Application of HPLC in Quality Analysis of Hydroxychloroquine Sulfate

Význam tématu

Hydroxychlorochin sulfát je dlouhodobě využívaná léčivá látka s antimalarickými a imunomodulačními účinky, indikovaná u řady autoimunitních onemocnění. V době pandemie COVID-19 vzrostl zájem o jeho antivirovou aktivitu vůči SARS-CoV-2.
Kontrola kvality a spolehlivé stanovení obsahu i příbuzných nečistot jsou zásadní pro bezpečnost a účinnost léčiv, a to jak v klinických studiích, tak v rutinní výrobní praxi.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo:

• Vytvořit a validovat chromatografickou metodu pro analýzu hydroxychlorochin sulfátu a jeho nečistot podle Evropského lékopisu (EP10.0).
• Stanovit obsah hydroxychlorochin sulfátu v tabletách podle požadavků USP 43.

Práce je založena na použití moderních UHPLC a HPLC systémů Shimadzu k dosažení vysoké separační účinnosti a reprodukovatelnosti metod.

Použitá instrumentace

• UHPLC systém Shimadzu LC-30A pro EP analýzu.
• HPLC systém Shimadzu LC-2040C 3D pro USP stanovení obsahu.
• Kolony: C18 50×2,1 mm, 1,7 μm (EP assay) a Shim-pack GIST C18 250×4,6 mm, 5 μm (USP assay).
• Software LabSolutions DB ver. 6.87 pro zpracování dat.

Metodika

EP assay:

• Gradientní eluce metanol/bufr (10:90 až 85:15), průtok 0,7 mL/min, teplota kolony 40 °C.
• Injekční objem 4 μL, detekce při 254 nm.

USP assay:

• Izokratická eluce vodou/methanolem/ACN/ortofosforečnou kyselinou se sulfonátem sodným; průtok 1,0 mL/min, teplota kolony 40 °C.
• Injekční objem 20 μL, detekce při 254 nm.

Podmínky přípravy vzorku odpovídají monografii EP i USP.

Hlavní výsledky a diskuse

EP metoda umožnila rozlišení hydroxychlorochinu od nečistot B a C s rozlišením nad 3,0, splňujícím požadavky EP10.0. USP metoda zajistila separaci hydroxychlorochinu a chlorochin fosfátu s rozlišením 3,728 (>1,8) a vynikající reprodukovatelností (RSD ploch <0,1%).
Stanovení obsahu tablet ukázalo průměrnou hodnotu 99,99 % deklarované dávky (RSD 0,04 %), v souladu s limity USP 43 (93–107 %).

Přínosy a praktické využití metody

Metody poskytují účinný nástroj pro:

• Rychlou a spolehlivou kontrolu kvality surovin i hotových tablet.
• Sledování nečistot v souladu s farmacopoeálními specifikacemi.
• Podporu klinických studií i výrobního QA/QC v farmaceutickém průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj UHPLC metod vedoucí k zkrácení analýz, integrace s hmotnostní spektrometrií pro zvýšení selektivity a citlivosti, širší automatizace a implementace principů zelené analytické chemie. Metody lze rozšířit o on-line monitorování (PAT) a adaptovat na vysokokapacitní screening.

Závěr

Vyvinuté chromatografické metody plně splňují monografické požadavky EP10.0 i USP43 pro analýzu hydroxychlorochin sulfátu a jeho nečistot. UHPLC a HPLC systémy Shimadzu prokázaly vysokou separační sílu, přesnost a reprodukovatelnost, což potvrzuje jejich vhodnost pro rutinní kontrolu kvality.

Reference

• Yang Le, Analytical Applications Center, Shimadzu (China) Co., LTD; Application No. LC-199, SSL-CA20-057, May 2020