Developing Purification Strategies for the Agilent 1260 Infinity II Preparative LC/MSD System

Význam tématu

Účinné separační a purifikační strategie jsou základem pro izolaci analyticky i synteticky cenných sloučenin. Moderní kolony s velkým průměrem a kombinace s hmotnostní detekcí umožňují rychlé a přesné dělení komplexních směsí.

Cíle a přehled studie / článku

Technický přehled ukazuje, jak optimalizovat sběr frakcí na systému Agilent 1260 Infinity II Preparative LC/MSD. Představuje nastavení parametrů UV a hmotnostní detekce, pooling a recovery collection s cílem maximalizovat čistotu a výtěžnost.

Použitá metodika a instrumentace

Pro experimenty byl použit modulární preparativní systém Agilent, který zahrnuje:

• Preparative Binary Pump
• Preparative Autosampler
• Variable Wavelength Detector s 0,3mm průtokovou kyvetou
• MS Flow Modulator
• Isocratic Pump
• LC/MSD detektor
• Preparative Open-Bed Fraction Collector
• Preparative Valve-Based Fraction Collector
• Prep C18 kolona 21,2×50 mm, 5 μm
• ZORBAX SB-C18 analytická kolona 4,6×50 mm, 5 μm
• Software OpenLAB CDS ChemStation

Vzorky zahrnovaly řadu modelových sloučenin (acetaminofen, acetylsalicylovou kyselinu, benzokain, parabeny atd.), připravených v rozpouštědlech LC grade.

Hlavní výsledky a diskuse

Byly demonstrovány následující klíčové poznatky:

• Práh UV signálu často nestačí k oddělení špiček při vysokém pozadí organického roztoku.
• Slope trigger (nastavení rychlosti nárůstu a poklesu signálu) zlepšuje rozlišení a zabraňuje nekontrolovanému sběru.
• Kombinace UV a MSD umožňuje selektivní izolaci blízce eluuje-cích sloučenin.
• Výběr iontových forem ([M+H]+, [M–H]–, [M+Na]+) zvyšuje selektivitu masově řízeného sběru.
• Pooling frakcí zjednodušuje zpracování opakovaných injekcí většího objemu.
• Recovery collection zajišťuje záchranu cílových sloučenin při chybné detekci.

Přínosy a praktické využití metody

Demonstrované strategie vedou k robustním a reprodukovatelným purifikacím v akademických i průmyslových laboratořích. Flexibilní nastavení parametrů šetří čas, chemikálie i náklady na optimalizaci metod.

Budoucí trendy a možnosti využití

Vývoj se zaměří na vyšší automatizaci, integraci prediktivních algoritmů a rozšíření detekčního systému o vysoce rozlišené hmotnostní analyzátory. Do popředí se dostávají adaptivní metody řízené umělou inteligencí.

Závěr

Agilent 1260 Infinity II Preparative LC/MSD představuje univerzální platformu pro precizní sběr frakcí. Správné nastavení pražních hodnot, slopes, pooling a recovery collection vede k vysoké čistotě i výtěžnosti izolátů.

Reference

• Agilent InfinityLab LC Purification Solutions, Agilent Technologies Brochure, 2017.
• Rieck F. Time-, Peak-, and Mass-Based Fraction Collection with the Agilent 1290 Infinity II Preparative Open-Bed Fraction Collector, Technical Overview, Agilent Technologies, 2016.