Taking Advantage of the Orthogonal Selectivities of Agilent InfinityLab Poroshell 120 C18 Columns for Method Development at High pH

Význam tématu

Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (UHPLC) s povrchově porézními částicemi představuje klíčový nástroj pro separaci složitých směsí látek. Kombinace vysoké účinnosti a nižšího zpětného tlaku usnadňuje rozlišení blízko eluujících špiček, což je zásadní v potravinářských, zemědělských a environmentálních analýzách, zejména při stanovování pesticidů.

Cíle a přehled studie / článku

Autoři demonstrují využití ortogonálních selektivit dvou C18 fázi Agilent InfinityLab Poroshell 120 odolných vůči vysokému pH pro vývoj metod při pH 10. Cílem je optimalizovat rozlišení vzorku 12 pesticidů pomocí jednoduché gradientní metody s amonným formiátem a acetonitrilem.

Použitá metodika a instrumentace

V experimentu byl použit Agilent 1290 Infinity II LC spojený s Ultivo LC/TQ.

• Mobilní fáze: voda, acetonitril, 200 mM amonný formiát upravený na pH 10
• Gradient: lineární přechod k 95 % acetonitrilu za 10 min při konstantě 5 % formiátu
• Průtok: 0,4 mL/min, teplota 30 °C, objem injekce 0,5 µL
• Detekce: LC/MS s ESI ±, režim SIM

Hlavní výsledky a diskuse

Porovnáním dvou odlišných C18 fází (CS-C18 a HPH-C18) se ukázalo, že CS-C18 poskytla lepší rozlišení většiny základních pesticidů. Změna selektivity mezi oběma sloupci vedla k významným posunům pořadí eluovaných látek a ke snížení překryvů špiček. Pro optimální separaci zásadních analytů při vysokém pH se ukázala výhodná chemie povrchově upravených částic CS-C18.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí rychlý skrínink vhodného sloupce pro komplexní směsi pesticidů bez nutnosti hluboké optimalizace složení mobilní fáze. Vysoká odolnost vůči pH 10 rozšiřuje možnosti analýzy zásadních látek, zlepšuje tvar špiček a minimalizuje potlačení signálu při hmotnostní detekci.

Budoucí trendy a možnosti využití

Dalším směrem je vývoj povrchově modifikovaných stacionárních fází pro extrémní pH, rozšíření portfolia selektivních chemikálií a kombinace s dalšími druhy separací (2D-LC). Vznikají také chytré automatizované skriptovací přístupy pro výběr optimálního sloupce na základě prediktivních modelů.

Závěr

Ukázalo se, že výběr specifické C18 fáze při vysokém pH významně ovlivňuje rozlišení pesticidů. Jednoduchý gradient s amonným formiátem a acetonitrilem představuje robustní výchozí bod pro rychlý vývoj metod v UHPLC.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity II LC systém s nízkou disperzí
• Agilent Ultivo LC/TQ s ESI zdrojem
• Agilent InfinityLab Poroshell 120 CS-C18, 2,1×100 mm, 2,7 µm
• Agilent InfinityLab Poroshell 120 HPH-C18, 2,1×100 mm, 2,7 µm

Reference

1. Gratzfield-Hugsen A.; Naegele E. Maximizing Efficiency Using Agilent InfinityLab Poroshell 120 Columns. Agilent application note 5990-5602EN, 2016.
2. Meyer V. R. Practical High-Performance Liquid Chromatography, Wiley, 2004.
3. Mack A. Taking Advantage of the Orthogonal Selectivities of Agilent InfinityLab Poroshell 120 C18 Columns for Method Development at Low pH. Agilent application note 5994-2358EN, 2020.
4. Mack A. Using pH as a Method Development Tool with Agilent InfinityLab Poroshell 120 CS-C18. Agilent application note 5994-2274EN, 2020.