Highly sensitive LC-MS/MS method for the quantification of barnidipine in human plasma, using the SCIEX QTRAP® 6500+ System

Význam tématu

Barnidipin je dlouhodobě působící blokátor kalciového kanálu ze skupiny dihydropyridinů. Jeho plazmatické koncentrace v rámci farmaceutického vývoje dosahují extrémně nízkých hladin (pikogramy na mililitr), což klade vysoké nároky na citlivost bioanalytických metod. Spolehlivá kvantifikace v těchto rozsazích je klíčová pro stanovení farmakokinetických parametrů a bezpečnostní i účinnostní hodnocení léčiva.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo vyvinout a validovat vysoce citlivou LC-MS/MS metodu pro kvantifikaci barnidipinu v lidské plasmě v rozsahu 5 až 8005,88 pg/mL s dosažením limitu detekce (LOD) 0,1 pg/mL. Metoda má splňovat regulační požadavky pro bioanalýzu farmaceutických látek.

Použitá metodika

• Příprava kalibrační křivky v lidské plasmě s koncentracemi od 5 do 8005,88 pg/mL.
• Proteinovou srážkou či extrakcí připravené vzorky nanesené do autosampleru.
• LC separace s optimalizovaným režimem gradientu.
• Detekce v režimu MRΜ (Multiple Reaction Monitoring) pro vybrané přechody barnidipinu.

Použitá instrumentace

• SCIEX QTRAP® 6500+ LC-MS/MS System
• Kapalinový chromatograf spojený s troj-čtvercový hmotnostní spektrometrie (Triple Quadrupole MS/MS)

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala vynikající linearitu kalibrační křivky v uvedeném rozsahu a LOD 0,1 pg/mL v čistém roztoku. Chromatogramy slepé plasmy a standardních vzorků ukázaly nízký šum a dobrou selektivitu. Vztažný interval kvality metody odpovídá regulačním požadavkům. Robustnost metody byla potvrzena opakovanými analýzami a stabilitou analytů během zpracování.

Přínosy a praktické využití metody

• Umožňuje přesné stanovení barnidipinu na úrovních pikogramů, nezbytné pro farmakokinetické studie.
• Vhodné pro toxikokinetické a bioekvivalenční studie v preklinické i klinické fázi.
• Podpora QA/QC procesů v lékové výrobě a výzkumu nových dihydropyridinů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření aplikace citlivých LC-MS/MS metod pro multiplexní analýzy více léčiv současně. Další vývoj může zahrnovat plnou automatizaci přípravy vzorků a integraci s vysoce výkonnými chromatografickými systémy pro zvýšení průchodnosti a reproducibility.

Závěr

Vyvinutá metoda na SCIEX QTRAP® 6500+ poskytuje výjimečnou citlivost a přesnost pro kvantifikaci barnidipinu v lidské plasmě. Splňuje náročné požadavky farmaceutického vývoje a otevírá cesty pro pokročilé biologické a klinické studie.