Chiral Analysis of Sulfur Amino Acids with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Columns
Aplikace | 2019 | Agilent TechnologiesInstrumentace
Aminokyseliny hrají klíčovou roli v biologických procesech i v průmyslu; chirální formy D- a L-enantiomerů vykazují odlišnou biologickou aktivitu. Schopnost rychle a spolehlivě oddělit tyto enantiomery je zásadní pro farmaceutický výzkum, nutriční doplňky a kontrolu kvality.
Cílem aplikace bylo demonstrovat účinnost Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T kolony pro separaci nederivovaných D- a L-enantiomerů cysteinu a methioninu. Analýza byla provedena v režimu UHPLC s ELSD detekcí a methanol/ammonium formátovým pufrem jako mobilní fází.
Experiment byl realizován na přístrojovém vybavení Agilent 1290 Infinity II LC; separace probíhala na koloně InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T (2,1×100 mm, 2,7 μm). Mobilní fáze: 70 % methanolu a 30 % 25 mM ammonium formátu, pH 3,0. Průtok byl nastaven na 0,21 ml/min, teplota kolony 30 °C, objem injekce 1 μl. Detekce ELSD s teplotou evaporátoru 30 °C a průtokem dusíku 1 SLM.
Bylo dosaženo baseline separace enantiomerů cysteinu i methioninu během 4 minut. Pro cystein byly hodnoty retenčních faktorů k1=0,86, k2=1,50, selektivity 1,75 a rozlišení Rs=4,31. Pro methionin k1=0,84, k2=1,76, selektivita 2,08 a Rs=5,58. Výsledky potvrzují vysokou účinnost a selektivitu glykopeptidové faze na povrchu zrcadlících částic.
Metoda umožňuje:
Očekává se rozšíření aplikace na další chiralní aminokyseliny a malé molekuly, integrace se systémem LC–MS/MS pro strukturální potvrzení a vývoj rychlejších režimů separace kombinujících superficially porous částice a přenosné systémy pro in-line kontrolu kvality.
Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T kolona prokázala vysokou účinnost, stabilitu a spolehlivost při separaci nederivovaných chiralních aminokyselin. Nabízí praktické řešení pro farmaceutickou analytiku i QC laboratoře.
Spotřební materiál, HPLC, LC kolony
ZaměřeníFarmaceutická analýza
VýrobceAgilent Technologies
Souhrn
Význam tématu
Aminokyseliny hrají klíčovou roli v biologických procesech i v průmyslu; chirální formy D- a L-enantiomerů vykazují odlišnou biologickou aktivitu. Schopnost rychle a spolehlivě oddělit tyto enantiomery je zásadní pro farmaceutický výzkum, nutriční doplňky a kontrolu kvality.
Cíle a přehled studie / článku
Cílem aplikace bylo demonstrovat účinnost Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T kolony pro separaci nederivovaných D- a L-enantiomerů cysteinu a methioninu. Analýza byla provedena v režimu UHPLC s ELSD detekcí a methanol/ammonium formátovým pufrem jako mobilní fází.
Použitá metodika a instrumentace
Experiment byl realizován na přístrojovém vybavení Agilent 1290 Infinity II LC; separace probíhala na koloně InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T (2,1×100 mm, 2,7 μm). Mobilní fáze: 70 % methanolu a 30 % 25 mM ammonium formátu, pH 3,0. Průtok byl nastaven na 0,21 ml/min, teplota kolony 30 °C, objem injekce 1 μl. Detekce ELSD s teplotou evaporátoru 30 °C a průtokem dusíku 1 SLM.
- Agilent 1290 Infinity II Flexible Pump
- Agilent 1290 Infinity Autosampler s kapilárním ohřevem
- Agilent InfinityLab Multicolumn Thermostat
- Agilent 1290 Infinity II ELSD detektor
- InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T kolona
Hlavní výsledky a diskuse
Bylo dosaženo baseline separace enantiomerů cysteinu i methioninu během 4 minut. Pro cystein byly hodnoty retenčních faktorů k1=0,86, k2=1,50, selektivity 1,75 a rozlišení Rs=4,31. Pro methionin k1=0,84, k2=1,76, selektivita 2,08 a Rs=5,58. Výsledky potvrzují vysokou účinnost a selektivitu glykopeptidové faze na povrchu zrcadlících částic.
Přínosy a praktické využití metody
Metoda umožňuje:
- rychlou a reprodukovatelnou separaci D/L enantiomerů v běžných reverzně-fázových mobilních fázích,
- kompatibilitu s hmotnostní spektrometrií díky MS-friendly pufru,
- efektivní provoz při nízkém tlaku a krátkých analýzách.
Budoucí trendy a možnosti využití
Očekává se rozšíření aplikace na další chiralní aminokyseliny a malé molekuly, integrace se systémem LC–MS/MS pro strukturální potvrzení a vývoj rychlejších režimů separace kombinujících superficially porous částice a přenosné systémy pro in-line kontrolu kvality.
Závěr
Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T kolona prokázala vysokou účinnost, stabilitu a spolehlivost při separaci nederivovaných chiralních aminokyselin. Nabízí praktické řešení pro farmaceutickou analytiku i QC laboratoře.
Reference
- William J. Long; Chiral Analysis of Sulfur Amino Acids with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Columns; Application Note; Agilent Technologies; září 2019.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
Chiral Analysis of Hydrophobic Amino Acids with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Column
2019|Agilent Technologies|Aplikace
Application Note Pharma & Biopharma Chiral Analysis of Hydrophobic Amino Acids with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Column Author William J. Long Agilent Technologies, Inc. Abstract The chiral separation of a series of underivatized aliphatic amino acids was performed using…
Klíčová slova
chiral, chiralenantiomers, enantiomerslsu, lsuamino, aminoaliphatic, aliphaticacids, acidsseparation, separationporous, porousvaline, valineinteractions, interactionsisoleucine, isoleucineminutes, minutessuperficially, superficiallyalanine, alanineleucine
Chiral Analysis of Aromatic Amino Acids with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Columns
2019|Agilent Technologies|Aplikace
Application Note Pharma & Biopharma Chiral Analysis of Aromatic Amino Acids with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Columns Author William J. Long Agilent Technologies, Inc. Abstract The chiral separation of a series of underivatized aromatic amino acids was performed using…
Klíčová slova
amino, aminochiral, chiralmau, mauacids, acidslsu, lsumin, minphenylalanine, phenylalaninetryptophan, tryptophanporous, porouswere, wereenantiomers, enantiomersaromatic, aromaticunderivatized, underivatizedwavelength, wavelengthaliphatic
Modernizing Chiral Separations with Glycopeptide-Based Chiral Columns
2020|Agilent Technologies|Aplikace
Application Note Pharmaceutical Small Molecules Modernizing Chiral Separations with Glycopeptide-Based Chiral Columns Chiral separation of timolol maleate with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T columns Author William J. Long Agilent Technologies, Inc. Abstract In this application note, the development and optimization…
Klíčová slova
chiral, chiraltimolol, timololformate, formateammonium, ammoniumenantiomers, enantiomersglycopeptide, glycopeptideteicoplanin, teicoplaninmau, maumaleate, maleateionic, ionicseparations, separationspolar, polarphase, phasecsps, cspsseparation
Chiral Analysis of Sodium Lactate with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Columns
2022|Agilent Technologies|Aplikace
Application Note Small Molecule Pharmaceuticals & Generics Chiral Analysis of Sodium Lactate with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Columns Authors William J. Long and Carl Griffin Agilent Technologies, Inc. Introduction Faster separations of enantiomers have become increasingly important in biochemical…
Klíčová slova
chiral, chirallsu, lsulactate, lactatesodium, sodiuminteractions, interactionsmin, minrecognition, recognitionseparations, separationsformate, formateenantiomers, enantiomersammonium, ammoniumseparation, separationcompounds, compoundsphase, phasesolvents
