Easy transfer of an EP method for chlorhexidine impurity analysis from a Shimadzu Nexera-i system to a Vanquish Core HPLC system

Význam tématu

Chlorhexidin je klíčové antiseptikum s širokým využitím v medicíně a dentální hygieně. Analýza jeho nečistot podle Evropské farmakopeje je zásadní pro zajištění bezpečí a kvality farmaceutických přípravků. Přenos a validace těchto metod napříč různými HPLC systémy umožňuje laboratořím flexibilitu, zvyšuje produktivitu a šetří čas při zachování shody s farmakopejními požadavky.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo demonstrovat jednoduchý a efektivní přenos EP monografické HPLC metody pro analýzu nečistot chlorhexidinu z přístroje Shimadzu Nexera-i na novější systém Thermo Scientific Vanquish Core Quaternary. Studie kladla důraz na zachování chromatografických parametrů, přesnost a opakovatelnost měření, a na využití nastavitelného gradientového zpoždění systému Vanquish Core.

Použitá metodika a instrumentace

• Vzorky: Standard chlorhexidinu se známým obsahem nečistot, připravený v mobilní fázi A dle EP.
• Chromatografické podmínky: Hypersil GOLD C18 kolona (4,6×250 mm, 5 µm), teplota 30 °C, gradientní eluce s TFA v poměru voda/acetonitril podle EP monografie.
• Systémy: Shimadzu Nexera-i (LC-2040C 3D MT) a Thermo Scientific Vanquish Core Quaternary (pumpa, autosampler, kolona, DAD).
• Software: Chromeleon CDS 7.3 pro akvizici a analýzu dat.
• Úpravy: Snížený objem injekce na 7 µL pro Nexera-i, ladění gradientového zpoždění (GDV) u Vanquish Core změnou objemu sondy (25–125 µL).

Hlavní výsledky a diskuse

• Přímé srovnání chromatogramů ukázalo prakticky identické relativní retence nečistot mezi oběma systémy.
• Přesnost retencí (RSD ≤ 0,05 % u Vanquish Core vs. ≤ 0,09 % u Nexera-i) a oblastí píků (RSD < 0,5 %) potvrdila vysokou stabilitu nového systému.
• Standardní kritéria EP (rozlišení párů L/G ≥ 3, P/V poměr nečistoty B ≥ 2) byla významně překročena (rozlišení > 8, P/V ≥ 6).
• Absolute retence byly u Vanquish Core o 0,08–0,26 min kratší než na Nexera-i. Zvýšením GDV objemu sondy na 125 µL se průměrná odchylka snížila ze 0,132 na 0,051 min.
• Možnost dalšího ladění GDV pomocí přenosové sady (200 µL smyčka) podporuje plnou kontrolu nad přenosem metody.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý přenos validované EP metody mezi různými HPLC platformami bez změny klíčových parametrů.
• Zajištění konzistence výsledků a zvýšení kapacity laboratoře díky možnosti provozu více přístrojů se stejnou metodou.
• Vylepšená přesnost a opakovatelnost díky robustní konstrukci a flexibilním GDV nástrojům Vanquish Core.
• Sledovatelnost a auditovatelnost změn v Chromeleon CDS usnadňuje dodržení regulačních požadavků.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření využití nastavitelného GDV pro přenos metod mezi dalšími HPLC a UHPLC systémy.
• Automatizace procesu přenosu pomocí softwarových nástrojů a integrace do LIMS.
• Implementace obdobných přenosů pro další farmakopejní monografie a metody LC-MS.
• Standardizace postupů pro přenositelnost mezi mezinárodními laboratořemi.

Závěr

Přenos EP HPLC metody pro analýzu nečistot chlorhexidinu ze systému Shimadzu Nexera-i na Thermo Scientific Vanquish Core byl úspěšný. Oba systémy poskytly srovnatelné chromatografické výsledky, přičemž Vanquish Core nabídla lepší přesnost. Nastavitelný GDV usnadnil dolaďování retencí, což potvrzuje vhodnost Vanquish Core pro flexibilní a robustní přenos farmakopejních metod.

Reference

1. Swartz M. E., Krull I.: Analytical Method Transfer, LCGC North America 2006.
2. Paul C., Grübner M. et al.: An instrument parameter guide for successful (U)HPLC method transfer, Thermo Fisher White Paper 72711, 2018.
3. Grübner M.: Transfer of an EP method for mebendazole, Thermo Scientific Application Note 72939, 2019.
4. Grübner M., Paul C., Steiner F.: Method transfer of USP acetaminophen assay, Thermo Scientific Application Note 72717, 2018.
5. European Pharmacopoeia 10.0, monograph 0658: Chlorhexidine digluconate solution, EDQM, 2018.
6. Information Leaflet Ph. Eur. CRS: Chlorhexidine for system suitability batch 2, EDQM.
7. Muellner T., Franz H.: Physical adjustment of gradient delay volume, Thermo Fisher Technical Note 73371.