Impurity Analysis of Aminoglycoside Antibiotic Using the Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z Column with ELSD Detection

Význam tématu

Analýza nečistot v aminoglykosidových antibiotikách je klíčová pro zajištění bezpečnosti a účinnosti léčiv. Vysoká polarita molekul a jejich nečistot omezuje využití běžných RP chromatografických metod. HILIC-Z přináší rychlou a spolehlivou separaci vysoce polárních sloučenin s minimálními úpravami LC systému.

Cíle a přehled studie

Cílem studie je ukázat separaci nečistoty neaminu od hlavní účinné látky ribostamycinu sulfátu pomocí Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z a detekce ELSD. Analýza zahrnuje standardní a navozené vzorky s nízkým obsahem nečistot.

Použitá metodika a instrumentace

• Kolona: Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z, 2.1×100 mm, 2.7 μm
• Mobilní fáze A: 100 mM acetát amonný ve vodě; B: acetonitril
• Gradient: 0–1 min 65 % B; 1–5 min lineárně na 55 % B; 5–10 min 55 % B; 10–13 min opět 65 % B
• Průtok 0,4 mL/min; teplota kolony 25 °C; objem injekce 2 μL
• Detekce: ELSD (40 °C, plyn 1,6 SLM, datová frekvence 40 Hz)
• Příprava vzorků: ribostamycin sulfát 0,4 mg/mL a neamin 0,2 mg/mL ve vodě/ACN (50 %); ribostamycin 4 mg/mL se 2 % neaminu
• Instrumentace: Agilent 1260 Infinity II (binary pump, vialsampler, multicolumn thermostat), Agilent 1290 Infinity II ELSD

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila rychlou separaci neaminu a ribostamycinu s ostrými, symetrickými špičkami během 10 minut. Detekce 2% nečistoty byla spolehlivá. Zwitteriontová fáze HILIC-Z zajistila vynikající rozlišení i při minimálních změnách mobilní fáze.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a efektivní separace polárních antibiotik a nečistot
• Minimalizace úprav stávající LC infrastruktury
• Vysoká citlivost a opakovatelnost s ELSD detekcí
• Vhodné pro QA/QC v farmaceutickém průmyslu

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozvoj HILIC metodiky může rozšířit aplikace na další polární sloučeniny, jako jsou oligonukleotidy či peptidy. Integrace s hmotnostní spektrometrií a automatizovanými vzorkovači zvýší citlivost a propustnost analýz.

Závěr

Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z kombinovaná s ELSD detekcí představuje efektivní a spolehlivou metodu pro analýzu nečistot v aminoglykosidových antibiotikách, posilující kvalitu a bezpečnost farmaceutických produktů.

Reference

• Fu R., Bivens A. Application Note Impurity Analysis of Aminoglycoside Antibiotic Using the Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z Column with ELSD Detection, Agilent Technologies, Inc., 2018
• Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z Documentation, 2017