Lessons from COVID-19: Verifying Performance of an HPLC/UV method with MS Compatible Conditions for Hydroxychloroquine Sulfate Analysis

Význam tématu

Hydroxychlorochin sulfát je celosvětově využívaný léčivý přípravek s širokým spektrem použití od malárie po autoimunitní onemocnění. Rychlá a spolehlivá analýza tohoto API je klíčová v praktickém vývoji i výrobném provozu léčiv, zejména při časově kritických situacích jako pandemie.

Cíle a přehled studie / článku

Účelem bylo vyvinout a verifikovat moderní HPLC/UV analytickou metodu splňující:

• MS kompatibilní podmínky pufru pro snadnou integraci s hmotnostní spektrometrií
• Zkrácený čas analýzy oproti USP monografii
• Zlepšenou separaci a snížení zádržnosti špiček
• Plnění USP kritérií pro system suitability

Použitá metodika a instrumentace

Metoda využívá chromatograf ACQUITY Arc vybavený UV detektorem při 245 nm a MS kompatibilní pufr na bázi octanu amonného. K identifikaci složek posloužil malý QDa hmotnostní detektor ACQUITY QDa. Během 6minutové analýzy bylo dosaženo optimálního rozlišení hydroxychlorochinu a případných nečistot.

Hlavní výsledky a diskuse

Verifikace podle USP42-NF37 potvrdila:

• Rozlišení mezi hydroxychlorochinem a chloroquinem se zlepšilo o více než 30 % oproti současné monografii
• Průměrná RSD ploch a retencí < 0,1 % při pěti opakovaných vstupech
• Tailing faktor snížený na hodnoty pod 1,2 pro obě látky
• Celková doba běhu redukována na polovinu oproti USP metodě

Integrace MS detekce umožnila okamžitou kvalifikaci vrcholů bez potřeby čistých standardů.

Přínosy a praktické využití metody

Hlavní výhody:

• Rychlejší throughput v kontrolách kvality
• Možnost jednoznačné identifikace neznámých nečistot
• Zvýšená robustnost a reprodukovatelnost výsledků
• Flexibilní přenositelnost do výrobních laboratoří

Budoucí trendy a možnosti využití

Metoda lze adaptovat pro jiné malé molekuly s podobnými vlastnostmi. Zároveň podporuje trend integrace HPLC/UV s jednoduchými MS detektory pro komplexní QC prostředí a rychlé reakce na nové léčebné výzvy.

Závěr

Popsaná HPLC/UV metoda s MS kompatibilními podmínkami výrazně zlepšuje analytickou kapacitu pro hydroxychlorochin sulfát. Díky kratší době analýzy, lepšímu rozlišení a možnosti hmotnostní detekce poskytuje robustní platformu pro výzkum i rutinní kontrolu kvality.

Reference

1. Al-Bari MA. Targeting endosomal acidification by chloroquine analogs as a promising strategy for the treatment of emerging viral diseases. Pharmacol Res Perspect. 5(1):e00293 (2017).
2. Liu J. et al. Hydroxychloroquine, a less toxic derivative of chloroquine, is effective in inhibiting SARS-CoV-2 infection in vitro. Cell Discov. 6, 16 (2020).
3. Kupferschmidt K. Big studies dim hopes for hydroxychloroquine. Science. 368, 1166–1167 (2020). DOI:10.1126/science.368.6496.1166
4. World Health Organization. WHO discontinues hydroxychloroquine and lopinavir-ritonavir treatment arms for COVID-19 (2020).
5. U.S. National Institutes of Health. NIH halts clinical trial of hydroxychloroquine (2020).
6. Mahidol University. COPCOV COVID-19 prophylaxis trial (2020).
7. USP Monograph, Hydroxychloroquine Sulfate Tablets, USP42-NF37 (2020).