Easy transfer of an EP method for chlorhexidine impurity analysis from a Shimadzu Nexera-i system to a Vanquish Core HPLC system

Význam tématu

Přenos HPLC metod mezi různými přístrojovými platformami je klíčový pro zabezpečení konzistentní kvality analytických výsledků v laboratořích vývoje i kontroly. Spolehlivý transfer minimalizuje opakované validace, umožňuje efektivnější rozdělení vzorkové zátěže a podporuje modernizaci stávajících systémů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem aplikace bylo předvést přenos evropské farmakopejní (EP) monografické HPLC metody pro analýzu nečistot chlorhexidinu z přístroje Shimadzu Nexera-i na systém Thermo Scientific Vanquish Core Quaternary HPLC. Zvláštní pozornost byla věnována využití nastavitelného objemu zpoždění gradientu (GDV) k přesnému sladění retencí bez zásadních úprav metodických parametrů.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorek: 5 mg EP standardu chlorhexidinu v 1 mL 0,1% TFA ve fázi A.
Chromatografické podmínky:

• Kolona: Hypersil GOLD C18, 4,6×250 mm, 5 µm, 175 Å, 30 °C.
• Mobilní fáze A: 0,1% TFA ve vodě/acetonitrilu 80/20 (v/v), B: 0,1% TFA ve vodě/acetonitrilu 10/90 (v/v).
• Gradient: 0–2 min 0 % B; 2–32 min 0→20 % B; 32–37 min 20 % B; 37–47 min 20→30 % B; 47–54 min 30 % B; 54–55 min 30→0 % B; 55–62 min 0 % B.
• Průtok: 1 mL/min; injekce 7 µL; detekce při 254 nm.

Použitá instrumentace

• Shimadzu Nexera-i (LC-2040C 3D MT, PDA detektor i-series).
• Vanquish Core Quaternary HPLC (Quaternary Pump C, Split Sampler CT, Column Compartment C, Diode Array Detector).
• Chromeleon CDS 7.3 pro akvizici a zpracování dat.

Hlavní výsledky a diskuse

Obě chromatografické platformy poskytly srovnatelné profily nečistot chlorhexidinu s obdobnými relativními retencemi. Vanquish Core HPLC prokázal lepší přesnost retencí (RSD ≤ 0,05 %) a ploch píků (< 0,5 %) než Nexera-i (retence RSD ≤ 0,09 %). Rozdíly v absolutních retencích byly vyvolány mírně menším výchozím GDV na Vanquish Core. Zvýšení objemu systému nastavitelným metrem autosampleru ze 25 µL na 125 µL snížilo průměrné odchylky retencí z 0,132 na 0,051 min. System Transfer Kit umožňuje další rozšíření až na 430 µL.

Přínosy a praktické využití metody

• Snadné zabudování EP metody do moderního HPLC systému bez významných úprav metody.
• Udržení kompliance s farmakopejními požadavky.
• Zvýšená systematická preciznost díky pokročilému hardware Vanquish Core.
• Rychlé sladění retencí v gradientních metodách prostřednictvím nastavitelného GDV.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj automatizace metodických transferů může využít iterativní optimalizaci GDV na základě integrovaných algoritmů. Předvídání a kompenzace termálních vlivů, integrace s LIMS a podpora pokročilých modelů prediktivní chromatografie otevřou cestu k plně digitálnímu workflow v analytické chemii.

Závěr

Přenos EP metody pro analýzu nečistot chlorhexidinu ze systému Shimadzu Nexera-i do Vanquish Core HPLC byl úspěšný, s ekvivalentními chromatogramy a vylepšenou přesností nové platformy. Nastavitelný objem zpoždění gradientu umožňuje rychlé a transparentní sladění retencí bez zásadních změn metodických parametrů.

Reference

1. Swartz M.E.; Krull I. Analytical Method Transfer; LCGC North America 2006, 24(11), 1204–1214.
2. Paul C.; Grübner M. et al. Thermo Scientific White Paper 72711: An instrument parameter guide for successful (U)HPLC method transfer, 2018.
3. Grübner M. Thermo Scientific Application Note 72939: Transfer of an EP method for mebendazole from a Waters Acquity UPLC system to a Vanquish Horizon UHPLC system, 2019.
4. Grübner M.; Paul C.; Steiner F. Thermo Scientific Application Note 72717: Method transfer of a USP-derived acetaminophen assay to Vanquish Flex UHPLC, 2018.
5. European Pharmacopoeia Online, 10th edition 2018, monograph 0658: Chlorhexidine digluconate solution.
6. WHO Model List of Essential Medicines, 21st ed., June 2019.
7. United States Pharmacopeia USP42-NF37, chlorhexidine gluconate solution monograph, 2019.
8. Information Leaflet Ph. Eur. Reference Standard: Chlorhexidine for system suitability CRS batch 2; EDQM.
9. Muellner T.; Franz H. Thermo Fisher Technical Note 73371: Physical adjustment of gradient delay volume for HPLC method transfers.