Effective Workflow for Pharmaceutical API Impurity Analysis using HR- LCMS and Compound Discoverer

Význam tématu

V oblasti farmaceutické analýzy je detailní identifikace nečistot klíčová pro zajištění kvality a bezpečnosti léčiv od vývoje až po výrobu a dohled nad trhem. Vysoká rozlišovací schopnost a citlivost LC-HRMS technologií v kombinaci s pokročilým softwarovým zpracováním umožňuje rychlou a přesnou charakterizaci jak cílených, tak neočekávaných nečistot.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této studie bylo demonstrovat efektivní workflow pro analýzu nečistot Fexofenadinové API. Autorům šlo o ukázku spojení velmi vysokého rozlišení Orbitrap Elite hmotnostního spektrometru s node-based zpracováním v softwaru Compound Discoverer, zahrnující detekci cílených i necílených nečistot.

Použitá metodika a instrumentace

• Sample preparation: Roztok Fexofenadinu (Sigma-Aldrich) v 1:1 acetonitril/voda, koncentrace 0,3 µg/mL.
• Kapalinová chromatografie: Thermo Scientific Accela 1250 pumpa a autosampler, Accucore C18 2,1×150 mm, 2,6 µm; gradient vody, acetonitrilu a vody s 0,05 % hydroxidem amonným (pH 9); průtok 400 µl/min, injekce 5 µl.
• Hmotnostní spektrometrie: Orbitrap Elite s HESI II zdrojem; full-scan MS (120 000) a data-dependent top3 HCD ms/ms (15 000) v ESI pozitivním módu, rozsah 160–1500 amu.
• Data processing: Compound Discoverer – uzly Expected Finder, Compound Generator, FISh Scoring, Unknown Detector, Peak Consolidator a Result Filters.

Hlavní výsledky a diskuse

Workflow umožnilo rychlé získání profilů chromatogramu (base peak chromatogram) a identifikaci více než dvaceti nečistot, včetně očekávaných metabolitů a neočekávaných vedlejších produktů. Uzly FISh Scoring poskytly automatickou fragmentační anotaci a izotopovou věrnost, což výrazně zvýšilo jistotu asignace elementárních vzorců. Nástroj Unknown Detector doplnil profil o struktury nevázané na primární molekulu API.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a spolehlivá detekce cílených i necílených nečistot.
• Node-based editor nabízí flexibilní přizpůsobení zpracování dat podle potřeby laboratoře.
• Automatizované filtrování a konsolidace šetří čas při reportování.
• Metodu lze aplikovat v QA/QC protokolech a podporuje regulční dokumentaci (ICH Q3A/B).

Budoucí trendy a možnosti využití

Vývoj AI-podpořených modulů pro strukturu-ID, integrace cloudových řešení pro sdílení a kolaboraci, rozšíření o multiplatformní datové zdroje (HR-GC-MS, NMR) a propojení s LIMS a elektronickou laboratoří představují další krok k plně automatizované analýze farmaceutických nečistot.

Závěr

Prezentované workflow kombinuje vysoké rozlišení Orbitrap MS a modulární zpracování v Compound Discoverer, čímž přináší robustní, spolehlivou a efektivní platformu pro komplexní analýzu API nečistot.