Easy transfer of an EP method for chlorhexidine impurity analysis from a Shimadzu Nexera-i system to a Vanquish Core HPLC system

Význam tématu

Analýza nečistot chlorhexidinu je klíčová pro zajištění kvality antiseptických a dezinfekčních přípravků používaných v medicíně a dentální hygieně. Přenos validovaných HPLC metod mezi různými systémy je nezbytný pro konzistentní výsledky napříč laboratořemi, ať již při rozšíření kapacit, výměně přístrojů nebo mezi R&D a QC odděleními.

Cíle a přehled studie

Studie demonstruje bezproblémový přenos monografní metody Evropského léčebného klínáře (EP) pro stanovení nečistot chlorhexidinu z chromatografu Shimadzu Nexera-i na systém Thermo Scientific Vanquish Core Quaternary HPLC. Důraz je kladen na využití adaptabilního gradient delay volume (GDV) pro minimalizaci odchylek v časech retence bez zásahu do validovaného protokolu.

Použitá instrumentace

• Shimadzu Nexera-i (LC-2040C 3D MT): pumpa, autosampler, kolónová komora, PDA detektor, HPLC flow path
• Thermo Scientific Vanquish Core Quaternary HPLC: pumpa VC-P20-A-01, Split Sampler CT, Column Compartment C, Diode Array Detector, Method Transfer Kit

Použitá metodika

• Kolona: Hypersil GOLD, 4,6×250 mm, 5 µm, 175 Å
• Mobilní fáze A: 0,1 % TFA ve vodě/acetonitrilu (80/20, v/v), B: 0,1 % TFA ve vodě/acetonitrilu (10/90, v/v)
• Gradient: 0–2 min 0 % B; 2–32 min na 20 % B; 32–37 min 20 % B; 37–47 min na 30 % B; 47–54 min 30 % B; 54–55 min návrat na 0 % B; 55–62 min ekvilibrace
• Průtok 1,0 mL/min; teplota kolony 30 °C; autosampler 8 °C
• Detekce UV 254 nm; vzorek 7 µL
• Příprava vzorku: 5 mg referenčního standardu chlorhexidinu v 1 mL fáze A
• Softwarové zpracování: Chromeleon CDS 7.3, Shimadzu LC drivery

Hlavní výsledky a diskuse

Při srovnání chromatogramů obou systémů byly dosaženy ekvivalentní profily nečistot a hlavního piku, s vynikajícími hodnotami rozlišení a poměru vrchol‐dolina nad požadované limity. Vanquish Core poskytl lepší opakovatelnost, s RSD retencí < 0,05 % a RSD ploch < 0,5 %. Absolutní časy retence byly mírně kratší na Vanquish Core vinou výchozího menšího GDV. Zvýšení idle volume meteringu autosampleru z 25 µL na 125 µL vedlo ke snížení průměrného rozdílu časů retence z 0,132 min na 0,051 min.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý a validovatelný přenos EP metody mezi odlišnými systémy
• Zajištění konzistentní kvality výsledků napříč laboratořemi
• Zvýšení přesnosti a opakovatelnosti analýzy
• Minimální zásah do původní metody díky flexibilnímu nastavení GDV

Budoucí trendy a možnosti využití

Vývoj nástrojů pro nastavitelný GDV umožňuje jemné dolaďování chromatografických parametrů bez zásahu do samotné metody. Podobný přístup lze rozšířit na další kompendiální nebo interní metody, usnadnit mezinárodní transfery a akcelerovat uvedení nových instrumentací do rutinního provozu. Kromě GDV mohou hrát roli i další grafitace, termostatické efekty a hydrodynamika přístrojů.

Závěr

Přenos EP metody pro analýzu nečistot chlorhexidinu z Shimadzu Nexera-i na Vanquish Core Quaternary HPLC proběhl úspěšně. Oba systémy dosáhly obdobných chromatografických výsledků, přičemž Vanquish Core vykázal vyšší přesnost. Flexibilní úprava GDV autosampleru potvrdila efektivní nástroj pro minimalizaci časových odchylek bez nutnosti změn validované metody.

Reference

1. Swartz ME; Krull I. Analytical Method Transfer. LCGC North America. 2006;24(11):1204–1214.
2. Paul C; Grübner M. An instrument parameter guide for successful (U)HPLC method transfer. Thermo Scientific White Paper 72711. 2018.
3. Grübner M. Transfer of an EP method for mebendazole from a Waters Acquity UPLC to Vanquish Horizon UHPLC. Thermo Scientific Application Note 72939. 2019.
4. Grübner M; Paul C; Steiner F. Method transfer of a USP derived acetaminophen assay to various systems. Thermo Scientific Application Note 72717. 2018.
5. European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare. European Pharmacopoeia 10th ed., Monograph 0658: Chlorhexidine digluconate solution. 2018.
6. World Health Organization. Model List of Essential Medicines. 21st ed. June 2019.
7. The United States Pharmacopeial Convention. USP42-NF37, Chlorhexidine gluconate solution monograph. 2019.
8. European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare. Information Leaflet Ph. Eur. Reference Standard: Chlorhexidine for system suitability CRS batch 2.
9. Muellner T; Franz H. Physical adjustment of gradient delay volume for successful HPLC method transfer. Thermo Fisher Technical Note 73371.