Determination of Limonin in Citrus Flour by Time of Flight (TOF) LC/MS

Význam tématu

Analýza limoninu v citrusovém prášku je klíčová pro kontrolu kvality potravinářských a rostlinných surovin, zejména při výrobě vegan produktů, kde citrusová vláknina nahrazuje pojiva a stabilizátory. Určení obsahu limoninu zajišťuje jednotnou chuťovou kvalitu a bezpečnost výrobků.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem bylo vyvinout a validovat kvantitativní metodu pro stanovení limoninu v citrusovém prášku pomocí kapalinové chromatografie spojené s TOF hmotnostní spektrometrií. Studie demonstruje linearitu, preciznost, přesnost a robustnost metody v reálných matricích.

Použitá instrumentace

• Kapalinový chromatograf Agilent 1290 Infinity II (multisampler G7129B, pumpa G7104A, termostat G7116A)
• Time-of-Flight hmotnostní spektrometr Agilent G6230B
• Řídicí a zpracovatelský software Agilent MassHunter v.11
• Analytický sloupec Agilent EC-C18, 3×100 mm, 2,7 µm (p. č. 695975-302)

Použitá metodika

1. Odběr: 1 g citrusového prášku.
   
   • Přidat 10 ml vody a 10 ml acetonitrilu + ekstrakční sáček QuEChERS (p. č. 5982-0650).
   • Vortex 5 min, odstředit při >3200 rcf, 5 min.
2. Čištění: 1 ml supernatantu do dispersního kitu (p. č. 5982-0028), vortex 30 s, odstředit >3000 rcf, 5 min, 500–600 µl do autosampleru.
3. Chromatografické podmínky:
   
   • Teplota kolony 30 °C, objem injekce 0,1 µl, průtok 0,6 ml/min
   • Gradient: voda + 0,1 % HCOOH (95 → 5 %), methanol (5 → 95 %) během 15 min + 5 min post-run
4. TOF-MS podmínky:
   
   • ESI pozitivní režim, teplota plynu 350 °C, průtok sušicího plynu 8 l/min, tlakově 60 psi
   • Kapilární napětí 3500 V, fragmentor 380 V, skimmer 140 V, m/z 100–1700, rychlost akvizice 1 spektrum/s

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivky v acetonitrilu (12,5–1250 ppm) měly R2 = 0,9991, v matrici citrusového prášku (50–750 ppm) R2 = 0,9979. Rozdíl 62 % mezi směry naznačuje významný matrický efekt. Preciznost metodiky v acetonitrilu vykázala RSD 0,39 % a průměrnou přesnost 99,24 %; v matrici RSD 2,6 % a průměrnou přesnost 100,6 %.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje rychlé, spolehlivé a kvantitativní stanovení limoninu v potravinářských a rostlinných matricích. Umožňuje výrobním i kontrolním laboratořím sledovat chuťové a bezpečnostní parametry produktů obsahujících citrusovou vlákninu.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření analýzy na další limonoidy a doprovodné sloučeniny v citrusových produktech.
• Automatizace vzorkování a přípravy pro vysokokapacitní screening.
• Integrace s datovými platformami pro komplexní kontrolu kvality biopotravin.

Závěr

Validated metoda LC/TOF-MS na stanovení limoninu v citrusovém prášku prokázala vynikající linearitu, preciznost a přesnost. Technika nabízí robustní řešení pro potravinářský průmysl i výzkumné laboratoře zaměřené na rostlinné suroviny.

Reference

1. Gualdani R, Cavalluzzi MM, Lentini G, Habtemariam S. The Chemistry and Pharmacology of Citrus Limonoids. Molecules. 2016;21(11):1530.
2. USDA Agricultural Research Service. Citrus fiber properties. agresearchmag. 2005.
3. PubChem. Limonin. US National Library of Medicine. 17 December 2022.