Determination of 58 Glucocorticoids in Milk

Význam tématu

Analýza reziduí glukokortikoidů v potravinách živočišného původu je zásadní pro ochranu veřejného zdraví a plnění mezinárodních i národních norem. MRL (maximální reziduální limity) v mléce a mase jsou přísně regulovány, např. v Číně stanovuje norma GB 31650-2019 horní mez 0,3 μg/kg pro betamethason a dexamethason v mléce. Rozvoj efektivních metod umožňuje rychlejší a spolehlivější kontrolu bezpečnosti potravin, minimalizuje spotřebu organických rozpouštědel a zjednodušuje workflow v laboratořích QA/QC.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo vyvinout a validovat vícenásobnou analytickou metodu pro simultánní stanovení 58 glukokortikoidů v kravském a kozím mléce. Metoda kombinuje modifikovanou QuEChERS extrakci, pasážovou čistící kazetu Agilent Captiva EMR–Lipid HF pro odstranění lipidů a LC/MS/MS detekci. Autoři demonstrovali, že jsou splněny požadavky na limity kvantifikace, výtěžnost a reprodukovatelnost.

Použitá metodika a instrumentace

Průběh vzorkování a přípravy:

• Odvážení 5 g mléka + 10 mL acetonitrilu, QuEChERS extrakční sůl, homogenizace, odstředění.
• Přídavek vody, pasáž přes 6 mL kazety Captiva EMR–Lipid HF, gravitace a tlak 10 psi.
• Koncentrace eluátu, rekonstituce v ACN/voda 20:80 a filtrace 0.2 μm PTFE.

Instrumentace:

• Agilent 1290 Infinity II LC
• Agilent 6470B tříkvadrupólový LC/MS
• InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 kolona (3.0 × 100 mm, 2.7 μm)
• Mobilní fáze A: voda + 0.1 % kyseliny mravenčí + 1 mmol/L NH₄F, B: acetonitril
• ESI (+), dMRM režim, teplota zdroje 300–350 °C, napětí 3 500 V

Hlavní výsledky a diskuse

Čistící kazety Captiva EMR–Lipid HF významně zkrátily čas pasáže extraktu pod 25 min u většiny potravinových matic oproti konkurenčním produktům (úspora až 50 %). Srovnání odstranění maticových interferencí (suchá rezidua, GC/MS screening) potvrdilo srovnatelné či lepší výsledky než u stávajících kazet. Přidání 1 mmol/L NH₄F do mobilní fáze zvýšilo citlivost detekce glukokortikoidů až několikanásobně. Metoda vykázala lineární kalibrační křivky s R² > 0.99. Limity kvantifikace dosáhly 0.2 μg/kg pro 47 sloučenin a 2 μg/kg pro zbývajících 11. Výtěžnost se pohybovala v rozmezí 90–109 % a RSD 1.2–14.0 %.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda výrazně zkracuje a zjednodušuje přípravu vzorku, snižuje spotřebu rozpouštědel a umožňuje robustní vícenásobné stanovení široké škály glukokortikoidů. Využití nachází v potravinářských laboratořích, regulačních agenturách a průmyslovém QA/QC pro rutinní monitoring reziduí v mléce a dalších živočišných produktech.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj pasážových sorbentů s vyšší kapacitou pro extrakci tuků a integrovanými mechanismy selektivního záchytu cílových molekul. Kombinace s vysokorychlostními LC systémy a automatizovanými robotickými platformami zrychlí analýzu a umožní real-time kontrolu kvality ve výrobě. Rozšíření validace na další skupiny léčiv a anti-dopingové aplikace přispěje k širšímu využití této platformy.

Závěr

Popsaná metoda nabízí rychlý, spolehlivý a vysoce výkonný postup pro stanovení 58 glukokortikoidů v mléce, splňuje legislativní požadavky na citlivost, výtěžnost i opakovatelnost a zjednodušuje laboratorní workflow.

Reference

• Food and Agriculture Organization of the United Nations. FAOLEX Database: National Food Safety Standard – Maximum Residue Limit for Veterinary Medicines in Foods (GB 31650—2019).
• China Ministry of Agriculture Announcement No. 1031-2-2008: Determination of Multiresidue Glucocorticoid Drugs in Animal-Origin Foods by LC/MS/MS.