Time-, Peak-, and Mass-Based Fraction Collection with the Agilent 1290 Infinity II Preparative Open-Bed Fraction Collector

Význam tématu

Frakcionace v preparativní kapalinové chromatografii umožňuje izolaci a purifikaci cílových sloučenin ve výzkumu i průmyslu.
Umožňuje optimalizovat výtěžnost, čistotu i efektivitu pracovních postupů v QA/QC, farmaceutickém výzkumu a dalších aplikacích.

Cíle a přehled studie

Cílem přehledu je představit novou generaci přístroje Agilent 1290 Infinity II Preparative Open-Bed Fraction Collector.
Popsány jsou rozšířené režimy frakcionace: časové a špičkové frakcionování, kombinace s MSD, logické AND/OR podmínky a dvě režimy recovery.
Zaměřeno na praktické ukázky nastavení metod a výsledky izolace.

Použitá metodika

Pro ukázky byly použity dvě fáze gradientu s 0,1 % kyselinou mravenčí v H2O a v acetonitrilu, průtok 25 mL/min na preparativní kolonu (21,2 × 100 mm, 5 µm) a 1,5 mL/min na analytickou reanalýzu (4,6 × 50 mm, 5 µm).
Použité režimy frakcionace:

• Časové objemové plátky (21 mL) pro orientační scouting.
• Peak-based s objemovou recovery pro oddělení jednotlivých sloučenin.
• Peak-based s časovými plátky (0,04 min) pro detailní clipping sousedních špiček.
• Peak-based s logickými spouštěči MSD/UV (AND, OR, AND/OR) pro vysokou specifitu.

Použitá instrumentace

Hlavní moduly soustavy:

• Agilent 1260 Infinity II Binary Pump (G7112B)
• Agilent 1260 Infinity Quaternary Pump (G1311B) pro MSD make-up
• Agilent 1260 Infinity Dual-Loop Autosampler (G2258A)
• Agilent 1260 Infinity Diode Array Detector (G1315C)
• Agilent 1290 Infinity II Preparative Open-Bed Fraction Collector (G7159B)
• Agilent Active Flow Splitter (G1968F) s Universal Interface Box II (G1390B)
• Agilent 6150 Single Quadrupole LC/MS s technologií Jet Stream (G6150B)

Hlavní výsledky a diskuse

Scouting gradient v časovém objemovém režimu rozdělil vzorek na 9 frakcí pro přehled rozložení sloučenin.
Peak-based s objemovou recovery izoloval osm sloučenin do samostatných nádob a minimalizoval ztráty vzorku.
Peak-based s časovými plátky umožnil rozdělení špiček 4 a 5 na více dílčích frakcí, přičemž čistota byla ověřena analytickou reanalýzou.
Logická kombinace UV a MSD v AND režimu zajistila vysokou selektivitu, režim AND/OR navíc rozšířil flexibilitu spouštění a rekonstrukce špiček.

Přínosy a praktické využití metody

Volba různých frakčních režimů umožňuje optimalizaci purifikace i při omezeném množství vzorku.
Integrovaná vizualizace časového plánu a náhled frakcí ve softwaru urychluje vývoj a přenos metod.
Pokročilá logika spouštění (AND/OR) zvyšuje specifitu izolace ve složitých matricích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj softwarové podpory pro automatizovanou optimalizaci a prediktivní nastavení frakcionačních parametrů.
Propojení s vysoce výkonnými hmotnostními detektory a online hodnocení čistoty frakcí v reálném čase.
Rozšíření aplikací na micro/semipreparativní režimy a paralelní frakcionaci pro zvýšení throughput.

Závěr

Agilent 1290 Infinity II Preparative Open-Bed Fraction Collector poskytuje robustní a flexibilní řešení pro preparativní HPLC:
vyšší kapacitu, modulární zásuvky, osm kombinovaných režimů frakcionace a rozšířenou logiku spouštění.
Zvyšuje efektivitu, čistotu a výtěžnost purifikačních procesů v akademickém i průmyslovém prostředí.

Reference

• Agilent 1290 Infinity II Preparative Open-Bed Fraction Collector – Collect Each and Every Drop, Agilent Technologies Brochure 5991-7225EN, 2016.
• Rieck F. Performance Characteristics of the 1290 Infinity II Preparative Open-Bed Fraction Collector – Purity and Recovery of Collected Compounds, Agilent Technologies Technical Overview 5991-7655EN, 2016.