Tools to Assist in Moving Established Methods from an Originator HPLC System to an Alliance™ iS HPLC System

Význam tématu

V laboratořích provádějících analýzy podle metod založených na HPLC je častou výzvou migrace stávajících vysoce validovaných postupů na novější přístrojové platformy. Rozdíly v objemu zdržení (dwell volume) a zpoždění gradientu mohou vést k posunům retenčních časů a ovlivnit opakovatelnost a reprodukovatelnost výsledků. Efektivní přenos metody bez nutnosti ručních úprav gradientní tabulky šetří čas, minimalizuje chyby a zvyšuje spolehlivost dat.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo ukázat použití dvou softwarových nástrojů při převodu gradientní metody pro stanovení diclazurilu ze systému Arc HPLC na systém Alliance iS HPLC. Prvním nástrojem je Intelligent Method Translator App (iMTA) pro automatizované přepisování parametrů metody. Druhým je funkce Gradient Smart Start (možnosti Gradient Start Options), která umožní emulovat nebo kompenzovat rozdíl v objemu zdržení bez úprav gradientní tabulky, pouze posunem startu gradientu vůči injekci.

Použitá metodika a instrumentace

Pro porovnání byla připravena vzorková směs USP Diclazuril System Suitability Mixture v koncentraci 0,5 mg/mL v dimethylformamidu. Metoda z monografie USP byla nejprve prověřena na Arc HPLC Systému (6 replikátů). Následně byl Empower™ instrumentální protokol převeden do systému Alliance iS HPLC System pomocí iMTA a vyvolán Gradient Smart Start k úpravě gradientního zpoždění.

• Měření posunu retenčních časů mezi systémy a výpočet průměrného rozdílu objemu zdržení (359 µL).
• Úprava startu gradientu na Alliance iS HPLC System o 359 µL před injekcí pro kompenzaci rozdílu dwell volume.

Použitá instrumentace

• Arc HPLC System s detektorem 2489 UV/Vis
• Alliance™ iS HPLC System s TUV detektorem
• Chromatografický software Empower™ 3.7.0
• Kolona XSelect™ HSS T3, 3,5 µm, 4,6 × 100 mm
• UV detekce při 230 nm
• Pufr: 6,3 g amonného formiátu v 1000 mL vody, pH 4,0
• Mobilní fáze A: ACN:voda:pufr (3:15:2), B: ACN:voda:pufr (85:5:10)
• Vstřikovací objem: 5 µL, průtok 1,0 mL/min, teplota kolony 35 °C

Hlavní výsledky a diskuse

Před úpravou gradientu se retenční časy sedmi analytů lišily mezi systémy o 0,324–0,408 min (průměrný posun 0,359 min, cca 2,6 %). Po aplikaci kompenzace gradient startu na Alliance iS byly posuny sníženy na 0,02–0,06 min (průměrně 0,03 min, cca 0,22 %), což potvrzuje možnost přesného sladění časů eluce bez zásahu do gradientní tabulky. iMTA současně eliminoval riziko překlepů a nesouladů při manuálním přepisování metod.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda přináší významné časové úspory a snižuje manuální chybovost při převodu metod mezi HPLC systémy. Umožňuje zachovat validované postupy v souladu s regulačními standardy (USP <621>), aniž by bylo nutné měnit gradientní profily, což je klíčové pro laboratoře s nároky na vysokou kvalitu a auditovatelnost dat.

Budoucí trendy a možnosti využití

Automatizované nástroje pro migraci metod se pravděpodobně rozšíří v rámci propojených cloudových platforem a LIMS systémů. V budoucnu lze očekávat využití umělé inteligence pro optimalizaci gradientních profilů, rozšíření těchto nástrojů pro UHPLC a další techniky kapalinové chromatografie a možnost vzdáleného monitoringu a prediktivní údržby HPLC systémů.

Závěr

Využití Intelligent Method Translator App a Gradient Smart Start ve spojení s Alliance iS HPLC System významně zjednodušuje a zpřesňuje přenos gradientních metod mezi HPLC platformami. Automatizovaný přepis parametrů a emulace dwell volume minimalizují rozdíly v retenčních časech na úroveň desetin minut, čímž zvyšují efektivitu, spolehlivost a shodu s regulačními požadavky.

Reference

1. Hong P., Andrews R., Beals P.C., McConville P.R. Simplifying Method Transfer: Novel Tools for Replicating your Established Methods on an ACQUITY Arc System. Waters Application Note 720005469, červenec 2015.
2. United States Pharmacopeia Chapter <621> Harmonization Standards.
3. USPNF Monograph Diclazuril Assay M24944, DOI: 10.31003/USPNF_M24944_02_01.