Screening and Low-Level Quantitation of Chloramphenicol in Commercial Honey Samples Using Miniaturized LC/MS System

Význam tématu

Chloramfenikol je mohutné antibiotikum, jehož rezidua v potravinách, zejména v medu, představují zdravotní riziko kvůli možné vzniku aplastické anemie. Regulace Evropské unie stanovuje maximální reziduální limit (MRPL) na 0,3 ng/ml, přičemž analytické metody musejí dosahovat nižších mezí kvantifikace pro spolehlivé monitorování potravinářských vzorků.

Cíle a přehled studie

Cílem prezentovaného posteru je demonstrovat detekci a kvantifikaci chloramfenikolu v komerčních vzorcích medu v nízkých picogramových koncentracích pomocí miniaturizovaného LC/MS systému Agilent Ultivo. Studie ukazuje robustní a citlivé řešení vhodné pro rutinní laboratorní analýzy a potvrzení souladu s legislativou.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda vychází z jednoduché extrakce kapalina–kapalina (LLE) bez nutnosti složité SPE. Jako interní standard byl využit deuterovaný analog CAP-D5 pro kompenzaci variací extrakce a měření.

• Sample preparation: LLE do ethyl acetátu, koncentrace a re-diluce v methanolu.
• Chromatografie: Poroshell EC-C18 (2,1×100 mm, 2,7 µm), gradient vody a methanolu (0–5 min: 95 % vody → 98 % methanolu), průtok 500 µl/min, teplota 50 °C, objem injekce 25 µl.
• MS detekce: Agilent Ultivo LC/TQ, negativní ESI-AJS, nebulizér 35 psi, drying gas 10 l/min (350 °C), sheath gas 12 l/min (400 °C), kapilární napětí 2000 V, fragmentor 90 V, MRM přechody pro CAP a CAP-D5.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje limitu detekce (LOD) 25 ppt a doporučeného kvantifikačního limitu (LOQ) 50 ppt, což představuje šestinásobnou citlivost oproti MRPL EU. Lineární rozsah 50–600 ppt vykázal koeficient determinace R2 = 0,995. Vzorky medu z různých zdrojů prokázaly koncentrace pod MRPL, spíše negativní výsledky. Obnovení analyzovaného množství při spiknutí na úrovni LOQ se pohybovalo mezi 86 % a 120 %, což odpovídá požadavkům na přesnost.

Přínosy a praktické využití metody

• Zajištění vysoké citlivosti a selektivity pro rutinní screening reziduí antibiotik.
• Snížení nákladů a času díky jednoduché LLE bez SPE kroků.
• Vhodné pro potravinářskou kontrolu, akademický výzkum i průmyslovou QA/QC.
• Splnění legislativních požadavků EU a mezinárodních norem pro monitorování medu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další miniaturizace a automatizace přípravy vzorků, rozšíření multi-zbytkových metod na další skupiny antibiotik a integrace s datovými platformami pro vysokoprofilové laboratoře. Vylepšení softwarových nástrojů a adaptace metod na moderní UHPLC systémy posílí throughput a reprodukovatelnost výsledků.

Závěr

Prezentovaná metoda na miniaturizovaném LC/TQ systému poskytuje citlivé, lineární a reprodukovatelné stanovení chloramfenikolu v rozsahu pod stanoveným MRPL. Jednoduchá příprava vzorku a použití interního standardu zaručují robustnost a vhodnost pro rutinní analýzy v potravinářských laboratořích.

Reference

• Scientific Opinion on Chloramphenicol in food and feed, EFSA Journal 2014;12(11):3907.
• Commission Decision 2003/181/EC.
• SANTE/11813/2017.
• Fang Y., et al. Agilent Technologies Application Note 5988-9920EN, 2007.
• Zhao L., et al. Agilent Technologies Application Note 5991-3615EN, 2009.
• Sun J.-L., et al. Agilent Technologies Application Note 5991-0013EN, 2012.