Determination of Limonin in Citrus Flour by Time of Flight (TOF) LC/MS

Význam tématu

Citrusová vlákna a moučky se stále více využívají jako přírodní přísady v potravinářských aplikacích díky svým funkčním vlastnostem. Limonin je klíčovým indikátorem kvality těchto produktů a ovlivňuje jejich hořkost a stabilitu.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout robustní spektrometrickou metodu pro kvantifikaci limoninu v citrusové moučce. Metoda využívá kapalinovou chromatografii v kombinaci s hmotnostní spektrometrií časového letu (LC/ToFMS) a hodnotí linearitu, přesnost a vliv matrice.

Použitá metodika

Vzorek citrusové moučky byl extrahován s vodou a acetonitrilem pomocí QuEChERS pufru. Následoval disperzní solid-phase clean-up. Chromatografie probíhala na Agilent EC-C18 koloně (3×100 mm, 2.7 µm) při 30 °C. Mobilní fáze A byla voda s 0.1 % kyselinou mravenčí, mobilní fáze B methanol, gradient od 95:5 na 5:95 během 10 minut a doba běhu celkem 15 minut. Hmotnostní spektrometr pracoval v režimu DUAL ESI positive ve scanovacím rozsahu m/z 100–1700.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity II LC s multisamplerem a EZ-Flex pumpou
• Agilent 1260 Infinity II multikolonní termostat
• Agilent 6230B Time of Flight MS
• Software Agilent MassHunter verze 11

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala v acetonitrilu linearitu v rozsahu 12,5–1250 ppm (R² = 0,9991) se sklonem 1810 a v matrix rozsahu 50–750 ppm (R² = 0,9979) se sklonem 2931. Rozdíl sklonů kalibrací (~62 %) signalizuje významný vliv matricového efektu. Průměrná přesnost byla 99,24 % pro standardní roztoky a 100,61 % pro vzorky v matrix, s relativní odchylkou (RSD) 2,97 % a 3,51 %.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje spolehlivou kontrolu kvality citrusových vláken v potravinářských výrobcích a přesné stanovení koncentrací limoninu, které ovlivňují chuť a stabilitu výrobků. Je vhodná pro QA/QC laboratoře i pro výzkumné aplikace při vývoji rostlinných náhrad a nápojů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření vysokorozlišovací TOF MS pro simultánní profilování dalších limonoidů a komplexních matric. Automatisace clean-up kroků a rozvoj multi-analyzových metod posílí uplatnění ve výrobních a kontrolních procesech potravinářského průmyslu.

Závěr

Vyvinutá LC/ToFMS metoda poskytuje rychlou, přesnou a reprodukovatelnou kvantifikaci limoninu v citrusové moučce. Splňuje požadavky linearity, citlivosti i robustnosti pro rutinní analýzu v potravinářském sektoru.

Reference

• Gualdani R, Cavalluzzi MM, Lentini G, Habtemariam S. The Chemistry and Pharmacology of Citrus Limonoids. Molecules. 2016;21(11):1530.
• USDA ARS. Citrus fiber extraction overview. 2005.
• PubChem. Limonin. US National Library of Medicine; 2022.