Transfer of an EP method for mebendazole from a Waters Acquity UPLC system to a Vanquish Horizon UHPLC system

Význam tématu

Analýza mebendazolu a jeho nečistot je klíčová pro zajištění kvality a bezpečnosti antiparazitických léčiv v souladu s požadavky Evropské farmakopeje.
Přenos chromatografických metod mezi různými LC systémy je běžnou praxí, avšak vyžaduje pečlivé vyhodnocení vlivu přístrojových rozdílů, zejména termostatování kolony a gradientních objemů.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo demonstrovat převod EP metody pro analýzu nečistot mebendazolu z Waters Acquity UPLC systému na Thermo Scientific Vanquish Horizon UHPLC systém.
Studie zahrnovala porovnání chromatografických parametrů, kvality separace a možnosti zrychlení metody na UHPLC podmínky při zachování farmakopeálních kritérií.

Použitá metodika

Pro HPLC byla použita kolona Hypersil GOLD 4,6 × 100 mm, 3 µm, gradient 20–90 % acetonitrilu v 25 min a průtok 1,2 mL/min při 40 °C.
Pro UHPLC byla zvolena kolona Hypersil GOLD 2,1 × 50 mm, 1,9 µm, lineární gradient 20–90 % B v 3,9 min a průtok 0,8 mL/min při 40 °C.
Vzorky připravené v DMF s referenčními standardy API a nečistot A–G byly injektovány při objemu 5 µL (HPLC) a 1 µL (UHPLC).

Použitá instrumentace

• Pumpa Waters Acquity Binary Solvent Manager a Thermo Vanquish Horizon Binary Pump H
• Autosampler Waters Sample Manager a Vanquish Horizon Split Sampler HT
• Kolonový termostat Waters High Temperature Column Heater a Vanquish Horizon Column Compartment H
• Detektor UV Tunable Ultraviolet Detector a Vanquish Horizon Variable Wavelength Detector F
• Řídicí software Chromeleon 7.2.9 CDS

Hlavní výsledky a diskuse

Převod metody bez úprav vedl k drobným posunům absolutních retenčních časů (−4 až −7 %) na UHPLC i HPLC podmínkách, relativity však zůstaly v souladu s monografií.
Úprava efektivní teploty kolony na Vanquish systému (35–36 °C) kompenzovala rozdíly v preheatingu a umožnila sladění retenčních časů do 0,5 %.
RSD ploch nečistot kleslo pod 0,5 % a poměr signál/šum se mírně zlepšil díky užší eluci a vyšší datové rychlosti UHPLC.
Zrychlení metody přineslo 84% úsporu času a 90% úsporu spotřeby elučních fází.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje flexibilní přenos EP monografie mezi přístroji různých výrobců s minimálními zásahy.
Optimalizace termostatování a rychlostní škálování přispívají k vyšší produktivitě a nižší spotřebě rozpouštědel v kontrolních laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozšíření online nástrojů pro automatické přepočty gradientů a termostatování usnadní validaci metod mezi platformami.
Potenciál adaptivního řízení teploty a reálného měření teploty kolony může dále zvyšovat reprodukovatelnost chromatografie.
Očekává se, že farmakopeální autority časem umožní oficiální povolení moderních UHPLC variací monografií.

Závěr

Studie potvrdila, že převod EP metody pro mebendazol mezi Acquity UPLC a Vanquish Horizon UHPLC je možný s velmi nepatrnými odchylkami po úpravě teploty.
Významné zrychlení analýzy a úspora eluční fáze podtrhují praktický přínos této strategie pro farmaceutickou kontrolu kvality.

Reference

• Swartz M. E., Krull I.: Analytical Method Transfer, LCGC North America 2006, 24(11), 1204–1214.
• Ermer J. et al.: The transfer of analytical procedures, J. Pharm. Biomed. Anal. 2013, 85, 262–276.
• Thermo Scientific White Paper 72711: LC method transfer guide, 2018.
• Grübner M., Paul C.: Application Note 72716: Method transfer acetaminophen, 2018.
• Grübner M., Paul C.: Application Note 72717: Method transfer USP acetaminophen, 2018.
• European Pharmacopoeia 9.5, monograph 0845: Mebendazole, 2018.
• WHO Model List of Essential Medicines, 20th edition, 2017.
• USP41-NF36, Mebendazole monograph, 2018.
• Ph. Eur. chapter 2.2.46 Chromatographic separation techniques, 2018.
• Online HPLC method transfer calculator Thermo Fisher Scientific.