JP- and EP-Compliant Analysis of Impurities of COVID-19 Drug Dexamethasone

Význam tématu

Dexamethason je kortikosteroid široce využívaný při zánětlivých stavech, včetně závažných respiračních infekcí. Po schválení WHO i Japonskem pro léčbu COVID-19 se zvýšila poptávka po rychlých a spolehlivých metodách hodnocení kvality tohoto léčiva. Kontrola nečistot podle farmakopei je klíčová pro bezpečnost a účinnost finálního přípravku.

Cíle a přehled studie

Studie si kladla za cíl vyvinout a ověřit HPLC metody uspokojivé požadavky Japonské (JP) i Evropské (EP) farmakopeje pro stanovení příbuzných sloučenin a nečistot dexamethasonu. Analýzy byly provedeny na systému Shimadzu Nexera lite podle specifických podmínek obou farmakopei.

Použitá metodika a instrumentace

• Systém: Nexera lite (Shimadzu)
• Kolony:
  • JP: Shim-pack VP-phenyl (250×4,6 mm, 5 µm, phenylované silikagelové plnivo)
  • EP: Shim-pack Scepter C18 (150×4,6 mm, 5 µm, endkapovaný ODS)
• Mobilní fáze:
  • JP: 1,32 g/L amoniového formiátu/pH 3,6 – acetonitril (67:33, izokratická eluce)
  • EP: gradientní eluce s fází A (25 % acetonitril/voda) a fází B (acetonitril), časový program 0–15 min 0 % B, 15–40 min lineárně 0→100 % B, 40,01–55 min 0 % B
• Průtok: JP 1,15 mL/min, EP 1,2 mL/min
• Teplota kolony: JP 25 °C, EP 45 °C
• Objem injekce: JP 10 µL, EP 20 µL
• Detekce: UV 254 nm
• Odběrové lahvičky: 1,5 mL jantarová skleněná v TORAST-H

Hlavní výsledky a diskuse

Obě metody dosáhly požadované separace dexamethasonu a příbuzných sloučenin. V JP metodě se dexamethason elutoval přibližně za 13 min, v EP metodě dle gradientu rozdělení špiček vyhovělo zejména kritérium poměru špička-údolí ≥2 pro betamethason. Systémová vhodnost (počet teoretických destiček, symetrie, %RSD, poměr špička-údolí) splnila všechny testované limity:

• Počet destiček >14000 (min. 5000)
• Symetrie <1,5
• %RSD <0,1 %
• Poměr špička-údolí 4,2 (min. 2,0)

Přínosy a praktické využití

Validated HPLC metody umožňují:

• Zajištění shody s požadavky JP i EP při exportu léčiva
• Rychlou kontrolu kvality a čistoty dexamethasonu
• Minimalizaci rizika nesprávné detekce nečistot

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření metod o hyphenované techniky (LC-MS/MS) pro nižší limity detekce. Další směr představuje automatizace přípravy vzorků a implementace high-throughput analýz v průmyslových podmínkách. V budoucnu lze uvažovat také o validaci metod dle dalších farmakopei (USP, BP) a jejich porovnání.

Závěr

Navržené a ověřené HPLC metody pro analýzu nečistot dexamethasonu plně vyhovují požadavkům japonské a evropské farmakopeje. Použitý Shimadzu Nexera lite systém s adekvátním výběrem kolony a optimalizovanými parametry zaručuje spolehlivou separaci a reprodukovatelnost výsledků.

Reference

1. Ministry of Health, Labour and Welfare, Novel Coronavirus Response Headquarters, Clinical Management of Patients with COVID-19 – A guide for front-line healthcare workers Ver. 2.2, July 17, 2020
2. Japanese Pharmacopoeia 17th Edition, Dexamethasone
3. European Pharmacopoeia 8.8, 01/2014: 0388, Dexamethasone