MODERNIZING BIOTHERAPEUTIC COMPENDIAL METHODS WITH A NEXT-GENERATION HPLC SYSTEM

Význam tématu

Rostoucí požadavky na rychlost a rozlišení v oblasti bioterapeutik vedou k aktualizaci farmakopejních metod HPLC, které byly navrženy pro starší systémy s většími částicemi a vyšší disperzí.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo demonstrovat modernizaci farmakopejních metod USP 129 pro SEC a USP 121.1 pro peptide mapping pomocí systému Alliance iS Bio HPLC s technologií MaxPeak HPS a jemnějšími částicemi kolony.

Použitá metodika a instrumentace

Srovnání starého HPLC systému a Alliance iS Bio HPLC System s průměry kolony 7,8 mm a 4,6 mm ID a částicemi 2,5 μm pro SEC a kolony 2,5 μm, 4,6 × 50 mm pro RPLC peptide mapu.

Použitá instrumentace

• Alliance iS Bio HPLC System s bio-inertními cestami průtoku a technologií MaxPeak HPS
• XBridge Premier Protein SEC Columns, 250 Å, 2,5 μm, 4,6 × 150 mm a 7,8 × 150 mm
• XSelect Premier Peptide CSH C18 Column, 130 Å, 2,5 μm, 4,6 × 50 mm

Hlavní výsledky a diskuse

• SEC metoda: 4× zkrácení doby analýzy při zachování rozlišení nízkomolekulárních nečistot s 7,8 mm kolónou.
• Snížení spotřeby vzorku a mobilní fáze 6× s 4,6 mm kolónou.
• Peptidová mapa insulinu: zkrácení gradientu z 50 na 12,5 minut, splnění kritérií rozlišení (≥ 3,4) a peak tailingu (≤ 1,5).

Přínosy a praktické využití metody

Modernizované metody poskytují výrazné zkrácení doby analýzy, snížení spotřeby mobilní fáze a vzorku a zároveň udržují nebo zlepšují analytické parametry, což usnadňuje QC workflow v biopharmaceutickém průmyslu.

Závěr

Alliance iS Bio HPLC System umožňuje adaptaci farmakopejních metod na moderní nároky v oblasti bioterapeutik díky nižší disperzi systému, bio-inertnímu provedení a schopnosti pracovat s částicemi velikosti 2,5 μm.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další vývoj bio-inertních materiálů, menších částic a vyšších systémových tlaků, které povedou k dalšímu zkrácení analýz, úsporám nákladů a vyšší propustnosti laboratoří.

Reference

• USP Chromatography 621, USP-NF, 2022
• USP Physicochemical Analytical Procedures for Insulins 121.1, USP-NF, 2016
• Bigos P, Birdsall RE, Nyholm K. Modernizing Compendial SEC Methods for Biotherapeutics Using the Alliance iS Bio HPLC System. Waters Application Note, 2024