Sensitive method for the determination of Fipronil and its metabolite Fipronil Sulfone in egg using QuEChERS sample pretreatment and LC-MS/MS detection[LCMS-8060]

Význam tématu

Fipronil je širokospektrální insekticid skupiny fenylpyrazolů používaný v zemědělství i ve veterinární praxi. Regulace EU stanovuje maximální rezidua fipronilu a jeho metabolitu fipronil-sulfonu v vejcích na 0,005 mg/kg, což vyžaduje vývoj citlivých a spolehlivých analytických metod.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout rychlou a citlivou metodu pro stanovení fipronilu a fipronil-sulfonu v matrix vajec pod úrovní stanovenou MRL. Studie kombinuje klasickou QuEChERS extrakci s detekcí pomocí LC-MS/MS v režimu MRM-spectrum pro zvýšení specificity.

Použitá metodika a instrumentace

Pro přípravu vzorků bylo použito 5 g homogenizovaných vajec (bílku a žloutku), extrahovaných acetonitrilem a upravených pomocí komerčního balíčku QuEChERS (sůl pro vysušení a pufrování, následná čistící fáze dSPE). pH vzorku bylo korigováno formiovou kyselinou.
Instrumentace:

• UHPLC: Shimadzu Nexera X2
• Kolona: Raptor Biphenyl 100×2,1 mm, 2,7 μm
• Mobilní fáze A: 2 mM ammonium formiát + 0,002 % formiová kyselina ve vodě
• Mobilní fáze B: 2 mM ammonium formiát + 0,002 % formiová kyselina v methanolu
• MS: Shimadzu LCMS-8060, režim MRM a MRM-spectrum
• Parametry MS: interface 350 °C, DL 150 °C, heat block 300 °C, napětí −3 kV

Hlavní výsledky a diskuse

Lineární odezva pro fipronil a jeho metabolity (fipronil-sulfon, fipronil-sulfid, fipronil-desulfinyl) v rozmezí 0,0005–0,05 mg/kg dosáhla koeficientu korelace R2 > 0,998. Kontrolní vzorky na úrovních 0,001 a 0,01 mg/kg potvrdily opakovatelnost s %RSD pod 10. Použití MRM-spectrum zvýšilo specifitu analýzy a umožnilo knihovní vyhledávání fragmentů.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí rychlou, cenově efektivní a robustní přípravu vzorku s vysokou selektivitou detekce. Je vhodná pro rutinní monitorování reziduí insekticidů v potravinách, QA/QC laboratoře a regulativní kontroly.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se širší aplikace MRM-spectrum na další pesticidy a biologicky aktivní látky, integrace s high-resolution MS, plná automatizace vzorkovací přípravy a rozšíření metodik na různé matrixy (maso, mléko, půda).

Závěr

Popsaná metoda LC-MS/MS s QuEChERS extrakcí splňuje požadavky EU na stanovení fipronilu a fipronil-sulfonu v vejcích pod MRL 0,005 mg/kg. Díky standardnímu nastavení instrumentace je možné ji rychle implementovat bez nutnosti dalšího vývoje.

Reference

EU Commission Regulation No. 1127/2014 amending Annexes II and III to Regulation (EC) No. 396/2005 regarding maximum residue levels for fipronil and other substances.