závěr

Navržená metoda efektivne kombinuje SPE Oasis PRiME HLB, sub-2 µm UPLC a vysoce citlivou MRM detekci. Dosahuje ultra niske hranice detekce, vynikající linearitu a reprodukovatelnost, coz ji cini vhodnou pro nizkonazorne kvantifikace v klinickych a vyzkumnych aplikacich.

Reference

1. Fvasconcellos Fluticasone propionate Wikipedia 2007
2. Ji AJ a kol Bioanalysis 2013 5(4) 423–435
3. Ayacop Salmeterol xinafoate PubChem 2007
4. Samir A a kol Pharmaceutica Analytica Acta 2012 3(8)
5. Sunwoo J a kol Translational Clinical Pharmacology 2017 25(2) 85–92
6. Mather J a kol Waters Application Note 2012 720004340EN
7. Tayab ZR a kol British Journal of Pharmacology 2007 64(5) 698–705