Detection, Confirmation, and Quantitation of Chloramphenicol in Honey

Význam tématu

Chloramfenikol je širokospektré antibiotikum zakázané v potravinách pro toxicitu. Monitorování jeho stop v medu je klíčové pro ochranu zdraví spotřebitelů a zajištění souladu s předpisy. Vysoce citlivé analytické metody podporují důvěru výrobců i regulačních orgánů.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo navrhnout jednoduchý, rychlý a nákladově efektivní postup pro detekci, potvrzení a kvantifikaci chloramfenikolu v medu. Využívá se Agilent 1260 Infinity II LC v kombinaci s Ultivo LC/TQ a extrakce kapalina–kapalina. Cílová limity: LOD 25 ppt, LOQ 50 ppt v matici.

Použitá metodika

• Vzorkování a extrakce: 1 g medu, přídavek interního standardu CAP-d5, přidání 1 mL vody, extrakce 6 mL ethylacetátu, centrifugace, odpaření pod dusíkem, rehydratace v 1 mL směsi voda:metanol 95:5 a filtrace 0,2 µm.
• Kapalná chromatografie: InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 2,1×100 mm, 2,7 µm; gradient 95:5 → 2:98 (voda:methanol) za 2,5 min; průtok 500 µL/min; 50 °C; objem 25 µL.
• Hmotnostní spektrometrie: negativní režim AJS, MRM přechody pro CAP a CAP-d5, optimalizovaná napětí a průtoky sušícího a plášťového plynu.

Použitá instrumentace

• Agilent 1260 Infinity II flexibilní pumpa
• Agilent 1260 Infinity II vialsampler
• Agilent 1260 Infinity II multicolumn thermostat
• Agilent Ultivo LC/TQ s AJS ion source

Hlavní výsledky a diskuse

• Limit detekce (LOD) 25 ppt, doporučený LOQ 50 ppt pro kompenzaci variability matic.
• Lineární odezva v rozmezí 50–600 ppt s R² ≈ 0,995.
• Opakovatelnost pro šesti násobné injekce LOQ s %CV pod 5 %.
• Analýza pěti tržních vzorků ukázala hladiny pod EU-MRPL (300 ppt); spike testy vykázaly návratnost 82–107 %.

Přínosy a praktické využití metody

• Eliminace kroků SPE šetří čas i náklady.
• Vysoká citlivost a robustnost umožňuje rutinní kontrolu medu ve výrobě i komerci.
• Jednoduchá příprava minimalizuje riziko kontaminace a chyb.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na další potravinářské a biologické matrice.
• Integrace automatizovaných extrakčních a online filtračních procesů pro vyšší throughput.
• Vývoj ultrarychlých metod UHPLC s nižší spotřebou rozpouštědel.
• Multiplexní MRM analýzy pro simultánní detekci více reziduí.

Závěr

Navržená metoda založená na extrakci kapalina–kapalina a Agilent Ultivo LC/TQ poskytuje citlivou, přesnou a rychlou analýzu chloramfenikolu v medu. S LOQ 50 ppt splňuje přísné EU normy a je vhodná pro rutinní laboratorní aplikace.

Reference

1. EFSA Journal 2014;12(11):3907.
2. Commission Decision 2003/181/EC.
3. Fang Y. et al. Agilent Technologies Application Note 5988-9920EN, 2007.
4. Zhao L. et al. Agilent Technologies Application Note 5990-3615EN, 2009.
5. Jin-Lan S. et al. Agilent Application Note 5991-0013EN, 2012.
6. SANTE/11813/2017.