Analysis of Polar Compounds in Plant Material
Aplikace | 2018 | Agilent TechnologiesInstrumentace
Alkaloid stachydrin, hlavní aktivní látka v Leonurus japonicus využívané v tradiční čínské medicíně, je vysoce polární sloučenina, kterou je obtížné analyzovat reverzní fází vzhledem k nízké retenci a rušivému pozadí dalších polárních složek.
Cílem studie bylo vyvinout robustní chromatografickou metodu založenou na HILIC pro přímou separaci a kvantifikaci stachydrinu z rostlinného extraktu s využitím sloupce Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z.
Metodika zahrnovala extrakci sušeného prášku L. japonicus 70% ethanolem při zpětném varu po dobu 2 hodin, následnou filtraci skrze 0,2 μm PTFE membránu a případné naředění acetonitrilem. Separace probíhala na HILIC-Z sloupci (2,1 × 100 mm, 2,7 μm) při 30 °C a průtoku 0,30 mL/min s mobilními fázemi: voda s 10 mM amoniovým octanem a acetonitril. Detekce byla realizována ELSD při teplotách 40 °C (nebulační i odpařovací) a průtoku plynu 1,6 SLM.
Byly optimalizovány jak isokratické (90:10 ACN:10 mM amoniový octan, doba běhu 8 min), tak gradientní metody (95→60 % fáze B) s plným rozlišením špičky stachydrinu od ostatních polárních i nepolárních komponent. Chromatogramy potvrdily reprodukovatelnost a vysokou selektivitu metody.
Navržená HILIC metoda nabízí rychlou a jednoduchou analýzu stachydrinu přímo z rostlinného extraktu bez složité přípravy, umožňuje rutinní kontrolu kvality bylinných přípravků a je kompatibilní s bezuvovými detektory.
Očekává se kombinace HILIC s hmotnostní spektrometrií pro pokročilou identifikaci polárních metabolit, automatizace extrakce v online režimu a rozšíření metodiky na vícesložkovou analýzu dalších bioaktivních alkaloidů.
Metoda HILIC-Z na sloupci Poroshell 120 prokazuje delší životnost, nízké protitlakové charakteristiky a vysokou selektivitu, což činí analýzu stachydrinu v Leonurus japonicus spolehlivou a efektivní.
HPLC
ZaměřeníKlinická analýza
VýrobceAgilent Technologies
Souhrn
Význam tématu
Alkaloid stachydrin, hlavní aktivní látka v Leonurus japonicus využívané v tradiční čínské medicíně, je vysoce polární sloučenina, kterou je obtížné analyzovat reverzní fází vzhledem k nízké retenci a rušivému pozadí dalších polárních složek.
Cíle a přehled studie
Cílem studie bylo vyvinout robustní chromatografickou metodu založenou na HILIC pro přímou separaci a kvantifikaci stachydrinu z rostlinného extraktu s využitím sloupce Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z.
Použitá metodika a instrumentace
Metodika zahrnovala extrakci sušeného prášku L. japonicus 70% ethanolem při zpětném varu po dobu 2 hodin, následnou filtraci skrze 0,2 μm PTFE membránu a případné naředění acetonitrilem. Separace probíhala na HILIC-Z sloupci (2,1 × 100 mm, 2,7 μm) při 30 °C a průtoku 0,30 mL/min s mobilními fázemi: voda s 10 mM amoniovým octanem a acetonitril. Detekce byla realizována ELSD při teplotách 40 °C (nebulační i odpařovací) a průtoku plynu 1,6 SLM.
Použitá instrumentace
- Agilent 1260 Infinity II binary pump (G7112B)
- Agilent 1260 Infinity II vialsampler (G7129C)
- Agilent 1260 Infinity II multicolumn thermostat (G7116A)
- Agilent 1290 Infinity II ELSD (G7102A)
- Ultralow dispersion kit (5067-5189)
- Agilent OpenLAB software
Hlavní výsledky a diskuse
Byly optimalizovány jak isokratické (90:10 ACN:10 mM amoniový octan, doba běhu 8 min), tak gradientní metody (95→60 % fáze B) s plným rozlišením špičky stachydrinu od ostatních polárních i nepolárních komponent. Chromatogramy potvrdily reprodukovatelnost a vysokou selektivitu metody.
Přínosy a praktické využití metody
Navržená HILIC metoda nabízí rychlou a jednoduchou analýzu stachydrinu přímo z rostlinného extraktu bez složité přípravy, umožňuje rutinní kontrolu kvality bylinných přípravků a je kompatibilní s bezuvovými detektory.
Budoucí trendy a možnosti využití
Očekává se kombinace HILIC s hmotnostní spektrometrií pro pokročilou identifikaci polárních metabolit, automatizace extrakce v online režimu a rozšíření metodiky na vícesložkovou analýzu dalších bioaktivních alkaloidů.
Závěr
Metoda HILIC-Z na sloupci Poroshell 120 prokazuje delší životnost, nízké protitlakové charakteristiky a vysokou selektivitu, což činí analýzu stachydrinu v Leonurus japonicus spolehlivou a efektivní.
Reference
- Rongjie Fu, Adam Bivens. Analysis of Polar Compounds in Plant Material: Quantitation of Stachydrine in Chinese Motherwort by HILIC. Agilent Technologies Application Note 5991-8617EN, 2018.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
HILIC Chromatography: When and How?
2022|Agilent Technologies|Prezentace
HILIC Chromatography: When and How? Golnar Javadi Applications Engineer LC Columns and Consumables Technical Support January 25, 2022 Agenda 1 What is HILIC and when should you consider it? 2 HILIC method development • • 3 Tips and tricks for…
Klíčová slova
hilic, hilicyes, yesmobile, mobilephase, phaseinfinitylab, infinitylabyour, yourcolumn, columnconsider, considerrplc, rplcbest, bestsolubility, solubilitywhen, whensolvent, solventanalytes, analytesretain
Impurity Analysis of Aminoglycoside Antibiotic Using the Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z Column with ELSD Detection
2018|Agilent Technologies|Aplikace
Application Note Small Molecule Pharmaceuticals, Drug Development Impurity Analysis of Aminoglycoside Antibiotic Using the Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z Column with ELSD Detection Authors Abstract Rongjie Fu and Adam Bivens Agilent Technologies, Inc. Aminoglycosides represent a powerful and widely used…
Klíčová slova
ribostamycin, ribostamycinneamine, neamineinfinitylab, infinitylabelsd, elsdlsu, lsuaminoglycoside, aminoglycosideagilent, agilentsulfate, sulfateantibiotic, antibioticvortexers, vortexersphase, phasemultitube, multitubebivens, bivensimpurity, impuritymobile
Chiral Analysis of Sulfur Amino Acids with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Columns
2019|Agilent Technologies|Aplikace
Application Note Pharma & Biopharma Chiral Analysis of Sulfur Amino Acids with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Columns Author William J. Long Agilent Technologies, Inc. Abstract The chiral separation of a series of underivatized aliphatic amino acids was performed using…
Klíčová slova
enantiomers, enantiomerschiral, chiralamino, aminocysteine, cysteinemethionine, methionineacids, acidslsu, lsusulfur, sulfurseparation, separationpurchased, purchasedporoshell, poroshellsuperficially, superficiallycodons, codonsinfinitylab, infinitylabwere
Chiral Analysis of Hydrophobic Amino Acids with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Column
2019|Agilent Technologies|Aplikace
Application Note Pharma & Biopharma Chiral Analysis of Hydrophobic Amino Acids with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Column Author William J. Long Agilent Technologies, Inc. Abstract The chiral separation of a series of underivatized aliphatic amino acids was performed using…
Klíčová slova
chiral, chiralenantiomers, enantiomerslsu, lsuamino, aminoaliphatic, aliphaticacids, acidsseparation, separationporous, porousvaline, valineinteractions, interactionsisoleucine, isoleucineminutes, minutessuperficially, superficiallyalanine, alanineleucine
