Seamless transfer of a compendial LC method for impurity analysis of chlorhexidine from an UltiMate 3000 Standard HPLC system to a Vanquish Core HPLC system

Význam tématu

Chlorhexidine digluconate je široce používaná antiseptická látka s významným uplatněním v medicíně i hygieně. Analýza nečistot podle farmakopeálních monografií je klíčová pro zajištění kvality a bezpečnosti léčiv a zdravotnických prostředků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem aplikace bylo předvést plynulý přenos monografické HPLC metody pro analýzu nečistot chlorhexidinu diglukonátu podle Evropské farmakopeje z přístroje UltiMate 3000 Standard SD na platformu Vanquish Core Quaternary.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda vychází z monografie EP č. 0658 a zahrnuje použití těchto komponent:

• Systémy HPLC: Thermo Scientific UltiMate 3000 SD Quaternary a Vanquish Core Quaternary
• Kolona: Thermo Scientific Hypersil GOLD C18, 4,6×250 mm, 5 µm, 175 Å
• Mobilní fáze A: 0,1 % TFA ve vodě/acetonitrilu (80/20, v/v); mobilní fáze B: 0,1 % TFA ve vodě/acetonitrilu (10/90, v/v)
• Gradient: 0–2 min 0 % B, 32–37 min 20 % B, 47–54 min 30 % B, 55–62 min návrat na 0 % B
• Průtok: 1,0 mL/min; teplota kolony 30 °C, autosampler 8 °C
• Detekce: DAD při 254 nm, šířka pásma 4 nm, 5 Hz, odezva 1 s
• Objem injekce: 10 µL; mytí jehly vypnuto
• Software: Thermo Scientific Chromeleon 7.3

Hlavní výsledky a diskuse

Oba systémy poskytly srovnatelné chromatogramy s více než 20 detekovanými stopami, včetně specifických nečistot definovaných v monografii. Rozdíly v retenčních časech byly menší než 1,2 %, RSD ploch špiček dosáhly hodnot do 0,5 % a RSD retenčních časů se zlepšila z maximálně 0,16 % (UltiMate 3000 SD) na méně než 0,03 % (Vanquish Core) díky nižšímu objemu zádržného prostoru a integrovanému pasivnímu předehřívači. Kritéria způsobilosti systému EP (rozlišení L/G >3; poměr peak-to-valley B >2) byla splněna s rezervou (rozlišení ~8; poměr ~6–7).

Přínosy a praktické využití metody

• Zajištění konzistentních výsledků při přechodu na modernější HPLC platformy
• Minimalizace času a nákladů spojených s revalidací metody
• Zvýšená přesnost a opakovatelnost analýz

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření přenosu metod mezi UHPLC a nano-LC systémy
• Automatizace a digitalizace transferu analytických postupů
• Implementace prediktivních nástrojů a umělé inteligence pro optimalizaci chromatografie

Závěr

Přenos HPLC metody EP pro chlorhexidin diglukonát byl úspěšný bez nutnosti úprav parametrů. Vanquish Core HPLC systém poskytl ekvivalentní výsledky s lepším rozlišením a stabilitou retencí, což potvrzuje přínos moderní platformy při zachování farmakopeálních požadavků.

Reference

1. Swartz ME, Krull I. Analytical Method Transfer. LCGC North America. 2006;24(11):1204–1214.
2. Paul C, Grübner M, et al. An instrument parameter guide for successful (U)HPLC method transfer. Thermo Scientific White Paper 72711; 2018.
3. Grübner M. Transfer of an EP method for mebendazole from a Waters Acquity UPLC system to a Vanquish Horizon UHPLC system. Application Note 72939; 2019.
4. Grübner M, Paul C, Steiner F. Method transfer of a USP derived acetaminophen assay from an Agilent 1260 Infinity system to UltiMate 3000 SD and Vanquish Flex UHPLC. Application Note 72717; 2018.
5. European Pharmacopoeia Online, 10th ed. 2018, monograph 0658: Chlorhexidine digluconate solution.
6. World Health Organization. Model List of Essential Medicines, 21st ed.; 2019.
7. United States Pharmacopeia USP42-NF37. Chlorhexidine gluconate solution monograph; 2019.
8. European Pharmacopoeia (Ph. Eur.); 7 Allée Kastner CS 30026, F-67081 Strasbourg, France.
9. Information Leaflet Ph. Eur. Reference Standard: Chlorhexidine for system suitability CRS batch 2; European Pharmacopoeia.