A High-Throughput Method for the Analysis of 13 Antiretroviral Compounds Using a UHPLC Column and System Combination

Význam tématu

Rychlá a spolehlivá analýza antiretrovirálních léčiv je klíčová pro monitorování kvality léčivých přípravků a podpůrné studie farmakokinetiky. Vysokoprůtokové chromatografické metody zkracují dobu analýzy, zvyšují propustnost laboratoře a zajišťují včasné rozhodování v klinické praxi.

Cíle a přehled studie

Studie si klade za cíl ukázat výhody použití kombinace kolony Hypersil GOLD VANQUISH 1,9 µm a UHPLC systému Vanquish pro rychlou separaci 13 antiretrovirálních látek. Dále jsou představeny zkrácené metody pro analýzu několika běžných fixních kombinací léčiv.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci byla využita UHPLC kolona Hypersil GOLD VANQUISH (1,9 µm, 50 × 2,1 mm) při teplotě 40 °C. Mobilní fáze A tvořila voda s 0,1 % kyselinou mravenčí, mobilní fáze B methanol s 0,1 % kyselinou mravenčí. Metody A–D se lišily délkou gradientu (celkově 2,4 min, 1,6 min a 0,7 min) a průtokem (1,0–1,2 mL/min). Detekce probíhala pomocí UV při 254 nm.

Použitá instrumentace

• Vanquish UHPLC System – System Base, Binary Pump H, Split Sampler HT, Column Compartment H, Active Pre-heater
• Diode Array Detector HL se LightPipe flow cell (10 mm)
• Virtuoso Vial Identification System pro označování vial
• Software Dionex Chromeleon 7.2 SR2 pro řízení a zpracování dat

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda A umožnila plné rozlišení všech 13 antiretrovirálních látek v detekčním okně 2 min s vynikajícími tvary píků (průměrná asymetrie 1,08–1,36) a rozlišením Rs > 2. Optimální využití vysokého tlaku (820 bar) vedlo k cyklu analýzy do 2,4 min. Pro fixní kombinace (11 formulací) byla po úpravě gradientu dosažena doba detekce ~0,7 min při zachování baseline rozlišení a vysoké reprodukovatelnosti retenčních časů (%RSD < 0,1).

Přínosy a praktické využití metody

• Zvýšená propustnost laboratoře díky ultra-rychlým cyklům analýzy
• Vynikající rozlišení a tvar píků pro komplexní směsi až 13 látek
• Stabilita retenčních časů a opakovatelnost vhodná pro QA/QC a výzkumné studie
• Možnost integrace do automatizovaných pracovních postupů

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit o hmotnostní spektrometrickou detekci pro zvýšení citlivosti stopových analýz. Dalšími směry jsou aplikace zelených rozpouštědel, implementace 96-cihelných automatizovaných samplerů a vývoj metod pro nové kombinace antivirotik. V budoucnu lze očekávat i integraci do on-line monitorovacích systémů a vyšší míru digitalizace pracovních postupů.

Závěr

Kombinace UHPLC kolony Hypersil GOLD VANQUISH a Vanquish UHPLC systému umožnila rychlou, robustní a vysoce reprodukovatelnou analýzu antiretrovirálních látek. Přizpůsobitelnost gradientu vedla k výraznému zkrácení doby analýzy až na 0,7 min pro fixní dávkové kombinace, čímž se maximalizovala propustnost a efektivita laboratorních procesů.

Reference

Žádné literární odkazy v původním textu neuvedeny.