Straightforward transfer of an EP method for impurity analysis of chlorhexidine from an Agilent 1260 Infinity LC system to a Vanquish Core HPLC system

Význam tématu

Analýza nečistot chlorhexidinu podle monografie Evropské farmakopeje je klíčová pro zajištění kvality a bezpečnosti antiseptických přípravků. Přenos této standardní HPLC metody mezi různými systémy umožňuje zachovat soulad s předpisy při modernizaci vybavení či sdílení analytické zátěže mezi laboratořemi.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo demonstrovat přenesení farmakopeální HPLC metody pro detekci nečistot chlorhexidinu z Agilent 1260 Infinity LC na Thermo Fisher Vanquish Core HPLC. Zvláštní pozornost byla věnována využití nastavitelného gradient delay volume (GDV) nového systému k doladění retenčních časů.

Použitá metodika a instrumentace

Reagencie a podmínky:

• Kolona: Thermo Scientific Hypersil GOLD C18, 4,6×250 mm, 5 µm, 175 Å
• Mobilní fáze A: 0,1 % TFA ve vodě/acetonitrilu (80/20, v/v); B: 0,1 % TFA ve vodě/acetonitrilu (10/90, v/v)
• Gradient: 0–2 min 0 % B; 2–32 min lineárně na 20 % B; 32–37 min 20 % B; 37–47 min na 30 % B; 47–54 min 30 % B; 54–55 min návrat na 0 % B; 55–62 min 0 % B
• Tok: 1 mL/min; teplota kolony: 30 °C; detekce: 254 nm
• Příprava vzorku: 5 mg standardu chlorhexidinu rozpuštěných v 1 mL mobilní fáze A

Instrumentace:

• Agilent 1260 Infinity: kvaternární pumpa G1311B, autosampler G1367E s termostatem, kolonnový termostat G1316A, detektor VWD G1314F
• Thermo Fisher Vanquish Core: System Base VC-S01-A-02, Pump C VC-P20-A-01, Split Sampler CT VC-A12-A-02, Column Compartment C VC-C10-A-03, Variable Wavelength Detector C VC-D40-A-01, Method Transfer Kit

Hlavní výsledky a diskuse

Chromatogramy obou systémů vykázaly téměř identické relativní retenční časy a píky odpovídající monografii EP. Vanquish Core generoval užší píky a o něco vyšší rozlišení (R>8 vs požadované R≥3). Absolutní retenční časy byly o 0,02–0,22 min kratší na Vanquish Core kvůli nižšímu implicitnímu GDV. Nastavením idle volume autosampleru z výchozích 25 µL na 200 µL se rozdíly vyrovnaly a dosažené chromatogramy se shodovaly.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý převod EP HPLC metod mezi různými chromatografickými systémy
• Snížení nároků na opakovanou validaci díky možnosti doladění GDV bez změny metodiky
• Zvýšení flexibility QC laboratoří a efektivní sdílení metodiky mezi pracovišti

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření využití GDV tuningu pro přenos metod USP a dalších farmakopoeálních předpisů, automatizované workflow v rámci LIMS, nástroje pro kompenzaci rozdílů v designu HPLC systémů a pokročilá softwarová podpora pro přenos analytických metod.

Závěr

Přenos HPLC metody pro nečistoty chlorhexidinu z Agilent 1260 Infinity na Vanquish Core byl úspěšný a přímočarý. Oba systémy dosáhly ekvivalentních výsledků v souladu s monografií EP. Možnost snadného doladění GDV u Vanquish Core poskytuje účinné řešení pro minimalizaci rozdílů mezi chromatografickými platformami.

Reference

1. Swartz ME, Krull IG. Analytical Method Transfer. LCGC North America. 2006;24(11):1204–1214.
2. Paul C, Grübner M, et al. Instrumental parameter guide for successful (U)HPLC method transfer. Thermo Scientific White Paper 72711. 2018.
3. Grübner M. Transfer of an EP method for mebendazole from Waters Acquity UPLC to Vanquish Horizon UHPLC. Application Note 72939. 2019.
4. Grübner M, Paul C, Steiner F. Method transfer of USP acetaminophen assay from Agilent 1260 Infinity to Vanquish Flex UHPLC. Application Note 72717. 2018.
5. European Pharmacopoeia. Monograph 0658: Chlorhexidine digluconate solution. Ph. Eur. 10.0; 2018.
6. World Health Organization. Model List of Essential Medicines. 21st List; 2019.
7. The United States Pharmacopeial Convention. USP42–NF37: Chlorhexidine gluconate solution monograph; 2019.
8. European Pharmacopoeia. Information Leaflet: Chlorhexidine for system suitability CRS batch 2.
9. Franz H, Wachinger T, Schmidt C. DE102015112900B4: Method of transferring a method in liquid chromatography. 2015.