Analysis of Impurities in Oligonucleotide Therapeutics
Aplikace | 2024 | ShimadzuInstrumentace
V oblasti vývoje oligonukleotidových terapeutik je precizní stanovení nečistot klíčové pro zabezpečení kvality, bezpečnosti a účinnosti léčiva. Kombinace kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií umožňuje vysokou selektivitu, citlivost a spolehlivou identifikaci vedlejších produktů syntézy.
Cílem prezentované studie bylo zavést robustní LC-MS postup pro oddělení a kvantifikaci hlavních nečistot syntetických oligonukleotidů. Studie demonstruje využití bio inertní fází Shim-pack Scepter Claris C18-300 k minimalizaci adhese polyaniontů a dosažení reprodukovatelné analýzy.
V analýze byl použit reverzní fázový gradient s mobilními fázemi na bázi hexafluorizované isopropanolové kyseliny (HFIP) a triethylamoniu (TEA) ve vodě a methanolu. Chromatografické podmínky zahrnovaly průtok 0,3 mL/min, teplotu kolony 60 °C a gradient od 10 do 90 % organické fáze během 20 minut.
Metoda umožnila efektivní separaci cílového produktu (FLP) od nejčastějších nečistot typu n-1, n-3 a n-10 s dobrým rozlišením a reprodukovatelnými retenčními časy. Hmotnostní spektrometrie potvrdila molekulové ionty nečistot a poskytla kvalitativní i semikvantitativní údaje.
Navržená LC-MS metoda nabízí vysokou citlivost, rychlý analytický běh a minimalizaci interakcí oligonukleotidů s povrchem kolony. Je vhodná pro rutinní kontrolu kvality a validaci výrobních procesů oligonukleotidových léčiv.
Očekává se další rozvoj mikročásticových kolón, multimodálního rozlišení a integrace s vysoce výkonnými hmotnostními spektrometry. Automatizace a pokročilé softwarové nástroje přispějí k rychlejší interpretaci komplexních dat.
Prezentovaná reverzní fázová LC-MS metoda s bio inertní clonou Claris C18-300 prokázala spolehlivou analýzu nečistot oligonukleotidových terapeutik a představuje účinný nástroj pro QC v moderní farmaceutické analytice.
LC/MS, LC/SQ, Spotřební materiál, LC kolony, HPLC
ZaměřeníVýrobceShimadzu
Souhrn
Význam tématu
V oblasti vývoje oligonukleotidových terapeutik je precizní stanovení nečistot klíčové pro zabezpečení kvality, bezpečnosti a účinnosti léčiva. Kombinace kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií umožňuje vysokou selektivitu, citlivost a spolehlivou identifikaci vedlejších produktů syntézy.
Cíle a přehled studie
Cílem prezentované studie bylo zavést robustní LC-MS postup pro oddělení a kvantifikaci hlavních nečistot syntetických oligonukleotidů. Studie demonstruje využití bio inertní fází Shim-pack Scepter Claris C18-300 k minimalizaci adhese polyaniontů a dosažení reprodukovatelné analýzy.
Použitá metodika
V analýze byl použit reverzní fázový gradient s mobilními fázemi na bázi hexafluorizované isopropanolové kyseliny (HFIP) a triethylamoniu (TEA) ve vodě a methanolu. Chromatografické podmínky zahrnovaly průtok 0,3 mL/min, teplotu kolony 60 °C a gradient od 10 do 90 % organické fáze během 20 minut.
Použitá instrumentace
- Kapalinový chromatograf Nexera XS inert se sloupkem Shim-pack Scepter Claris C18-300 (100 × 2,1 mm, 1,9 μm)
- Hmotnostní spektrometr LCMS-2050 v negativním režimu ESI/APCI, rozsah m/z 550–2000
Hlavní výsledky a diskuse
Metoda umožnila efektivní separaci cílového produktu (FLP) od nejčastějších nečistot typu n-1, n-3 a n-10 s dobrým rozlišením a reprodukovatelnými retenčními časy. Hmotnostní spektrometrie potvrdila molekulové ionty nečistot a poskytla kvalitativní i semikvantitativní údaje.
Přínosy a praktické využití metody
Navržená LC-MS metoda nabízí vysokou citlivost, rychlý analytický běh a minimalizaci interakcí oligonukleotidů s povrchem kolony. Je vhodná pro rutinní kontrolu kvality a validaci výrobních procesů oligonukleotidových léčiv.
Budoucí trendy a možnosti využití
Očekává se další rozvoj mikročásticových kolón, multimodálního rozlišení a integrace s vysoce výkonnými hmotnostními spektrometry. Automatizace a pokročilé softwarové nástroje přispějí k rychlejší interpretaci komplexních dat.
Závěr
Prezentovaná reverzní fázová LC-MS metoda s bio inertní clonou Claris C18-300 prokázala spolehlivou analýzu nečistot oligonukleotidových terapeutik a představuje účinný nástroj pro QC v moderní farmaceutické analytice.
Reference
- Application News 01-00656 (JP, ENG), Shimadzu Corporation, 2024
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
Analysis of Synthetic DNA
2024|Shimadzu|Aplikace
ERAS-1000-0584 LC-MS Reversed-phase Shim-packTM Series Shim-pack ScepterTM Claris C18-120 584 Analysis of Synthetic DNA Keywords: Oligonucleotides, pharmaceuticals 1. Synthetic DNA [HPLC conditions] (NexeraTM XS inert) Column : Shim-pack Scepter Claris C18-120, 100 mm x 2.1 mm I.D., 1.9 µm*1 Flow…
Klíčová slova
flow, flownexeratm, nexeratmgas, gaspacktm, packtmnebulizing, nebulizingdna, dnashim, shimsynthetic, syntheticinert, inertdrying, dryingheating, heatingreversed, reversedmethanol, methanolinterface, interfacevoltage
Efficient Method Development of Small Interfering RNA by Reversed-Phase Ion-Pair Chromatograph
2023|Shimadzu|Postery
Efficient Method Development of Small Interfering RNA by Reversed-Phase Ion-Pair Chromatography Daiki 1 Fujimura , Yusuke 1 Osaka 1Shimadzu , Corporation Chromatograms measured under the concentration of HFIP (100 and 200 mmol/L) are shown in Fig.5. The result shows that…
Klíčová slova
antisense, antisensescepter, scepterdipea, dipeamau, maushim, shimpack, packsence, sencemmol, mmolclaris, clarisstrand, strandline, lineimpurity, impurityshifted, shiftedoptimal, optimaldaiki
Shim-pack Scepter LC Columns
2026|Shimadzu|Brožury a specifikace
C190-E221E Shim-pack Scepter LC Columns Hybrid Technology for Versatility and Superior Performance Broad pH tolerance (pH 1 to 12*) for use with a wide range of method conditions Eight stationary phases and Three column hardware types for extensive sample coverage…
Klíčová slova
scepter, scepterpfpp, pfppshim, shimselectivity, selectivitypack, packhydrophobic, hydrophobicparticle, particlechemistry, chemistryphenyl, phenylsize, sizesteric, stericmau, maubioinert, bioinertbody, bodydiol
Efficient Method Development of Oligonucleotides by Reversed-Phase Ion-Pair Chromatograph
2023|Shimadzu|Postery
Efficient Method Development of Oligonucleotides by Reversed-Phase Ion-Pair Chromatography P-BPHA13 Shin-ichi Fujisaki1, Risa Suzuki1, Kyoko Watanabe1, Junji Kawakami2, Takao Inoue3, Satoshi Obika4 1Shimadzu Corporation, Kyoto, Kyoto, Japan, 2Konan University, Kobe, Hyogo, Japan, 3National Institute of Health Sciences, Kawasaki, Kanagawa, Japan,…
Klíčová slova
flp, flpline, linemau, mauclaris, clarismin, mininert, inertmultiplied, multipliedgas, gaspump, pumpscouting, scoutingoligonucleotides, oligonucleotidesflowrate, flowrateoligonucleotide, oligonucleotidesystem, systeminertness
