Determination of Hormones in Fish (Carassius Carassius) by SampliQ- OPT Solid Phase Extraction with High Performance Liquid Chromatography

Význam tématu

V současné době je zajištění bezpečnosti potravin klíčové pro ochranu lidského zdraví. Rezidua hormonů ve vodních organismech mohou při dlouhodobé expozici vést k vážným zdravotním problémům, včetně hormonálních poruch a karcinogenity. Metody spolehlivé detekce a kvantifikace těchto látek jsou proto nezbytné pro monitorování kvality potravin a dodržování legislativních limitů.

Cíle a přehled studie

Cílem tohoto přípravku bylo optimalizovat jednoduchou a robustní analytickou proceduru pro extrakci šestnácti hormonů z masa línka obecného (Carassius carassius) a jejich následnou kvantifikaci pomocí HPLC. Studie se zaměřila na validaci metody z hlediska lineárního rozsahu, detekčních limitů, obnovy a opakovatelnosti.

Použitá metodika a instrumentace

Pro extrakci a čištění vzorků byla použita cartridge Agilent SampliQ OPT (60 mg, 3 mL) se sorbentem kombinujícím hydrofilní a lipofilní vlastnosti. Analytická část probíhala na HPLC Agilent 1200 Series s kolonkou ZORBAX Eclipse Plus C18 (250 mm × 4,6 mm, 5 µm) a detekcí DAD při vlnové délce 230 nm.

• Příprava vzorku: homogenizace 200 g masa, extrakce 1 g v methanolu ultrazvukem, centrifugace.
• SPE čištění: aktivace methanolem a vodou, nanesení extraktu, promytí 30 % methanolu, eluce methanolem, koncentrování a přečištění 0,45 µm PTFE filtrem.
• HPLC separace: gradient voda–acetonitril (70:30 až 20:80) při průtoku 1,0 mL/min, teplota 18 °C, objem injekce 5 µL.

Hlavní výsledky a diskuse

Stanovená lineární závislost byla v rozsahu 1–100 mg/kg se součinitelem R² ≥ 0,9996. Detekční limity dosahovaly hodnot 0,2–1,0 mg/kg. Obnova hormonů se pohybovala mezi 76,2 a 106,1 % při relativních směrodatných odchylkách 1,7–8,9 %. Minimální matriční interference potvrdily chromatogramy blanku, standardu a vzorku obohaceného na 2 mg/kg.

Přínosy a praktické využití metody

Tato metoda nabízí vysokou citlivost, reprodukovatelnost a široký rozsah detekovaných hormonů v jednom běhu. Díky jednoduchému formátu SPE cartridge lze proces snadno implementovat v rutinních laboratořích pro kontrolu reziduí v rybích produktech a v souladu s předpisy o potravinářské bezpečnosti.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit o další skupiny environmentálních kontaminantů, automatizovat SPE proces v systémových modulech a aplikovat ji na různé matrice (mléko, maso, vodní prostředí). Dále se nabízí integrace s hmotnostní detekcí pro zvýšení selektivity a nižších detekčních limitů.

Závěr

Optimalizovaná procedura spojující SampliQ OPT SPE a HPLC C18 poskytuje spolehlivé stanovení šestnácti hormonů v mase línka. Metoda prokázala vynikající obnovy, přesnost i citlivost vhodné pro rutinní analýzy v oblasti bezpečnosti potravin.

Reference

• Zhai, C.-H.; Zou, Y.; Jin, R.-N. Determination of Hormones in Fish (Carassius carassius) by SampliQ-OPT SPE with HPLC. Agilent Technologies Application Note, 2009.